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孔海霞: 作品数：18 被引量：84H指数：4; 供职机构：重庆医科大学更多>>; 发文基金：天津市科技型中小企业技术创新基金国家自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

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人三碘甲腺原氨酸抗体的制备和检测方法的建立及其方法学评价: 游离三碘甲腺原氨酸(free3，5，3’-triiodothyronine，FT3)是甲状腺激素之一，因浓度不受结合蛋白的影响，可以直接反应甲状腺功能，检测人血清中的FT3是诊断甲状腺功能亢进的直接指标。但是目前，临床检...; 孔海霞; 关键词：游离三碘甲腺原氨酸化学发光分析法多克隆抗体甲状腺功能亢进

一种铁钴氧化物光热纳米抗菌剂及其制备与应用: 本发明属于纳米生物医学和抗菌材料技术领域，具体公开了一种铁钴氧化物光热纳米抗菌剂及其制备与应用，所述抗菌剂包括铁钴氧化物，所述铁钴氧化物的浓度≤1.3mg/mL；所述铁钴氧化物光热纳米抗菌剂在近红外光照射下具有广谱杀菌性...; 张普李文王燚孔海霞

应用FITC系统建立非均衡竞争游离雌三醇(E3)化学发光法被引量：3: 2012年; 目的建立可以广泛应用于游离雌三醇(E3)检测的方法。方法制备辣根过氧化物酶(HRP)标记兔抗人多克隆抗体及异硫氰酸荧光素(FITC)标记雌三醇类似物。以抗FITC抗体包被发光板,FITC-E3类似物与抗FITC抗体结合形成固相抗原,并与血清中的freeE3竞争结合抗E3抗体-HRP,建立化学发光血清freeE3检测系统(FITC系统),进行方法学评价,并与E3-牛血清白蛋白直接包被系统(非FITC系统)和西门子ADVIACentaur?XP系统进行比较。结果 FITC系统检测线性范围为0.1～40ng/mL,灵敏度为0.1ng/mL;批内变异系数小于5%优于非FITC系统;与西门子ADVIACentaur?XP系统检测结果有良好的相关性(r=0.9657)。结论应用FITC系统建立的非均衡竞争freeE3化学发光免疫分析系统灵敏度高、特异性强,可用于临床标本的检测。; 曾建明雷鹏孔海霞宋启超刘萍; 关键词：游离雌三醇非均衡竞争化学发光免疫分析

应用FITC系统建立非均衡竞争孕酮(P)化学发光法被引量：4: 2012年; 目的建立可以广泛应用于孕酮(P)检测的方法。方法制备辣根过氧化物酶(HRP)标记兔抗人多克隆抗体及异硫氰酸荧光素(FITC)标记孕酮类似物。以抗FITC抗体包被发光板,FITC-P类似物与抗FITC抗体结合形成固相抗原,并与血清中的P竞争结合抗P抗体-HRP,建立化学发光血清P检测系统(FITC系统),进行方法学评价,并与P-牛血清白蛋白直接包被系统(非FITC系统)和罗氏Elecsys2010系统进行比较。结果 FITC系统检测线性范围为0.1～60ng/mL,灵敏度为0.1ng/mL;批内变异系数小于5%优于非FITC系统;与Elecsys2010系统检测结果有良好的相关性(r=0.9619)。结论应用FITC系统建立的非均衡竞争P化学发光免疫分析系统灵敏度高、特异性强,可用于临床标本的检测。; 曾建明雷鹏孔海霞宋启超刘萍; 关键词：孕酮非均衡竞争化学发光免疫分析

