戴华
- 作品数:19 被引量:76H指数:5
- 供职机构:扬州大学医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项高等学校科技创新工程重大项目更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生农业科学文化科学更多>>
- 小鼠骨髓源性树突状细胞的体外诱导被引量:1
- 2007年
- 分离树突状细胞(DC)的原理是依据DC的低密度和半黏附特性,DC缺乏Fc受体,可对获得的DC进一步纯化。这种方法获取的DC数量有限。细胞因子诱生法是目前体外扩增DC常用的方法。其中,扩增效果最好的细胞因子是粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF)和白细胞介素4(IL-4)。
- 胡茂志戴华焦新安张辉潘志明高明燕程宁宁刘秀梵
- 关键词:树突状细胞粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子体外诱导髓源性鼠骨白细胞介素
- 抗鸡γ-干扰素单克隆抗体的研制及鉴定被引量:3
- 2007年
- 应用淋巴细胞杂交瘤技术,以纯化的原核表达产物His-ChIFN-γ作为免疫原,以纯化的GST-ChIFN-γ作为检测原,制备抗鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)mAb;采用ELISA、Dot-ELISA和ECL法鉴定单克隆抗体(mAb)的生物学特性。获得4株可稳定分泌抗ChIFN-γmAb的杂交瘤细胞株1G10、2C3、3E5、3E3,其腹水ELISA效价为2×104~8.2×105;Ig亚类分别为IgG1、IgG1、IgG1和IgG2a。Dot-ELISA和ECL试验结果均表明:4株mAb只与表达ChIFN-γ的重组大肠杆菌反应,而与未表达ChIFN-γ的菌株不反应,表明4株mAb均特异性针对ChIFN-γ。鸡脾脏淋巴细胞经PMA刺激后,经固定、破膜,用mAb 2C3标记,利用流式细胞术可成功地检测到表达ChIFN-γ的T淋巴细胞。mAb为家禽的免疫检测、免疫细胞功能分析和免疫调节等研究提供依据。
- 戴华郑佳玉胡茂志陈俊华潘志明焦新安
- 关键词:Γ-干扰素单克隆抗体流式细胞术
- DNA免疫法制备抗鸡IL-4单克隆抗体
- 2017年
- 为建立有效检测鸡IL-4(ChIL-4)的生物学方法,将重组真核表达质粒pVAX1-ChIL-4作为免疫抗原,肌肉注射法免疫6周龄BALB/c小鼠,免疫的间隔时间为4周,共免疫5次;于加强免疫3次后,取免疫鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0融合。以His-ChIL-4为检测抗原,建立间接ELISA筛选杂交瘤细胞株;采用有限稀释法对阳性杂交瘤细胞株进行亚克隆,体内诱生腹水法大量制备腹水单抗;采用ELISA、Western blot法分析mAbs的特异性。结果本研究共获得3株抗ChIL-4mAbs:1C11、5C1和3E10,其亚类分别为IgM、IgM和IgG2a,腹水效价为(1.6~6.4)×104。间接ELISA及Western blot结果显示,所获得的mAbs均只识别重组ChIL-4,而不能识别其他无关抗原,表明所获得的3株mAbs均特异性针对ChIL-4。该mAbs的获得为建立检测ChIL-4的生物学方法及进一步研究ChIL-4的生物学功能提供了有效的生物材料。
- 戴华闫加庆张海霞徐正中陈祥焦新安
- 关键词:ELISA单克隆抗体
- 人神经菌毛素1 b结构域单克隆抗体的制备及其抑制血管生成作用被引量:1
- 2018年
- 目的:制备抗人神经菌毛素1(human neuropilin 1,Hu NRP1)b结构域单克隆抗体(monoclonal antibodies,m Ab),为靶向抑制肿瘤血管生成提供生物材料。方法:运用杂交瘤技术,将Hu NRP 1 b结构域重组蛋白(TF-Hu NRP1b)免疫BALB/c鼠,共免疫3次,取免疫鼠的脾脏细胞与sp2/0细胞进行融合,采用间接免疫荧光法(immunofluorescent assay,IFA)筛选稳定分泌抗Hu NRP1bm A,以Western blot、IFA、流式细胞术分析m Ab的特异性。以MTT法及小室迁移实验分析m Ab抑制血管生成的能力。结果:获得1株稳定分泌抗Hu NRP1bm Ab的细胞株4F11。Western blot结果表明,本研究所获得的m Ab 4F11只与重组Hu NRP1b发生反应,与对照蛋白不发生反应;IFA及流式细胞分析结果表明,所获得的m Ab能够识别肿瘤细胞MDA-MB-231、Hep G2以及人脐静脉内皮细胞表达的天然Hu NRP1蛋白;MTT法及小室迁移实验表明,所获得的m Ab 4F11具有抑制人脐静脉内皮细胞增殖、迁移的能力。结论:成功制备出抗Hu NRP1b的m Ab,该m Ab的获得将为进一步研究Hu NRP1的功能及靶向抑制肿瘤血管生成提供生物材料。
