张青婵
- 作品数：16 被引量：106H指数：5
- 供职机构：山东农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- ALV-J人工感染鸡病毒血症和抗体反应动态被引量：11
- 2009年
- 【目的】了解J亚群白血病病毒(ALV-J)感染鸡后抗体反应和带毒排毒的规律,以便为制定鸡群中ALV-J感染的预防控制和净化措施提供可靠的流行病学依据。【方法】1日龄和49日龄SPF鸡分别通过注射、口服和接触感染ALV-J,对各感染组的病毒血症、泄殖腔排毒及抗体反应进行动态检测。【结果】不同日龄感染ALV-J后的病毒血症和抗体的动态有很大差异。1日龄SPF鸡注射感染ALV-J后,自2周起开始可检出泄殖腔p27抗原和病毒血症。注射感染组有71%(5/7)鸡在26周内持续带毒排毒,其中有3只鸡在感染后45周仍带毒排毒。其中一只鸡在16周时产生一过性抗体,另两只鸡完全没有抗体。口服感染组仅11%(1/9)鸡呈持续带毒排毒,44%(4/9)鸡仅呈短暂性带毒排毒,且自第8周起即可检测到较高的抗体水平。同笼接触组既不带毒排毒,也无抗体水平,表明未发生传染。49日龄SPF鸡即使注射攻毒后,在19周内的5次检测中,p27抗原和病毒血症均为阴性。攻毒后1周开始出现抗体反应并维持一段时间。49日龄SPF鸡经口服和接触感染,病毒血症和泄殖腔p27均为阴性,也无抗体反应。【结论】1日龄SPF鸡感染ALV-J很容易发生免疫耐受,感染鸡持续带毒排毒而不产生抗体;49日龄SPF鸡感染后,1周可产生高水平的抗体,但不带毒排毒。不同接种方式对ALV-J感染的动态有很大影响,注射感染诱发的病毒血症和耐受性病毒血症显著高于口服感染。
- 孙贝贝崔治中张青婵娄本红
- 关键词：P27抗原病毒血症抗体
- 系统发生分析发现牛病毒性腹泻病病毒新基因亚型被引量：12
- 2005年
- 本研究对我国首次分离获得的牛源牛病毒性腹泻病毒(BVDV)毒株Changchun 184(CC-184)和猪源牛病毒 性腹泻病毒ZM-95进行了遗传衍化关系研究。选择主要抗原E2基因为研究对象,首先应用RT-PCR及套式PCR 克隆得到CC-184和ZM-95的E2片段,通过序列测定发现CC-184和ZM-95 E2基因长度分别为1,122bp和1, 125bp,各自编码374和375个氨基酸残基。核酸序列同源性比较和系统发生分析表明2株病毒均属于BVDV-1, CC-184与Osloss亲缘关系最近,都属于已有的b基因亚型,其E2基因同源性达91．8％。而ZM-95的E2基因有 一个特征性的变异区,包含一个密码子序列插入,这一变异区编码了一段有别于其他瘟病毒的五肽氨基酸序列 HYKKK。结果还表明ZM-95与BVDV-1现有的5个基因亚型的亲缘关系均较远,E2基因同源性最高(与Oregon c24v)只有72．4％。而BVDV-1亚型内毒株间的同源性大于85％,亚型间的同源性在69％～75％之间,充分说明 ZM-95是BVDV-1中一个新发现的基因亚型。通常认为猪源BVDV来源于牛,应该与牛源BVDV有十分近的遗 传关系,但是本研究发现ZM-95与其他已知牛源BVDV较低的基因同源性说明猪源BVDV还具有独立的遗传衍 化与传播来源的可能性。
- 徐兴然肖昌梁龙余兴龙张青婵涂长春
- 关键词：猪源BVDVE2基因
- A亚群禽白血病病毒不同分离株的基因组和生物学特性比较
- 过去十几年,ALV-J亚群病毒对肉用型鸡、蛋用型鸡和我国地方品系鸡的感染已经给养殖业造成了巨大经济损失。近两年,鸡白血病//血管瘤病例的显著上升使该病成为危害我国蛋鸡业的主要疫病之一。病毒分离鉴定表明,血管瘤的发生不仅由...
- 张青婵
- 关键词：不同品种鸡基因组生物学特性
- 文献传递
- 猪瘟病毒E2蛋白4重复抗原表位的构建及抗原活性研究
- 本研究在对4重复抗原表位基因克隆、表达的基础上运用其表达产物作为抗原,通过间接ELISA方法鉴定了重复抗原表位的反应特性,探索了CSFV特异表位抗原用于临床上猪瘟和猪的BVDV感染鉴别诊断的可能性.
