- 乙醇脱氢酶基因和乙醛脱氢酶基因的克隆及表达被引量：1
- 2013年
- 利用表达载体pYES2表达乙醇脱氢酶2(Alcohol dehydrogenase 2,ADH2)和乙醛脱氢酶6(Acetaldehyde dehydrogenase 6,ALDH6),从而实现将乙醇直接转化为乙酸。以啤酒酵母总DNA为模板,通过PCR获得adh2基因和aldh6基因。分别构建表达载体pYES2-adh2、pYES2-aldh6和pYES2-aldh6-adh2,并电击导入宿主菌INVScl中。PCR测序结果上传GenBank获得登录号为JX901290、JX901291,与已公布序列相似性分别为96%和99%。重组菌扩大培养后移入到诱导培养基中,进行诱导表达。在含2%半乳糖诱导培养基诱导下4 h酶活达到最高,ADH酶活为0.49U/mg,是原始菌株的2.7倍,ALDH酶活为0.11 U/mg,为原始菌株的2倍。
- 汤斌杨亚平张莹莹
- 关键词：乙醇脱氢酶乙醛脱氢酶克隆
- 匍枝根霉TP-02内切葡聚糖酶基因eg2的克隆表达及功能分析被引量：8
- 2013年
- 从匍枝根霉TP-02的cDNA文库中克隆得到内切葡聚糖酶基因eg2,在大肠杆菌BL21中成功表达,通过对其结构功能进行初步分析,并对EGⅡ的纤维素结合模块CBM1及催化结构域GH45区进行突变研究。结构分析表明:N39S可影响CBM1亲水平面的形成,V136D及E260D对GH45活性中心的改变较大。突变株的发酵特性显示,N39S可缩短达到峰值的时间,V136D及E260D可显著提高酶活。其中,突变株EGⅡ-F在发酵21 h后,酶活达到最高为1.321 IU/mL,比突变前提高了82.7%。
- 汤斌张莹莹杨亚平
- 关键词：匍枝根霉内切葡聚糖酶突变功能分析
- 乙醇脱氢酶基因和乙醛脱氢酶基因的克隆及表达
- 乙醇脱氢酶(ADH)和乙醛脱氢酶(ALDH)是以烟酰胺腺嘌呤二核苷酸为辅酶,分别催化醇和醛反应的酶类。在工业生产和医学应用上具有可观的研究价值。近年来由于有机相催化和膜反应器的研究发展对ADH应用起到的推动作用,以及乙醛...
- 杨亚平
- 关键词：乙醇脱氢酶乙醛脱氢酶克隆巴氏醋杆菌
- 文献传递