抑制性寡核苷酸对染矽尘小鼠γ-干扰素和pSTAT4表达的影响被引量：2: 2013年; 目的探讨抑制性寡核苷酸（suppressive0ligodeoxynucleotides，SupODN）对染矽尘小鼠y-干扰素（IFN-Y）和磷酸化的信号转导子及转录激活子4（pSTAT4）表达的影响。方法Balc小鼠60只随机分为空白对照组、矽尘组、抑制性寡核苷酸组、对照寡核苷酸（controloligodeoxynucleotides，ConODN）组，每组15只。抑制性寡核苷酸组和对照寡核苷酸组分别腹腔注射抑制性寡核苷酸组、对照寡核苷酸各0.3ml（1mg／m1）3h后，经气管一次性注入0．1mlSiO2悬液（5g／L），空白对照组经气管一次性注入等量生理盐水。不同处理7d后处死动物，采用ELISA法检测血清IFN-Y水平；免疫组织化学法检测肺组织中IFN-Y和pSTAT4的表达，并作定量分析；HE染色观察肺组织病理变化。结果HE染色显示，矽尘组小鼠肺组织间隔水肿并增厚，抑制性寡核苷酸组小鼠肺组织炎症较矽尘组减轻。与空白对照组血清：（280．1±41-3）pg／ml，肺组织：（0．249±0．373）ILL较，矽尘组小鼠肺组织IFN-y表达血清：（886_3±81．7）pg／m]，肺组织：（0．270±0．300）]增加，差异有统计学意义（P〈0．05）。抑制性寡核苷酸组小鼠血清中IFN-y表达[（478．5±38．6）pg／m1]明显低于矽尘组和对照寡核苷酸组[（894．5±91．6）pg／m1]，差异有统计学意义（P〈0．01）。与矽尘组比较，抑制性寡核苷酸组小鼠肺组织内IFN-1表达（O．241±0．250）减少，差异有统计学意义（P〈0．05）。与空白对照组（0．279±0．353）比较，矽尘组小鼠肺组织pSTAT4表达（0．313±0．231）增加，差异有统计学意义（P〈O．01）；与矽尘组比较，抑制性寡核苷酸组小鼠肺组织内pSTAT4表达（0．269±0．523）明显减少，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论抑制性寡核苷酸可抑制IFN-y和pSTAT4的表达，对染矽尘小鼠早期炎症有一定的抑制作用，具体机制有待进一步研究。; 雷鹏孔海霞张静妹何宁王世鑫翁亚光; 关键词：矽尘

应用FITC系统建立非均衡竞争游离三碘甲腺原氨酸(FT_3)化学发光法被引量：6: 2012年; 目的制备抗人T3多克隆抗体,应用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanat,FITC)系统开发新型非均衡竞争技术,建立一种能广泛应用于临床检测游离三碘甲腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)的方法。方法以T3-牛血清白蛋白(bovin serum albumin,BSA)为抗原免疫新西兰大白兔,制备抗人T3多克隆抗体,亲和层析法纯化并联接辣根过氧化物酶(horse radish peroxidase,HRP)。用FITC标记T3-类似物。采用抗FITC抗体包被发光板,FITC-T3类似物与抗FITC抗体结合形成固相抗原,通过非均衡竞争法原理,固相抗原与血清中FT3竞争结合抗T3抗体-HRP,通过标准曲线计算FT3浓度,建立方法学评价并与直接用T3-牛血清γ球蛋白(Bovine serum gamma globulin,BGG)包被(非FITC系统)的检测系统相比较。将本方法应用于临床120份血清标本的检测,定量结果与德国罗氏2010电化学发光全自动免疫分析系统(Elec-sys 2010)定量结果进行比较。结果抗体经酶联免疫吸附实验证明对T3、具有高度特异性。应用FITC系统建立的非均衡竞争化学发光免疫分析标准曲线的线性R>0.99,线性范围0.25～50 pg/ml,分析灵敏度为0.25 pg/ml,精密度测试批内、批间变异系数CV<5%,检测结果优于非FITC系统的检测。对于临床血清标本的检测,其定量结果与德国Elecsys2010定量试剂盒的定量结果具有很好的相关性,相关系数r=0.962 2,两者的测定值无显著性差异。结论制备的抗人T3多克隆抗体特异性强,以FITC系统为平台建立的非均衡竞争FT3检测化学发光法具有精密性好、灵敏度高、稳定性强,有良好的准确性,达到临床测定的需求,可代替进口化学发光产品用于临床样本的检测。; 孔海霞刘萍田云霞宋启超王世鑫翁亚光; 关键词：非均衡竞争游离三碘甲腺原氨酸化学发光分析法

肺癌患者血清MMP-9、HE4、CYFRA21-1、CEA、NSE水平变化及其临床意义被引量：37: 2017年; 目的探讨血清基质金属蛋白酶9(MMP-9)、人附睾蛋白4(HE4)、角蛋白19片段(CYFRA21-1)、癌胚抗原(CEA)、神经元烯醇化酶(NSE)在肺癌诊断及病情判断中的作用。方法选取肺癌患者75例(肺癌组,病理类型为鳞癌18例、腺癌40例、小细胞肺癌17例,TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期24例、Ⅲ~Ⅳ期51例),肺部良性疾病患者65例(良性病变组),体检健康者60例(健康对照组)。三组均采用ELISA法检测血清MMP-9,电化学发光法检测血清HE4、CYFRA21-1、CEA、NSE。绘制上述5种血清指标单独及联合检测诊断肺癌的受试者工作特征曲线,计算其敏感性、特异性及准确性,比较不同病理类型及TNM分期的肺癌患者上述5种血清指标水平。结果肺癌组血清MMP-9、HE4、CYFRA21-1、CEA、NSE水平均高于良性病变组及健康对照组(P均<0.01),良性病变组与健康对照组上述指标比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。5种血清指标联合检测诊断肺癌的敏感性(96.00%)高于单项指标检测,但特异性及准确性均降低(分别为53.60%、69.50%)。腺癌患者血清CEA高于鳞癌、小细胞肺癌患者,小细胞肺癌患者血清NSE水平高于鳞癌、腺癌患者(P均<0.05)。TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期的肺癌患者血清CYFRA21-1、CEA、NSE水平均高于Ⅰ~Ⅱ期患者(P<0.05或<0.01)。结论肺癌患者血清MMP-9、HE4、CYFRA21-1、CEA、NSE水平均升高;上述血清指标联合检测有助于肺癌的诊断及病情判断。; 孔海霞李洪娟徐婧玥何丽杰张贺平; 关键词：角蛋白19片段神经元烯醇化酶

