孟茹
- 作品数：17 被引量：53H指数：5
- 供职机构：石河子大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 结核杆菌实时荧光定量PCR快速检测方法的建立及应用被引量：10
- 2010年
- 针对结核杆菌CFP10基因序列设计并合成了1对引物,以构建的含有该引物扩增序列的重组质粒作为阳性标准品,建立了检测CFP10基因的SYBR GreenⅠreal-timePCR方法。检测结果显示,该方法线性关系好,标准曲线的相关系数达到0.997,对初始模板的检出下限为1×101copies/μL,比常规PCR方法高100倍。表明建立的real-time PCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可以用于结核杆菌CFP10的病原检测及定量分析。
- 孟茹陈创夫张辉乔军王正荣
- 关键词：结核杆菌SYBR
- 布鲁氏菌磷酸葡萄糖变位酶对胚胎滋养层细胞的致炎作用被引量：5
- 2012年
- 【目的】本文研究布鲁氏菌磷酸葡萄糖变位酶(pgm)基因缺失株和PGM蛋白对胚胎滋养层细胞(HPT-8)的损伤作用及其引起炎症反应时细胞因子的变化,探讨布鲁氏菌pgm基因的生物学功能。【方法】本文分别用布鲁氏菌pgm基因缺失株和纯化的PGM蛋白感染胚胎滋养层细胞,通过细胞形态学的观察和酶联免疫反应检测其对细胞的损伤作用以及细胞因子的变化。【结果】本实验获得了纯化的PGM蛋白,成功构建了pgm基因缺失株,采用该基因缺失株免疫小鼠后,采集血液分离血清,虎红平板实验和试管凝集实验结果显示为阴性;pgm缺失株和PGM蛋白感染HPT-8细胞均能诱发贴壁细胞脱落;而且pgm基因缺失株侵袭HPT-8细胞的能力较M5-90明显降低。pgm基因缺失株侵袭HPT-8细胞诱导产生的细胞因子IL-6、TNF-α和LDH均高于M5-90对照组,差异极显著(P<0.01),而细胞因子IL-10的分泌变化不明显,PGM蛋白感染HPT-8细胞时,其细胞因子LDH表达水平高于PBS对照组,差异极显著(P<0.01),而IL-6、IL-10和TNF-α的表达水平明显低于PBS对照组,差异显著(P<0.05)。【结论】本研究表明,PGM蛋白和pgm缺失株可致胚胎滋养层细胞损伤,且引发滋养层细胞细胞因子的表达变化,为进一步研究布鲁氏菌感染宿主细胞的分子机制奠定了基础。
- 王震张辉张艳郭飞张豫陈瑞花孟茹李志强张倩陈创夫
- 关键词：布鲁氏菌
- 布鲁氏菌ery操纵子突变株生物学特性分析被引量：3
- 2013年
- 布鲁氏菌ery操纵子参与赤藓醇代谢.赤藓醇能够促进布鲁氏菌的生长.为进一步研究布鲁氏菌引发宿主流产的分子机制,采用基因重组技术构建布鲁氏菌ery操纵子启动子缺失株(△ery),通过体内外实验探讨布鲁氏菌ery操纵子的生物学功能.研究结果显示,获得了布鲁氏菌ery操纵子缺失株;布鲁氏菌ery操纵子缺失株侵染胚胎滋养层细胞脱落较亲本株明显下降;巨噬细胞CFU计数缺失株作用组和亲本株作用组差异显著(P<0.05).试管凝集和虎红平板实验结果显示均出现凝集现象;检测血清中细胞因子IL-10和TNF-α的表达水平,△ery诱导机体产生的IL-10和TNF-α明显低于亲本株(P<0.05).小鼠脾脏细菌CFU计数结果显示,△ery较亲本株毒力明显下降.本研究表明,布鲁氏菌ery操纵子启动子缺失株毒力较亲本株明显下降,为进一步揭示布鲁氏菌引起流产的致病机制提供了一定的理论依据.
- 桂丹张辉孟仁孟茹张豫孙志华蒋攀文李天森陈创夫
- 关键词：布鲁氏菌毒力
- 布鲁氏菌实时荧光定量PCR检测方法与血清快速诊断试纸的初步研究
- 布鲁氏菌病（Brucellosis，简称布病）是由布鲁氏菌引起的一种人兽共患传染病。危害人畜健康并给畜牧业发展造成巨大损失。该病在世界范围内广泛流行，我国也是布病的高发国家，新疆、青海、西藏、内蒙古等地区尤为严重，有效的...
- 孟茹
- 关键词：布鲁氏菌病人兽共患传染病胶体金
- 一种LAMP法鉴别布鲁氏菌流行株和M5株的引物组、试剂盒及其应用
- 本发明提供了一种LAMP法鉴别布鲁氏菌流行株和M5株的引物组、试剂盒及其应用，属于分子生物学技术领域。本发明所述引物组包括两条外引物F<Sub>3</Sub>和B<Sub>3</Sub>；两条内引物FIP和BIP，所述内...
