庞伟
- 作品数：14 被引量：59H指数：5
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：云南省教育厅科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 人轮状病毒NSP4蛋白131和133位氨基酸变异对毒力影响的研究被引量：1
- 2007年
- 目的研究两株A组人轮状病毒NSP4蛋白131位和133位氨基酸位点的变异对毒力的影响。方法从昆明地区2002年和2005年秋冬季婴幼儿腹泻流行期不同程度腹泻患儿中分离得到两株轮状病毒流行株02k38和05k44,RT-PCR扩增NSP4全长基因,进行cDNA序列测序。通过pGEX-5X-1载体,转化E.coliBL21以谷胱苷肽S-转移酶融合蛋白的形式表达两株病毒的NSP4蛋白C-端86～170位氨基酸（GST-NSP486-170）;并酶切融合头纯化得到两种NSP486-170蛋白,在ICR乳鼠中比较这两种蛋白致小鼠腹泻的差异。结果两种NSP486-170蛋白毒性无差异。结论两株轮状病毒131位和133位氨基酸位点的变异不影响毒力的改变,其致腹泻活性没有明显差异（P〉0.05）。
- 李晓琳蒋立虹孟明耀庞伟王萍李亚雄陈智豫刘建生侯宗柳
- 关键词：轮状病毒腹泻
- 昆明婴幼儿腹泻的轮状病毒分子基因特征研究
- 2006年
- 目的了解昆明婴幼儿腹泻中轮状病毒感染情况。方法收集昆明医学院第一附属医院儿科2004年10-12月住院的腹泻的患儿粪便标本60份，采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）法和RT—PCR法进行轮状病毒分型。结果60份粪便标本中，29份检测到A组轮状病毒RNA基因，阳性检出率为48.3％，未发现B组及C组轮状病毒。其中RNA长型有29份（100％），未发现短型和混合型。对29份有明确编号的轮状病毒阳性标本来源的患儿分析显示，平均发病年龄10.5个月。29份标本中，有20份可用RT—PCR分型，均为G3型，未发现其他型。结论A组轮状病毒是昆明地区5岁以下婴幼儿腹泻病的主要病原，3月龄-2岁婴幼儿是轮状病毒的易感人群，以冬季10月份至12月份为流行高峰，基因组以长型为主，血清型为G3型。
- 黄永坤甄双平侯宗柳戚勤庞伟
- 关键词：轮状病毒腹泻婴幼儿分子基因
- 甲型肝炎减毒活疫苗(H2株)和灭活疫苗(L8株)诱导小鼠体液及细胞免疫应答被引量：1
- 2005年
- 目的评估甲型肝炎减毒活疫苗和灭活疫苗的免疫学效果。方法用甲型肝炎减毒活疫苗(H2株)和灭活疫苗(L8株)分别经腹腔免疫BALBc小鼠后,用ELISA法检测血清中抗HAVIgG、TNFα、IFNγ和IL2;用流式细胞仪对全血中T细胞亚群分类;3HTdR掺入法检测T淋巴细胞增殖。结果减毒活疫苗组在初免后诱导的体液和细胞免疫水平均低于灭活疫苗组,加强免疫后,与灭活疫苗相当。灭活疫苗组IFNγ的峰值出现时间较减毒活疫苗组晚,但水平较高。结论两种疫苗均可诱导体液和细胞免疫应答,减毒活疫苗进行加强免疫后可诱导更好的系统免疫应答。
- 徐冬蕾刘建生孟明耀庞伟马进王萍王晓辉陈统球侯宗柳
- 关键词：减毒活疫苗细胞免疫应答灭活疫苗体液肝炎甲型淋巴细胞增殖
- 昆明地区2002-2004年轮状病毒肠炎患儿的病毒分子流行病学特征被引量：28
- 2006年