染矽尘大鼠毒理效应相关差异基因表达谱的研究: 2011年; 目的研究染矽尘大鼠毒理效应相关差异基因表达谱。方法应用气管暴露法对雄性Wistar大鼠进行二氧化硅（50mg／ml）染尘，对照组大鼠气管内灌注1ml灭菌生理盐水。染尘后第14天处死大鼠，取肺组织。应用Ⅲumina激光共聚焦光纤微珠基因芯片技术，研究大鼠肺组织差异基因表达谱，采用因注释、富集数据库（thedatabase for annotation，visualization and integrated discovery，DAVID）生物信息学分析工具，对差异基因的基因功能和生物学通路进行富集统计学分析。结果检测出的有效基因共22107个，筛选出染矽尘组与对照组的差异基因共1567个，其中上调基因为765个，下调基因为802个。与毒理效应相关的差异基因有461个，其中上调基因为285个，下调的有176个。Real—timePCR实验验证了血红素加氧酶（HMOX1）、过氧化物歧化酶（SOD1）基因上调的趋势和基因芯片结果是一致的。结论二氧化硅粉尘诱导的大鼠肺组织纤维化中起毒理效应的大量相关基因上调或下调，二氧化硅所致的肺纤维化可能存在复杂的基因网络调控系统，其中，毒理机制是肺纤维化发生发展过程中的重萼一环。; 刘萍陈蕾刘伟孔海霞王世鑫涂植光; 关键词：矽尘

应用FITC系统建立非均衡竞争总甲状腺素(TT4)化学发光法被引量：2: 2012年; 目的建立可广泛应用于总甲状腺素(TT4)检测的方法。方法制备辣根过氧化物酶(HRP)标记兔抗人甲状腺素(T4)多克隆抗体及异硫氰酸荧光素(FITC)标记T4类似物。以抗FITC抗体包被发光板,FITC-T4类似物与抗FITC抗体结合形成固相抗原,血清标本经处理后使T4均呈游离状态,固相抗原与血清T4竞争结合抗T4抗体-HRP,建立化学发光法(CLIA)血清TT4检测系统(FITC系统),进行方法学评价,并与T4-牛血清γ球蛋白直接包被系统(非FITC系统)和罗氏公司Elec-sys2010系统进行比较。结果 FITC系统检测线性范围为0.1～320ng/mL,灵敏度为0.1ng/mL;批内变异系数小于5%,优于非FITC系统;与Elecsys2010系统检测结果具有良好的相关性(r=0.9169)。结论应用FITC系统建立的非均衡竞争TT4CLIA分析系统灵敏度高、特异性,可用于临床标本的检测。; 陈蕾孔海霞刘萍宋启超田云霞; 关键词：非均衡竞争甲状腺素化学发光免疫分析

应用FITC系统建立非均衡竞争睾酮(T)化学发光法被引量：1: 2012年; 目的建立可广泛应用于睾酮(T)检测的方法。方法制备辣根过氧化物酶(HRP)标记兔抗人T多克隆抗体及异硫氰酸荧光素(FITC)标记T-类似物。以抗FITC抗体包被发光板,FITC-T类似物与抗FITC抗体结合形成固相抗原,固相抗原与血清中T竞争结合抗T抗体-HRP,建立化学发光法(CLIA)血清T检测系统(FITC系统),进行方法学评价,并与直接用T-牛血清清蛋白包被系统(非FITC系统)和罗氏公司Elecsys2010系统进行比较。结果 FITC系统检测线性范围为0.05～20ng/mL,灵敏度为0.05ng/mL;批内、批间变异系数均小于5%,优于非FITC系统;与Elecsys2010系统检测结果的相关系数为0.9732,测定结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论成功建立基于FITC系统的非均衡竞争T检测CLIA系统,精密度、灵敏度等指标均符合临床要求,可用于临床标本检测。; 陈茶孔海霞雷鹏宋启超刘萍; 关键词：非均衡竞争睾酮化学发光免疫分析

孔海霞

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