- 张青婵刘思国徐兴然余兴龙涂长春
- 关键词：猪瘟病毒E2蛋白抗原表位抗原活性基因克隆
- 文献传递
- T7 RNA多聚酶基因的克隆、序列测定及其在E.coli中的表达被引量：1
- 2003年
- 从 BL 2 1(DE3) E.coli菌株中以 PCR的方法扩增得到了与 T7RNA多聚酶 (T7RNA polymerase,T7pol)基因大小一致的 DNA片断。将 PCR产物纯化后直接克隆到 p GEM- T载体中 ,经酶切鉴定和 DNA序列分析表明克隆得到了正确的 T7pol基因。将 T7pol基因亚克隆入 p ET- 2 8b(+)中 ,构建得到原核表达质粒 p ET2 8T7。该质粒的 BL 2 1(DE3) p L ys S转化菌在 IPTG的诱导下可表达约 9880 0的蛋白 ,这与 T7pol的相对分子质量一致。将该质粒转化DH5 α、JM10 9、HB10 1、BL2 1(DE3)和 BL2 1(DE3) p L ys S等 5种不同的宿主菌 ,仅有转化 T7pol酶活性受到抑制的宿主菌 BL2 1(DE3) p L ys S才能得到转化子 ,而其余 4种 T7T7pol酶活性不受抑制的 E.coli宿主菌不能得到转化子。p ET2 8T7原核表达质粒这种仅能在 T7pol酶活性受到抑制的宿主菌中才能存活的现象说明本试验所克隆的 T7pol基因能正确表达出具有
- 余兴龙涂长春徐兴然张茂林张青婵李作生
- 关键词：基因克隆E.COLIPCRRNA病毒
- A和B亚群禽白血病病毒gp85基因的表达及其抗血清的亚群特异性比较被引量：2
- 2011年
- 为制备快速鉴定禽白血病病毒A和B亚群(Avian leukosis virus subgroup A/B,ALV-A/B)的特异性诊断试剂,并鉴定分析ALV-A SDAU09C1株和ALV-B SDAU09C2株抗血清的亚群特异性,将两株病毒的gp85基因进行克隆、原核表达后,免疫家兔分别制备抗ALV-A和ALV-B的血清。血清交叉中和反应显示,SDAU09C1株和SDAU09C2株间的抗原同源性相关系数r=0.366,属于不同亚群;间接免疫荧光表明,两种抗血清均与ALV-A和ALV-B反应,但与ALV-J无反应。结果表明本试验制备的重组蛋白具有较好的反应原性,制备的二种兔抗血清可快速识别ALV-A/B与ALV-J。
- 王丽张青婵赵鹏武专昌崔治中
- 关键词：禽白血病病毒
- 猪瘟病毒E2蛋白4重复抗原表位的构建及抗原活性研究被引量：2
- 2003年
- 利用PCR方法获得 4次重复的猪瘟病毒E2蛋白中和性抗原表位基因 ,将其克隆到 pGEM 5ZF(+)载体 ,测序正确后亚克隆到pGEX 3X载体构建得到重组质粒pGEX 3X 4P。重组质粒在大肠杆菌中诱导表达了含 4重复抗原表位的融合蛋白。该蛋白经纯化后 ,利用间接ELISA检测其与血清的反应性 ,结果表明 ,纯化的融合蛋白与兔抗CSFVE2血清有很强的反应性 ,与兔抗BVDVE2血清不反应 。
- 张青婵刘思国徐兴然余兴龙涂长春
- 关键词：猪瘟病毒CSFV基因克隆技术疾病防治
- 猪源牛病毒性腹泻病毒ZM-95株全基因组序列分析
- 本实验首次完成了猪源BVDV ZM-95株全基因组的测序工作,并进行了全序列遗传进化分析及部分特殊结构的序列分析,其结果不仅有助于阐明ZM-95株基因组结构和功能的关系,而且将为瘟病毒生物学特性等方面的研究提供一个分子遗...
- 张青婵徐兴然余兴龙张茂林涂长春
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒全基因组测序瘟病毒遗传进化分析
- 文献传递
- 猪瘟病毒E2蛋白4重复抗原表位的构建及抗原活性研究
- 猪瘟病毒(Classical Swine Fever Virus CSFV)和牛病毒性腹泻病毒(Bovine Viral DiarrheaVirus BVDV)同属于黄病毒科、瘟病毒属,是瘟病毒属的主要成员。CSFV主要...
- 张青婵刘思国徐兴然余兴龙涂长春
- 文献传递
- 牛病毒性腹泻病病毒Changchun184株E2基因的克隆及在大肠杆中的高效表达被引量：10
- 2005年
- 根据GenBank已发表的多个BVDV_1序列的比较分析结果设计引物 ,应用RT_PCR及套式PCR克隆得到包含Changchun184 (CC_184 )株E2基因的片段F2 /R2 ,克隆、测序分析结果表明该片段大小为 1391bp ,软件分析结果表明CC_184株E2基因长度为 112 2bp(GenBankaccessionnumber:AF5 2 6 380 )。通过基因操作构建得到表达完整E2蛋白和去除E2蛋白C_端疏水区的重组质粒 pET2 8a_BE2和 pET2 8a_BE2m ,转化大肠杆菌并诱导目的蛋白表达 ,SDS_PAGE检测结果表明重组菌能表达目的蛋白 ,其表达量分别占菌体总蛋白的 6 2 5 %和 35 7%。
- 徐兴然涂长春余兴龙肖昌张青婵张丽颖查云峰史子学
- 关键词：E2基因克隆