- 目的 研究昆明地区2002-2004年轮状病毒肠炎惠儿的病毒分子流行特征。方法 收集昆明医学院第一附属医院2002、2003、2004年9-12月儿科住院和门诊轮状病毒肠炎患儿的粪便标本计210份。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法检浸11轮状病毒基因组，用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）以及巢式．PCR（net-PCR）对5种主要的VP7的血清型（G1、G2、G3、G4和G9）进行分型，并采用RT-PCR对VP7阳性标本进行NSP4（非结构蛋白4）的基因扩增，选取30份标本用net-PCR法扩增出NSP4 CDNA 500bp送去测序。结果 210份标本中轮状病毒基因阳性143份（68．1％），其中长型143份，未发现短型和混合型。143份阳性标本行RT-PCR扩增VP7全基因，134份获得阳性产物，进一步用net-PCR分型显示G3型73例（73／134，54．5％），G1型38例（28．4％），未分型11例（8．2％），混合型8例（6％），G4型4例（3％），未发现G2和G9型。所有VP7阳性标本均可髓扩增出NSP4的全长。其中30份标本送去测序显示有变异。结论 A组轮状病毒是目前昆明地区婴幼儿腹泻的主要致病原，在不同的3年中，轮状病毒电泳型以长型为主，血清型以G3、G1型为主，G4型少见，未见G2、G9型。3年监测结果显示NSP4存在变异，但未发现轮状病毒肠炎临床症状与NSP4的变异有关。
- 甄双平黄永坤侯宗柳李海林戚勤刘建生庞伟赵亚玲
- 关键词：轮状病毒肠炎分子
- 腹泻患儿轮状病毒VP7基因分型与临床的关系被引量：3
- 2005年
- 目的研究昆明地区2003年9～12月婴幼儿轮状病毒腹泻分子流行病学及临床特点.方法采用逆转录-聚合酶链法(RT-PCR)扩增婴幼儿腹泻大便样本中编码轮状病毒VP7蛋白的全基因片断,用巢式-聚合酶链反应(nested PCR)对扩增得到的VP7基因进行分型.结果 1.昆明地区2003年秋冬季50份标本能定型者32份(占64%).其中G3型占93.75%(30/32);混合型占6.25%(2/32),均为G1+G3型.本次分型中未见G2及G4型.2.2003年9～12月轮状病毒腹泻临床特点为病程短,脱水程度轻,腹泻次数少,电解质紊乱及酸中毒少见.结论1.2003年9～12月昆明地区轮状病毒流行株以G3型为主,与以往比较出现了流行株的转变.2.G1型感染的临床表现较G3型重.
- 黄永坤戚勤侯宗柳李海林文革生庞伟周丽芳
- 关键词：轮状病毒属
- 甲型肝炎灭活疫苗有效剂量的评价被引量：3
- 2005年
- 目的 评价佐剂吸附甲型肝炎成品疫苗有效免疫剂量。方法 将 4个厂家的 4批甲型肝炎灭活疫苗进行解离吸附后 ,检测比较HAV抗原含量 ;通过小白鼠体内效力实验 ,计算半数有效稀释倍数 ,比较评价各组疫苗的免疫效力。结果 体外吸附解离HAV抗原含量与体内免疫效力相偏离 ,传统概念上的半数有效剂量 (ED50 )不能用作比较评价指标。结论 体内半数有效稀释倍数可用于甲型肝炎灭活疫苗有效剂量的评价。
- 刘建生庞伟孟明耀马进杨丽仙张鸣陈统球侯宗柳
- 关键词：甲型肝炎灭活疫苗
- 甲型肝炎病毒抗原定量参比品的研制
- 2005年
- 目的制备甲型肝炎病毒抗原定量参比品.方法依据<甲型肝炎灭活疫苗制造及检定规程>制备了1批甲肝病毒抗原参比品,并进行蛋白质含量测定、HAV蛋白纯度分析和酶标抗原含量标化.结果经纯化,杂蛋白去除率达99.9%,参比品的纯度大于95%;抗原含量在20～80EU/ml范围内,抗原含量的对数与其A值呈剂量-效应关系.结论该参比品可用于甲肝病毒ELISA定性及定量标定.