- 戴华戴长松戴长松沈颖
- 关键词:单克隆抗体血管生成
- 布拉酵母防治病原微生物感染的机制及效果被引量:6
- 2013年
- 肠杆菌科细菌、霍乱弧菌、难辨梭菌、幽门螺杆菌和原虫等病原体感染是引起腹泻的主要原因。布拉酵母作为一种益生菌,通过抗微生物、免疫调节、肠道屏障、增加肠道营养等方面维持肠道微生态平衡。该酵母用于治疗肠杆菌科细菌、霍乱弧菌等病原菌感染引起的急性腹泻,能显著降低腹泻频率,缩短腹泻时间;而作为辅助药物联合抗生素治疗难辨梭菌、幽门螺杆菌和原虫等顽固性病原微生物感染,具有提高根除率、减少副作用、降低复发率的作用。本研究综述了布拉酵母对若干腹泻病原体的防治机制和临床应用研究进展。
- 伍代朝滕达胡小媛戴华王建华
- 关键词:难辨梭菌幽门螺杆菌腹泻
- 抗鸡γ-干扰素单克隆抗体的研制及初步鉴定被引量:10
- 2006年
- 目的:制备抗鸡γ-干扰素单克隆抗体(mAb)。方法:应用淋巴细胞杂交瘤技术,以重组菌BL21(DE3)(pET-ChIFN-γ)表达产物的包涵体作为抗原免疫BALB/c鼠,以纯化的GST-ChIFN-γ作为检测抗原,制备抗鸡γ-干扰素mAb;采用ELISA、Dot-ELISA和Westernblot鉴定mAb的特异性。结果:获得2株可稳定分泌抗鸡γ-干扰素mAb的杂交瘤细胞株1G5、5E3,其Ig亚类均为IgG2a,腹水mAb1G5、5E3的ELISA效价分别为1∶1600000,1∶120000。在Dot-ELISA试验中,这2株mAb均只与表达His-ChIFN-γ及GST-ChIFN-γ的重组大肠杆菌反应,与未表达这2种IFN-γ的其他8种菌株均不发生反应。在蛋白质印迹试验中,2株mAb均能与融合蛋白GST-ChIFN-γ、His-ChIFN-γ发生反应,出现特异性条带。结果表明,mAb1G5、5E3是针对鸡γ-干扰素的特异性mAb。结论:成功地制备抗鸡γ-干扰素的mAb,它们在免疫检测、免疫细胞功能分析和免疫调节研究等方面有应用价值。
- 戴华焦新安潘志明黄金林胡茂志唐伟刘秀梵
- 关键词:单克隆抗体
- 浅析VR技术和MOOC资源在医学专业国际化人才培养中的应用被引量:3
- 2020年
- 为了适应国际化需求,虚拟现实技术和慕课在医学专业人才培养中的应用越来越多。分析两种新兴技术在医学教育教学模式中的应用及优缺点,为全国高等教育医学专业人才的培养提供借鉴。
- 赵雅戴华钱亚云
- 关键词:虚拟现实技术高等教育
- Neuropilin-1在肿瘤发生发展中的作用被引量:4
- 2015年
- 神经菌毛素(neuropilin-1,Nrp-1)是一种多功能的非酪氨酸激酶受体,在内皮细胞及多种肿瘤细胞表面高表达。Nrp-1主要作为血管内皮细胞生长因子165(vascular endothelial growth factor 165,VEGF165)的共受体,可显著提高VEGF165受体(vascular endothelial growth factor receptor 2,KDR)与VEGF165结合,促进肿瘤血管新生及肿瘤迁移。近期的研究表明,Nrp-1还能通过与脑信号蛋白Ⅲ(semaphorin Ⅲ,SEMA3)相互作用、与转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)相互作用从而促进纤连蛋白聚集,改善肿瘤微环境,并介导调节性T细胞到肿瘤组织等多种途径,促进肿瘤的发生发展。由于Nrp-1在于肿瘤发生发展中所起到的病理性促进作用,Nrp-1逐渐成为肿瘤治疗的一个新靶标,本文主要介绍Nrp-1的生物学特征以及其对于肿瘤发生发展中的信号转导作用。
- 戴长松王美玲戴华
- 关键词:NEUROPILIN-1血管生成免疫调节肿瘤生成
- 鸡α干扰素基因的原核表达及其活性测定被引量:5
- 2009年
- 应用RT-PCR技术,从被刺激诱导的鸡脾脏淋巴细胞中扩增鸡α-干扰素(ChIFN-α)基因cDNA,经克隆和测序后,构建原核表达重组质粒pGEX-proChIFN-α(全长序列)和pET-ChIFN-α(不含信号肽序列),并分别转化相应的表达菌。重组菌经IPTG诱导,SDS-PAGE结果表明,ChIFN-α基因均获得表达,重组蛋白大小分别为45ku、26ku左右,表达的蛋白以包涵体形式存在。表达产物经变性、提纯、复性,重组蛋白的含量约为1mg/mL。复性后的ChIFN-α能够在鸡胚成纤维细胞上抑制H5N1禽流感病毒的复制;用水泡性口炎病毒检测结果表明,重组ChIFN-α具有较高的抗病毒作用,其生物学活性达到2×106u/mg。
- 戴华郑佳玉陈俊华潘志明焦新安
- 关键词:原核表达抗病毒活性
- 留学生医学生物化学课程建设的实践被引量:2
- 2020年
- 扬州大学医学院已进行多年的留学生医学生物化学的课程建设,在教学过程中逐步摸索出一整套新的教学模式和教学体系,激发留学生的学习兴趣和主动性,提高理解和分析问题的能力。文章从课程体系、教学方式和考核细则等几方面进行探讨和总结,以期进一步提高教学质量及对教学改革起到积极的促进作用。
- 李华玲陈文飞陈菊萍戴华
- 关键词:医学生物化学教学改革教学体系