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基因枪法转化小麦及转基因植株的获得被引量：33: 2000年; 应用基因枪法转化了小麦幼胚、成熟胚及胚性愈伤组织,成功地将携带有豇豆胰蛋白酶抑制剂(CpTI)基因以及选择标记潮霉素磷酸转移酶(Hpt)基因的质粒pBCAHpt导入小麦胚性愈伤组织。通过在选择培养基上严格筛选后获得潮霉素抗性(hygr)愈伤组织,并进一步分化培养获得完整的小麦再生植株。PCR检测结果显示抗性愈伤组织和再生植株细胞内存在有目的基因序列。; 于晓红朱祯徐鸿林朱玉吴茜高越峰付志明肖桂芳安利佳李向辉; 关键词：基因枪法转基因植株

大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂基因的克隆及其转基因烟草抗虫性初探被引量：35: 1997年; 从未成熟的大豆子叶中提取总RNA，利用RT－PCR方法扩增出大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂基因单一目的片段，克隆到pBluescriptKS（＋）SmaI位点上。序列分析表明，该基因与报导的序列高度同源：其核苷酸序列及推论的编码氨基酸序列的同源率分别为99．5％和98．2％。由此，构建了大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂基因的植物高效表达载体pBinSKTI。并采用农杆菌介导的叶盘法转化了烟草，获得的转基因烟草再生植株经抗虫测试表明：与对照烟草相比，具有明显的抗棉铃虫能力。; 高越峰朱祯朱玉肖桂芳李向辉; 关键词：抑制剂抗虫基因转基因烟草

雪花莲外源凝集素基因的克隆及其多态性分析被引量：13: 1999年; 从雪花莲（Ｇａｌａｎｔｈｕｓｎｉｖａｉｌｓ）叶片中分离出了长度为４８４ｂｐ的雪花莲外源凝集素ｃＤＮＡ，包含了完整的雪花莲外源凝集素编码序列。通过限制性酶切图谱及ＤＮＡ序列分析，从中筛选出５种核苷酸且氨基酸序列均有差别的外源凝集素基因ＧＮＡ１１、ＧＮＡ１２、ＧＮＡ１３、ＧＮＡ１４和ＧＮＡ１５。将这５个克隆与６个已报道的序列进行比较，发现其中ＧＮＡ１４与ＧＮＡ１５同源性最高，它们之间核苷酸序列及推导出的氨基酸序列的同源性分别为９８０％和９６２％，ＬＥＣＧＮＡ１与ＧＮＡ１１同源性最低，它们之间核苷酸序列及推导出的氨基酸序列的同源性分别为７７３％和６５０％。; 朱玉朱祯徐鸿林; 关键词：多基因家族 RT-PCR DNA序列

豇豆胰蛋白酶抑制剂转基因棉花的获得被引量：58: 1998年; 利用根癌农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）介导法将豇豆胰蛋白酶抑制剂（Ｃｏｗ－ｐｅａＴｒｙｐｓｉｎＩｎｈｉｂｉｔｏｒ，ＣｐＴＩ）基因转移进入棉花（ＧｏｓｙｐｉｕｍｈｉｒｓｕｔｕｍＬ．）。棉花幼苗的下胚轴与携带有ＣｐＴＩ基因和Ｎｐｔ－Ⅱ基因的根癌农杆菌共培养，在选择培养基上诱导出了卡那霉素抗性（Ｋｍｒ）愈伤组织。选择Ｎｐｔ－Ⅱ阳性的胚性愈伤组织在胚状体诱导培养基上进行胚状体诱导，继而在分化培养基上进行植株分化，最终获得了再生棉花植株。经Ｎｐｔ－Ⅱ分析、ＰＣＲ及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ检测证明，外源ＣｐＴＩ基因和标记基因（Ｎｐｔ－Ⅱ基因）存在于转化棉株及其后代中。抗棉铃虫（Ｈｅｌｉｏｔｈｉｓａｒｍｉｇｅｒａ）生物活性检测表明转基因植株后代具有明显的抗棉铃虫能力。; 李燕娥朱祯陈志贤吴霞王伟王伟朱玉焦改丽朱玉徐鸿林范小平孟晋红徐鸿林李向辉; 关键词：根癌农杆菌抗虫基因豇豆 CPTI

转基因棉花高效定植方法的研究被引量：29: 1999年; 通过根癌土壤杆菌介导法将外源抗虫基因导入4个陆地棉(GossypiumhirsutumL.)栽培品种。对转基因再生植株的移栽和嫁接研究发现,不同的定植方法对成活率和植株生长状态有显著的影响。直接移栽法、蛭石炼苗法和水培法的定植成活率均较低,缓苗时间也相对较长。而嫁接能够极大地提高再生植株的定植成活率并有效地缩短了缓苗时间,从而克服了棉花再生植株不易定植成活的困难,为基因工程乃至其他生物技术能够顺利地应用于棉花遗传改良奠定了基础。; 王伟陈宛新朱祯徐鸿林高越峰吴茜朱玉郭仲琛李向辉; 关键词：陆地棉移栽嫁接转基因

大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂基因的分离及其在抗虫植物基因工程中的应用被引量：74: 1998年; 大豆Ｋｕｎｉｔｚ型胰蛋白酶抑制剂属于丝氨酸蛋白酶抑制剂，具有抗虫特性。从未成熟的大豆（ＧｌｙｃｉｎｅｍａｘＬ．）子叶中提取总ＲＮＡ，然后反转录成单链ｃＤＮＡ，以此为模板，用ＰＣＲ方法扩增出大豆Ｋｕｎｉｔｚ型胰蛋白酶抑制剂基因，并克隆到ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＫＳ（＋）的ＳｍａⅠ位点上。序列分析表明：克隆片段大小为６６３ｂｐ，包含了基因完整的编码序列。编码多肽由２１７个氨基酸组成，其中包括Ｎ端２５个氨基酸组成的信号肽序列，１８１个氨基酸组成的成熟蛋白序列和Ｃ端１１个氨基酸组成的液泡定位信号序列。构建了此基因的一系列植物表达载体，用于烟草（ＮｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍＬ．）、水稻（ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ．）、棉花（ＧｏｓｙｐｉｕｍｈｉｒｓｕｔｕｍＬ．）等作物的转化。利用棉铃虫（ＨｅｌｉｏｔｈｉｓａｒｍｉｇｅｒａＨｕｂｎｅｒ）对经ＰＣＲＳｏｕｔｈｅｒｎ杂交验证获得的转基因烟草进行了抗虫测试，结果表明，转基因烟草和对照烟草相比，具有明显的抗虫能力。; 高越峰朱祯肖桂芳朱玉吴茜李向辉; 关键词：大豆胰蛋白酶抑制剂抗虫转基因烟草基因工程

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朱玉

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