张蕾
- 作品数：26 被引量：142H指数：5
- 供职机构：湖北医药学院附属人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金湖北省教育厅青年基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- PEP-1-CAT预处理对H9c2细胞缺氧复氧损伤的保护作用
- 2012年
- 目的:探讨细胞穿透肽PEP-1介导的人过氧化氢酶(catalase,CAT)对H9c2细胞缺氧复氧损伤的保护作用。方法:利用基因工程方法表达和纯化His-tag-PEP-l-CAT融合蛋白,将H9c2细胞随机分为正常对照组(CTL)、缺氧复氧组(H/R)、H/R加CAT组(H/R+CAT)、H/R加PEP-1-CAT组(H/R+PEP-1-CAT)。分别向H/R+PEP-1-CAT及H/R+CAT组加入2 mol/L的PEP-1-CAT及CAT500μl处理6 h,将各组细胞置于缺氧箱中缺氧21 h,再复氧6 h。采用试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)及丙二醛(MDA)水平;通过流式细胞仪检测细胞的凋亡水平;通过Western blot检测凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果:与H/R组相比,H/R+PEP-1-CAT组的细胞的LDH、MDA、细胞的凋亡率及Bax的表达量均明显下降,Bcl-2的表达量升高(P<0.05)。结论:PEP-1-CAT预处理通过抗氧化和抗凋亡的作用发挥对H9c2细胞缺氧复氧损伤的保护作用。
- 魏双王家宁唐俊明黄永章郭凌郧张蕾郑飞孔霞
- 关键词：缺氧复氧过氧化氢酶H9C2细胞
- RGC32在肿瘤中的表达及其临床意义被引量：1
- 2015年
- 补体应答基因32(RGC32)作为一种重要的补体应答基因在多种正常组织及肿瘤中广泛表达,并发现其具有调控细胞周期、促进细胞分化、调节免疫等生物学功能。近年研究结果显示RGC32在不同肿瘤中的表达及作用具有差异性。在结直肠癌、胰腺癌、非小细胞肺癌等多种肿瘤中RGC32具有正向调控作用,然而在神经胶质瘤和少数非小细胞肺癌中则可作为一种肿瘤抑制因子存在。鉴于RGC32在肿瘤中作用的复杂性,本文将对RGC32在不同肿瘤中的作用及可能机制进行综述,旨在为后来研究者提供研究方向。
- 朱凤徐文谢洋洋周旋吴泓波张蕾
- 关键词：肿瘤上皮间质转化转化生长因子-Β
- 携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒的构建及其在人血管平滑肌细胞中的表达被引量：6
- 2009年
- 目的:构建携带绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein,GFP)基因的重组腺病毒质粒pAd-GFP,制备重组腺病毒Ad-GFP,并使GFP在血管平滑肌细胞中得到高效表达。方法:将线性化的穿梭质粒pRNAT-H1.1与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在感受态BJ5183内进行同源重组,并筛选出阳性重组子pAd-GFP;用Pac I酶切线性化pAd-GFP,线性化的腺病毒质粒经脂质体转染AD293细胞,进行重组腺病毒的包装和扩增。采用CsC1密度梯度离心进行病毒浓缩和纯化。获得的腺病毒感染人血管平滑肌细胞(human vascular smooth muscle cell,hVSMC),观察其感染效率和GFP表达水平。结果:通过Pac I酶切证实腺病毒载体构建成功,包装出携带GFP基因的腺病毒,滴度达到4.5×1012pfu/mL,获得的腺病毒对hVSMC的感染效率约为100%。结论:利用细菌内同源重组方法成功地构建了携带绿色荧光蛋白的重组腺病毒,并能够在hVSMC细胞中高效地表达,为利用GFP作为报告基因的研究奠定了实验基础。
- 张蕾王家宁郭凌郧孔霞杨建业唐俊明黄永章郑飞
- 关键词：报告基因绿色荧光蛋白人血管平滑肌细胞RNA干扰
- 黄芩苷对糖基化终末产物所致CRL1730细胞凋亡的影响被引量：2
- 2010年
- 目的:研究黄芩苷对糖基化终末产物(AGEs)所致的人脐静脉血管内皮细胞株(CRL1730)凋亡的影响。方法:CRL1730细胞常规培养传代,加入不同浓度糖基化终末产物(400mg/L)、黄芩苷(50mg/L、100mg/L、200mg/L)。流式细胞术测定内皮细胞的凋亡率MTT测增殖率,酶联免疫吸附法测sICAM-1、TNF-α。化学法检测NO,黄嘌呤氧化酶法测SOD。结果:黄芩苷能抑制AGEs导致的内皮细胞凋亡,促进增殖率,并同时降低sICAM-1、TNF-α,并升高NO、SOD。结论:黄芩苷对糖基化终末产物导致的CRL1730细胞凋亡的增加、增殖能力下降具有保护作用,其原因可能与其抑制炎症反应等因素有关。
- 曾敬王静张蕾张海燕唐俊明王家宁
- 关键词：黄芩苷糖基化终末产物凋亡
- 间充质干细胞条件培养液对人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和黏附的影响被引量：2
