刘萍
- 作品数：37 被引量：63H指数：5
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- 基于DNA级联置换反应和多功能DNA纳米片的外泌体microRNA电化学生物传感分析
- 外泌体microRNA（exo-miRNA）是一类内源性、非编码、短片段的核糖核酸分子，由于外泌体膜的保护在体液中具有高的稳定性。研究表明，exo-miRNA可作为肿瘤早期诊断、治疗监测和预后判断的可靠生物标志物。目前，...
- 刘萍
- 关键词：电化学生物传感器微小RNA
- 文献传递
- 应用FITC系统建立非均衡竞争游离雌三醇(E3)化学发光法被引量：3
- 2012年
- 目的建立可以广泛应用于游离雌三醇(E3)检测的方法。方法制备辣根过氧化物酶(HRP)标记兔抗人多克隆抗体及异硫氰酸荧光素(FITC)标记雌三醇类似物。以抗FITC抗体包被发光板,FITC-E3类似物与抗FITC抗体结合形成固相抗原,并与血清中的freeE3竞争结合抗E3抗体-HRP,建立化学发光血清freeE3检测系统(FITC系统),进行方法学评价,并与E3-牛血清白蛋白直接包被系统(非FITC系统)和西门子ADVIACentaur?XP系统进行比较。结果 FITC系统检测线性范围为0.1～40ng/mL,灵敏度为0.1ng/mL;批内变异系数小于5%优于非FITC系统;与西门子ADVIACentaur?XP系统检测结果有良好的相关性(r=0.9657)。结论应用FITC系统建立的非均衡竞争freeE3化学发光免疫分析系统灵敏度高、特异性强,可用于临床标本的检测。
- 曾建明雷鹏孔海霞宋启超刘萍
- 关键词：游离雌三醇非均衡竞争化学发光免疫分析
- 应用FITC系统建立非均衡竞争孕酮(P)化学发光法被引量：4
- 2012年
- 目的建立可以广泛应用于孕酮(P)检测的方法。方法制备辣根过氧化物酶(HRP)标记兔抗人多克隆抗体及异硫氰酸荧光素(FITC)标记孕酮类似物。以抗FITC抗体包被发光板,FITC-P类似物与抗FITC抗体结合形成固相抗原,并与血清中的P竞争结合抗P抗体-HRP,建立化学发光血清P检测系统(FITC系统),进行方法学评价,并与P-牛血清白蛋白直接包被系统(非FITC系统)和罗氏Elecsys2010系统进行比较。结果 FITC系统检测线性范围为0.1～60ng/mL,灵敏度为0.1ng/mL;批内变异系数小于5%优于非FITC系统;与Elecsys2010系统检测结果有良好的相关性(r=0.9619)。结论应用FITC系统建立的非均衡竞争P化学发光免疫分析系统灵敏度高、特异性强,可用于临床标本的检测。
- 曾建明雷鹏孔海霞宋启超刘萍
- 关键词：孕酮非均衡竞争化学发光免疫分析
- 染矽尘大鼠早期肺组织蛋白质双向电泳图谱差异分析被引量：11
- 2009年
- 目的应用比较蛋白质组学方法分析染矽尘大鼠早期肺组织蛋白质表达的变化，寻找矽肺发病早期差异表达蛋白，以探讨矽肺发生发展的相关机制。方法采用随机数字表法将Wistar大鼠分为对照组和染矽尘组（每组4只）。气管暴露法建立染矽尘大鼠模型，14d时处死大鼠取肺组织，提取总蛋白，双向凝胶电泳（two—dimensional gel electrophoresis，2-DE）结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（matrix-assisted laser desorption／ionization time—of-flight mass spectrometry．MALDI-TOF-MS）分析鉴定差异蛋白。免疫印迹法（Western blotting）检测差异蛋白在肺组织中的表达。结果初步筛选出存在明显差异的11个蛋白点，经质谱鉴定得到6种蛋白质。与对照组相比，染矽尘组组织蛋白酶D前体、硫氧还蛋白过氧化物酶-1（peroxiredoxin-1，Prx-1）、热休克71000同源蛋白（heat shock cognate71000 protein，HSP7C）、不均一核糖核酸核蛋白A3（hnRNPA3）、表皮脂肪酸结合蛋白（E—FABP）表达上调，两组中吸光度值（A值）分别为116．50±12．56、148．75±22．40；40．00±1．63、66．00±13．93；51．25±7．37、92．75±8．69；83．00±6．48、122．75±24．62；50．75±6．50、93．50±23．10；100．25±19．99、142．50±21．21；差异有统计学意义（t值分别为-2．51、-3．71、-7．28、-3．12、-3．56、-2．90，P值均〈0．05）。而SEC14类蛋白3表达下调，两组A值为153．00±11．28、109．75±18．32，差异有统计学意义（t=4．02，P〈0．01）。Western blotting结果显示差异表达蛋白Prx-1在染矽尘组与对照组中A值分别为0．61±0．05、0．35±0．05，染矽尘组中表达上调（t=-7．24，P〈0．01），与双向电泳结果一致。结论应用2-DE建立了染矽尘大鼠早期肺组织双向电泳图谱，分离并初步鉴定了6种与矽肺相关的差异表达的蛋白质，为研究矽肺发生发展相关机制提�
- 陈娟娟蒋洪彦刘萍刘伟魏茂提王世鑫翁亚光
- 关键词：矽肺电泳凝胶
- 一种检测乙肝外泌体miRNA的电化学传感器及其制备与应用
- 本发明公开了一种检测乙肝外泌体miRNA的电化学传感器及其制备与应用。所述传感器包括工作电极：表面固定有捕获探针巯基标记的DNA纳米支架；靶物质T链诱导的级联链置换反应(L‑TEDCR)体系：级联T型结构复合物Ts、级联...
