目的研究布洛芬对大鼠皮质缺血半暗带酸敏感离子通道的影响,探讨其对脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法健康雄性成年SD大鼠随机分为4组:假手术+溶媒(S+R)组、假手术+布洛芬(S+B)组、模型+溶媒(C+R)组、模型+布洛芬(C+B)组,每组12只。假手术组只分离血管,不进行栓塞;模型组常规建立大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型;布洛芬组于大脑中动脉阻塞前1 h及之后每隔8 h腹腔注射布洛芬(80 mg/kg),共240 mg/(kg·24 h);溶媒组于相同时间点腹腔注射相应体质量的精氨酸溶液。术后24 h进行神经行为学评分、TTC染色观察脑梗死容积和Western blot检测皮质缺血半暗带酸敏感离子通道1a(acid-sensing ion channel 1a,ASIC1a)和酸敏感离子通道2a(acidsensing ion channel 2a,ASIC2a)的总蛋白表达和膜蛋白含量。结果大鼠神经行为学评分C+R组(6.06±0.35)与S+R组(17.56±0.15)大鼠相比明显降低(P﹤0.05);C+B组神经行为学评分(11.94±0.33)与C+R组相比有所提高(P﹤0.05),且脑梗死容积百分比前者(11.24%±0.93%)较后者(20.03%±1.74%)明显减小(P﹤0.01);C+R组大鼠皮质缺血半暗带ASIC1a总蛋白的相对表达水平(0.99±0.07)与S+R组(1.00±0.04)相比没有明显差异(P=0.12),但ASIC1a膜蛋白的含量明显升高(1.40±0.11 vs 0.96±0.04,P﹤0.05)、ASIC2a总蛋白的表达明显增加(1.87±0.14 vs 0.98±0.07,P﹤0.01),C+B组ASIC1a的总蛋白表达水平(0.79±0.08)与C+R组(0.99±0.07)相比有所下调,但差异无统计学意义(P=0.07),C+R组较C+B组ASIC1a膜蛋白的含量(1.40±0.11 vs 0.98±0.12)以及ASIC2a总蛋白的表达(1.87±0.14 vs 1.18±0.12)明显增加(P﹤0.05)。结论布洛芬能明显改善大鼠MCAO术后的神经行为学障碍、缩小脑梗死容积,这种作用可能通过抑制ASIC2a的表达上调,减少ASIC1a的膜蛋白含量。
目的探讨microRNA-134(miR-134)及环腺苷酸应答元件结合蛋白(cyclic AMP response element binding protein,CREB)在老年小鼠术后认知功能障碍发病机制中的作用。方法 68只老年C57BL/6小鼠随机分为4组:对照组(con)、异氟醚组(iso)、手术组(sur)、异氟醚+手术组(iso+sur)。对照组行假手术,异氟醚组1.8%异氟醚吸入1.5 h,手术组行局麻腹部手术,异氟醚+手术组1.8%异氟醚吸入1.5 h+局麻腹部手术。术后行Morris水迷宫实验评估小鼠认知功能,并分别于术后第1、3、7天取小鼠海马行q RT-PCR检测miR-134表达,Western blot检测CREB、Ser133位点磷酸化CREB(pCREB)、脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)、突触后致密95(postsynaptic density 95,PSD95)的表达。结果与对照组相比,手术组小鼠术后水迷宫登台潜伏期延长(P<0.05),目标象限停留时间缩短(P<0.01),穿台次数减少(P<0.05);与手术组相比,异氟醚+手术组小鼠登台潜伏期缩短(P<0.05),目标象限停留时间延长(P<0.05)。与对照组相比,手术组小鼠海马组织miR-134表达增加(0.219±0.013 vs 0.277±0.017),p-CREB/CREB表达比值降低(0.655±0.025 vs 0.379±0.053),CREB、BDNF、PSD95表达减少(0.359±0.023 vs 0.307±0.027,0.377±0.031 vs 0.246±0.019,1.066±0.081 vs 0.839±0.098)(P均<0.05);与手术组相比,异氟醚+手术组小鼠海马miR-134表达减少(0.277±0.017 vs0.235±0.020),p-CREB/CREB表达比值升高(0.379±0.053 vs 0.605±0.037),CREB、BDNF表达增加(0.307±0.027 vs0.345±0.034,0.246±0.019 vs 0.341±0.017)(P均<0.05)。结论腹部手术致老年小鼠术后早期学习记忆功能受损,异氟醚吸入全麻下行腹部手术可缓解该损伤,可能的机制是手术创伤使海马中miR-134表达增加,抑制CREB活性,造成突触可塑性下降,引起学习记忆功能损伤。