- 2012年
- 本研究探索间充质干细胞(MSC)条件培养液对人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和黏附能力的影响及其可能的机制。采用经典全骨髓贴壁法培养MSC,用流式细胞术鉴定MSC表面标志特征。收集MSC条件培养液(MSC-CM),过表达基质细胞细胞衍生因子1(SDF-1)的MSC条件培养液(Ad-SDF-1-MSC-CM),以2%FBS-DMEM、15%FBS-DMEM培养液为对照,将MSC-CM、Ad-SDF-1-MSC-CM等条件培养液加入人脐静脉内皮细胞株(CRL1730)作用24 h后,用MTT法检测CRL1730细胞的增殖情况,利用划痕法和黏附模型评价MSC-CM对CRL1730细胞迁移能力和黏附能力的影响。结果表明,与MSC-CM相比,Ad-SDF-1-MSC-CM处理的CRL1730细胞表现出更强的增殖能力,加入阻断剂AMD3100后,MSC-CM所介导的促增殖效应明显降低。MSC-CM、Ad-SDF-1-MSC-CM促进CRL1730细胞的迁移,AMD3100明显抑制其所介导的CRL1730细胞迁移。与MSC-CM相比,Ad-SDF-1-MSC-CM处理的CRL1730细胞黏附能力明显增强,AMD3100能显著降低其增强CRL1730黏附能力的作用。结论:MSC-CM对CRL1730细胞的促增殖、迁移和黏附能力与其分泌的细胞因子SDF-1密切相关。
- 郑飞李霞张蕾孔霞郭凌陨杨建业黄永章唐俊明王家宁
- 关键词：间充质干细胞条件培养液脐静脉内皮细胞细胞增殖细胞黏附细胞迁移
- 中胚层同源盒基因1在急性心肌梗死大鼠心脏微血管内皮的表达变化被引量：1
- 2017年
- 目的 研究中胚层同源盒基因1（Meox1）在急性心肌梗死大鼠心脏微血管内皮的表达情况.方法 成年雄性SD大鼠20只随机分成急性心肌梗死组和假手术组,各10只.采用结扎左冠状动脉前降支结扎法构建急性心肌梗死模型,假手术组仅在左冠状动脉前降支穿线不结扎.建模后将急性心肌梗死组作为实验组,假手术组作为对照组.建模后第7天处死两组大鼠,进行免疫组化染色,分析急性心肌梗死后心脏微血管上Meox1的表达情况.结果 通过免疫组化分析发现,在心肌梗死区及梗死边缘区微血管内皮可见棕黄色颗粒沉积,提示有Meox1表达;在假手术组及梗死远离区微血管内皮上未见Meox1的表达.结论 在急性心肌梗死大鼠心脏微血管内皮上Meox1表达增多,推测其可能参与心肌梗死后的血管重塑.
- 沈俊袁平唐俊明张蕾赵继先张焕鑫薛仕珍冯怡王家宁
- 关键词：心肌梗死
- 冠状动脉慢性完全闭塞病变治疗研究进展被引量：5
- 2016年
- 慢性完全闭塞（chronic total occlusion,CTO）冠状动脉病变是临床中较为常见的严重的冠状动脉病变,是冠状动脉粥样硬化性心脏病的终末期病变形式.一般认为,冠状动脉管腔完全闭塞且病史大于3个月称为CTO.大量研究表明,冠脉CTO开通可提高患者左心室射血分数（left ventricular ejection fraction,LVEF）,提高左心室收缩功能;并可明显改善患者的心绞痛发作、严重心血管事件的发生率及患者的死亡率.
- 杨波邓云超谭利国张蕾唐俊明王家宁
- 关键词：慢性完全闭塞经皮冠状动脉介入治疗干细胞治疗
- 泛素蛋白连接酶1在大鼠颈动脉球囊损伤后新生内膜中的表达及意义
- 2016年
- 目的 研究胞质泛素蛋白连接酶1（KPC1）在大鼠颈动脉球囊损伤后的蛋白表达情况,探讨其在新生内膜形成过程中的生物学功能.方法 将成年雄性SD大鼠（450 ～ 500 g）随机分为假手术组和颈动脉球囊损伤模型组,建模后以左侧损伤动脉为实验组,同时以假手术组的左侧正常颈动脉为对照组.实验组大鼠于损伤后1d、3d、7d、14d、28d分别处死并取材,采用Western blot检测KPC1蛋白、内膜增殖细胞核抗原（PCNA）表达情况,以qRT-PCR检测KPC1的mRNA表达,苏木精-伊红（HE）染色后比较内膜增生程度;采用体外培养血管平滑肌细胞（VSMC）建立增殖模型,运用Western blot及qRT-PCR检测其KPC1蛋白、KPC1 mRNA表达特征.结果 Western blot结果显示,颈动脉球囊损伤后实验组KPC1蛋白表达水平明显低于正常对照组（P＜0.05）,而PCNA蛋白表达量明显高于正常对照组（P＜0.05）;qRT-PCR检测结果显示,实验组KPC1的mRNA水平明显低于对照组（P＜0.05）;HE染色结果示颈动脉球囊损伤后1d、3d时光镜下血管内膜增生不明显;7d时光镜下可见新生内膜,增生的VSMC向内膜下迁移,管腔开始狭窄;14d时,可见明显新生内膜,VSMC排列紊乱,内弹力膜断裂,管腔明显狭窄,内膜厚度超过中膜;28d时,血管内膜继续不规则增生,血管腔狭窄程度继续加重,狭窄超过50％.体外培养并模拟VSMC增殖,提取细胞进行Western blot和qRT-PCR检测显示,KPC1蛋白、KPC1 mRNA表达在血小板源性生长因子-BB刺激增殖后开始逐渐减低.结论 抑制KPC1基因表达可促进损伤内膜增生,其作用机制可能与促进VSMC增殖有关.