- 张辉陈创夫刘洋孟茹张静豆晓霞王勇王震张豫
- 文献传递
- 布鲁氏菌PGM蛋白对细胞炎症反应的影响
- 本文研究布鲁氏菌磷酸葡萄糖变位酶(pgm)基因缺失株和PGM蛋白对胚胎滋养层细胞(HPT-8)的损伤作用及其引起炎症反应时细胞因子的变化，探讨布鲁氏菌pgm基因的生物学功能。本文分别用布鲁氏菌pgm基因缺失株和纯化的PG...
- 张辉王震张艳张豫陈瑞花孟茹张倩陈创夫
- 关键词：布鲁氏菌细胞炎症
- 文献传递
- 人畜布鲁氏菌抗体免疫层析试纸及其制备方法
- 本发明涉及人畜共患病免疫诊断领域，公开了一种基于胶体金为标记材料的布鲁氏菌病抗体检测免疫层析试纸条及其制备方法。该布鲁氏菌病抗体快速检测技术以金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)标记40纳米的胶体金，喷涂在玻璃纤维上制成金标垫...
- 陈创夫张辉王远志石峰鲁之子孟茹
- 文献传递
- 布鲁氏菌糖基转移酶对细胞炎症反应的影响
- 研究目的研究布鲁氏菌糖基转移酶(WboA)在诱发胚胎滋养层细胞炎症反应中的作用。研究表明WboA蛋白具有细胞毒作用,布鲁氏菌的致炎作用与脂多糖O链相关,为进一步阐明布鲁氏菌感染宿主细。胞的发病机制奠定了基础。材料方法以羊...
- 张豫张辉张艳孟茹王震陈瑞花张俊波鲁芝子陈创夫
- 布鲁氏菌外膜蛋白BP26细胞毒性作用的研究被引量：8
- 2012年
- 【目的】布鲁氏菌外膜蛋白BP26是布鲁氏菌的重要毒力因子,本研究采用bp26基因缺失株和BP26蛋白分别与胚胎滋养层细胞(HPT-8)作用,探讨布鲁氏菌bp26基因的生物学功能。【方法】采用Ni柱亲和层析法纯化BP26蛋白,overlap技术构建布鲁氏菌bp26基因缺失株,用BP26蛋白和bp26基因缺失株分别侵染HPT-8细胞,观察细胞形态变化,ELISA检测上清中的细胞因子。【结果】从布鲁氏菌疫苗株M5-90克隆出bp26基因并在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中成功表达,获得纯化的BP26蛋白,经SDS-PAGE验证正确,Western-Blot鉴定具有免疫原性。将目的片段bp26基因的上下臂插入到自杀载体pGEM-7zf中,电转至布鲁氏菌疫苗株M5-90感受态细胞中,成功筛选出了具有遗传稳定性的bp26基因缺失株。用BP26蛋白与bp26基因缺失株分别侵染HPT-8层细胞,BP26蛋白使细胞变形且贴壁不牢,缺失株导致细胞大量脱落溶解,ELISA检测蛋白侵染HPT-8细胞诱导产生的细胞因子IL-6、TNF-α和LDH均高于PBS对照组,差异极显著(P<0.01),而细胞因子IL-10的分泌下降。缺失株侵染HPT-8细胞诱导产生的细胞因子IL-6、TNF-α均高于M5-90对照组,LDH和IL-10均低于M5-90对照组,差异显著(P<0.05)。【结论】成功获得了布鲁氏菌BP26蛋白和M5-90Δbp26缺失株,BP26蛋白可以引起HPT-8细胞的炎性反应,有细胞毒性作用,bp26基因缺失株对HPT-8细胞有损伤作用,bp26基因在布鲁氏菌侵染宿主细胞过程中起重要作用。
- 陈瑞花张辉唐利燕孟茹张豫王震李志强张俊波陈创夫
- 关键词：布鲁氏菌细胞因子
- 布氏杆菌和结核杆菌二重实时荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用被引量：17
- 2010年
- 本试验旨在利用二重实时荧光定量PCR技术建立鉴别诊断布氏杆菌和结核杆菌的方法。通过筛选布氏杆菌omp10、omp19、omp17、omp25、omp31和结核杆菌cfp10基因的最佳引物组合,建立二重实时定量PCR鉴别诊断方法,对该方法进行稳定性、特异性和敏感性试验,并对临床样品及模拟样品进行检测。经筛选布氏杆菌的omp25基因与结核杆菌cfp10基因引物组合最佳,该二重实时荧光定量PCR方法中布氏杆菌Tm值为88～89℃,结核杆菌Tm值为90～91℃,对其他供试的菌株则为阴性;该方法对布氏杆菌的DNA最低检出量为20拷贝.μL-1,结核杆菌为50拷贝.μL-1,两病原都存在时为100拷贝.μL-1,比常规PCR高100倍。利用所建立的二重荧光定量PCR方法及常规PCR,对24份结核痰样、11份布氏杆菌基因粗提物及30份模拟奶样进行检测,符合率为100%。本试验建立的方法可用于同时检测布氏杆菌和结核杆菌,并且具有良好的特异性、敏感性和稳定性。
- 孟茹陈创夫张辉乔军任艳王正荣蒋松
- 关键词：布氏杆菌结核杆菌