- 刘建生庞伟孟明耀马进王萍杨丽仙陈统球侯宗柳
- 关键词：甲型肝炎病毒蛋白质
- 两株Wa株人源轮状病毒NSP4蛋白的表达及其致ICR小鼠腹泻的毒力比较被引量：3
- 2005年
- 目的研究两株Wa株人源轮状病毒NSP4蛋白139位氨基酸位点的变异对毒力的影响。方法从2002～2004年昆明地区婴幼儿轮状病毒感染者大便样品中,通过RT-PCR,PCR扩增了22株轮状病毒株的NSP4全长基因、cDNA序列,并对cDNA序列测序,发现这些病毒株的NSP4氨基酸序列高度保守,仅在79位、139位氨基酸位点存在差异。选取139位氨基酸不同(V/I)的两株病毒株,在E.coli BL21中,用pGEX5X-1载体融合表达了两株病毒的86～175位氨基酸(GST-NSP4_(86-175);并酶切融合头得到两种NSP4_(86-175)蛋白,在ICR乳鼠中比较这4种不同蛋白致小鼠腹泻的差异。结果发现GST-NSP4_(86-175)蛋白毒性比NSP4_(86-175)蛋白强,而139位氨基酸不同(V/I)的两株病毒株的NSP4_(86-175)蛋白毒性没有明显的差异。结论139位氨基酸位点的变异并不影响NSP4蛋白的毒力改变。
- 庞伟黄永坤孟明耀王萍刘建生徐冬蕾戚勤侯宗柳
- 关键词：轮状病毒腹泻
- 甲型肝炎灭活疫苗(L-8株)口服及腹腔注射Bal b/c小鼠的免疫反应评价被引量：1
- 2005年
- 目的 比较评价甲型肝炎(甲肝)灭活疫苗(L 8株)不同途径接种Balb/c小鼠所诱导产生的免疫效应。方法将32 0EU/0 5ml的实验疫苗1次口服及腹腔注射免疫实验动物,于2周、4周时收集血液样本,用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测抗体反应,同时动态检测免疫小鼠外周血T淋巴细胞亚群及肿瘤坏死因子(TNF) α、干扰素(IFN) γ。结果 不论是腹腔注射或是口服免疫均能诱导产生良好有效的体液免疫效应。腹腔免疫后CD+ 4 T细胞百分比轻微下降,而CD+ 8T细胞百分比上升趋势及幅度明显,CD+ 4 /CD+ 8比值明显下降;而口服免疫小鼠外周血CD+ 4 T细胞百分比持续上升,CD+ 8T细胞百分比亦同步升高,两者上升幅度基本一致,CD+ 4 /CD+ 8比值无明显改变。另外,两种途径免疫接种均可诱导产生高滴度的内源性IFN γ。结论 有必要对甲肝灭活疫苗口服免疫的机制及其开发利用作进一步的研究。
- 刘建生徐冬蕾孟明耀庞伟马进陈统球侯宗柳
- 关键词：甲型肝炎灭活疫苗免疫效应口服免疫
- 甲型肝炎灭活疫苗的稳定性研究被引量：5
- 2005年
- 目的 观察甲型肝炎(甲肝)灭活疫苗在2℃～8℃保存条件下的稳定性。方法 在2℃～8℃保存条件下,用不同批号的甲肝灭活疫苗免疫动物,检测血清抗体效价,进行效力试验评价;按2 0 0 0年版《中国生物制品规程》测定pH值变化情况,进行异常毒性试验和无菌试验。结果 5批甲肝灭活疫苗在2℃～8℃保存4 2个月半数有效量(ED50 )无明显变化,无菌试验阴性,异常毒性试验合格,pH值变化<0 2 ,不同抗原含量保存在2℃～8℃30个月也无明显变化,批间无明显差异。结论 医学生物学研究所生产的甲肝灭活疫苗2℃～8℃条件下可保存3年,其免疫原性无明显变化,其它理化指标均符合《中国生物制品规程》要求。
- 邵聪文刘建生徐冬蕾王晓辉庞伟阳选祥金炜翔侯宗柳陈统球
- 关键词：甲型肝炎灭活疫苗稳定性