- 杨波林新铎王星人唐俊明杨建业张蕾曹腾姜峰波王家宁
- 关键词：新生内膜增生
- 硫化氢对新生鼠坏死性小肠结肠炎的抗炎保护作用被引量：3
- 2016年
- 目的探讨腹腔注射硫化氢(H_2S)对新生SD大鼠坏死性小肠结肠炎(NEC)的作用及可能机制。方法出生12 h内的新生SD大鼠75只,随机分为5组,正常对照组不予以干预,4个NEC组(Na Cl对照组、小剂量H_2S组、中剂量H_2S组、大剂量H_2S组)通过人工喂养-缺氧-冷刺激-脂多糖(LPS)方法制备新生鼠NEC模型,并分别予以0.1 ml Na Cl、0.1 ml含2.5 mg/kg、5.0 mg/kg、10.0 mg/kg的硫氢化钠(Na HS)溶液腹腔注射,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组新生鼠小肠组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,比较各组新生鼠生存时间、非NEC相关性死亡率、病理评分,分析H_2S对新生鼠NEC的作用及可能机制。结果正常对照组、Na Cl对照组、小剂量H_2S组、中剂量H_2S组、大剂量H_2S组小肠组织TNF-α水平分别为(11.2±2.5)、(133.9±5.5)、(93.9±4.6)、(51.5±6.7)、(60.9±8.0)pg/ml,病理学评分分别为(0.0±0.2)、(2.9±1.1)、(1.9±1.0)、(1.1±0.9)、(1.1±1.1)分。小剂量H_2S组及中剂量H_2S组小肠组织TNF-α水平显著降低(P<0.05),小肠病理学损伤程度降低(P<0.05),中剂量H_2S组NEC新生鼠生存率提高(P<0.05);但大剂量H_2S组炎症反应及病理损伤程度未减轻,生存时间反而缩短(P<0.05)。结论 H_2S在一定剂量范围内可通过抑制炎症反应减轻NEC损伤,提高NEC新生鼠生存率。
- 张丙宏席世兵钟森王家宁唐俊明杨建业张蕾
- 关键词：硫化氢肿瘤坏死因子Α
- PEP-1-SOD1融合蛋白抑制血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠心脏成纤维细胞Ⅰ型胶原的合成被引量：3
- 2013年
- 目的研究穿透肽(PEP-1)介导的铜-锌超氧化物歧化酶1(SOD1)(PEP-1-SOD1)融合蛋白对血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)诱导的大鼠心脏成纤维细胞(CFbs)Ⅰ型胶原合成的影响,并探讨其机制。方法利用基因工程技术表达和纯化PEP-1-SOD1融合蛋白。提取原代大鼠CFbs并传代培养,采用2～5代细胞进行实验,实验分为对照组、ANGⅡ诱导组、SOD1预处理组和PEP-1-SOD1预处理组。SOD1预处理组和PEP-1-SOD1预处理组细胞分别以2μmol.L-1的SOD1和PEP-1-SOD1预处理2 h后,再给1μmol.L-1的ANGⅡ诱导24 h,用免疫荧光法检测细胞内超氧阴离子(O2-)水平,微量丙二醛(MDA)检测试剂盒检测各组细胞MDA含量。结果 Western blot和细胞免疫荧光结果显示PEP-1-SOD1成功穿透入CFbs;Western blot结果显示,与ANGⅡ诱导组比较,PEP-1-SOD1预处理组Ⅰ型胶原和α平滑肌肌动蛋白表达显著降低(P<0.01),细胞内O2-和MDA水平也显著降低(P<0.01)。结论 PEP-1-SOD1融合蛋白穿透入大鼠心脏CFbs内,通过降低细胞内O2-水平,抑制CFbs的激活,减少Ⅰ型胶原的合成。
- 杨波谭利国张蕾郑飞孔霞郭凌郧杨建业王家宁
- 关键词：心脏成纤维细胞