- 丁世家刘萍舒晓佳
- 文献传递
- 检测EBV相关基因的电化学生物传感器及其制备方法
- 本发明提供一种检测EBV相关基因的电化学生物传感器及其制备方法，该传感器包括底物链B、底物链A以及连接链，本发明构建了新型均相酶学体系和双模板化的纳米材料，该传感器无需复杂反应底物修饰，电流响应迅速，灵敏度高、特异性强，...
- 颜玉蓉丁世家程伟阙海英王通晏小玉马洪敏刘萍甘秀锋
- 矽肺患者血清克拉拉细胞蛋白和表面活性蛋白D的改变被引量：16
- 2007年
- 目的 探讨矽肺患者血清克拉拉细胞蛋白（CC16）和表面活性蛋白D（SP-D）的改变。方法 以无接尘史健康体检者为对照组，按接尘史及X线胸片改变确定矽尘接触组、0组、Ⅰ期矽肺组，每组30人，采静脉血5ml，以ELISA法检测血清中CC16和SP-D含量并进行分析比较。结果矽尘接触组、0组、Ⅰ期矽肺组血清CC16含量分别为（4．54±2．10）、（3.81±1．87）和（4．04±1．87）ng／ml，明显低于对照组。差异有统计学意义（P〈0．01）；对照组内不吸烟人群的血清CCl6含量高于吸烟人群，差异有统计学意义（P〈0．05），矽尘接触组、0^＋组且、Ⅰ期矽肺组之间血清CCl6含量差异无统计学意义（P〉0．05）。0^＋组、Ⅰ期矽肺组血清SP-D含量分别为（47．41±16．78）和（110．33±54．22）ng／ml，明显高于对照组和矽尘接触组，差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）；Ⅰ期矽肺组血清SP-D含量高于0^＋组，差异有统计学意义（P〈0．01）。以血清CC16和SP-D建立判别分析方程，对对照组、矽尘接触组、Ⅰ期矽肺组的正确判别率分别为86．7％、86．7％、76．7％，总体判别效率为84．2％。结论 长期暴露于矽尘环境下的工人血清CC16含量降低，而SP-D量进行性升高。
- 刘萍王世鑫陈蕾魏茂提梁先才王奕飞涂植光
- 关键词：克拉拉细胞蛋白表面活性蛋白D矽肺
- 一种CTSDR与CRISPR/Cas联用检测miRNA的荧光传感器及其制备与应用
- 本发明属于荧光传感器技术领域，具体公开了一种CTSDR与CRISPR/Cas联用检测miRNA的荧光传感器及其制备与应用。所述荧光传感器的制备和检测miRNA过程为：采用DNA单链探针C和B制备双链产物C‑B复合物，将C...
- 颜玉蓉丁世家张德才李星蓉郑清源甘秀峰刘萍舒晓佳蔡晓颖白惠洁凡宁可程文倩
- 检测EBV相关基因的电化学生物传感器及其制备方法
- 本发明提供一种检测EBV相关基因的电化学生物传感器及其制备方法，该传感器包括底物链B、底物链A以及连接链，本发明构建了新型均相酶学体系和双模板化的纳米材料，该传感器无需复杂反应底物修饰，电流响应迅速，灵敏度高、特异性强，...
- 颜玉蓉丁世家程伟阙海英王通晏小玉马洪敏刘萍甘秀锋
- 文献传递
- 应用FFIITTC系统建立非均衡竞争游离甲状腺素化学发光法被引量：1
- 2012年
- 【目的】制备抗人甲状腺素多克隆抗体并应用异硫氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate,FITC）系统建立非均衡竞争FT4化学发光法。【方法】以T4-牛血清白蛋白（bovin serum albumin,BSA）为抗原免疫新西兰兔,制备抗人T4多克隆抗体,亲和层析法吸附掉与3-碘-L-甲状腺原氨酸（3-iodo-L-tyrosine）、3,5-二碘-L-甲状腺原氨酸（3,5-diiodo-L-tyrosine）、D-三碘甲状腺原氨酸（D-T3）、L-三碘甲状腺原氨酸（L-T3）、反三碘甲状腺原氨酸（rT3）有交叉反应多抗,纯化特异性的抗人T4多克隆抗体并用FITC标记T4类似物,用抗FITC抗体包被微孔板。反应时,将FT4校准品或样品、FITC-T4类似物、T4抗体-HRP依次加入包被有抗FITC抗体的化学发光板中,FITC-T4类似物与FT4校准品或样品,非均衡竞争结合T4抗体-HRP,从而在微孔板上形成免疫反应复合物T4类似物-T4抗体-HRP,通过酶促化学发光反应,就可以显示出与样品FT4浓度负相关的相对光单位（relative light unit,RLU）,建立FT4化学发光检测方法。【结果】抗体经酶联免疫吸附实验证明对T4具有高度特异性,与3-iodo-L-tyrosine、3,5-diiodo-L-tyrosine、L-T3、D-T3、rT3无交叉反应。该方法建立的试剂盒标准曲线的线性相关系数不小于0.9900;分析灵敏度为0.9 pmol/L;线性检测范围0.9~130 pmol/L;精密度测试批内变异系数CV〈10%;与进口发光免疫分析系统做线性相关比较,线性回归系数为1.0852,相关系数为0.9673,临床符合率良好;本方法建立的试剂盒经加速稳定性试验37℃放置7 d与2~8℃放置7 d无异。【结论】综上所述,应用FITC系统建立的非均衡竞争FT4化学发光免疫分析灵敏度高、特异性好适于临床诊断应用。
- 刘萍孔海霞张影田云霞宋启超涂值光
- 关键词：非均衡竞争游离甲状腺素多克隆抗体化学发光法
