杨志伟
- 作品数：31 被引量：137H指数：7
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学经济管理更多>>
- 早期炎性介质释放可能启动盐酸吸入性肺炎的病理过程被引量：3
- 2016年
- 探索酸性物质吸入性肺损伤的机制。120只C57BL/6J小鼠随机分为稀盐酸(HCl)吸入组和生理盐水(NS)吸入组。实验小鼠经导管滴注0.1mol/L HCl/NS(1μl/g体重)至左肺,吸入后30min、2h、6h和24h分别检测小鼠的呼吸功能(Penh)(除外30min、肺湿干重比值(W/D)、支气管肺泡灌洗液(BALF)的白细胞计数和蛋白浓度,观察肺组织病理学改变;免疫组化研究小鼠左肺炎性细胞浸润变化;免疫印迹检测小鼠左肺肺组织炎性因子水平。12hHCl组的呼吸功能(Pehn)严重受损(P<0.01vs NS组),肺W/D明显高于其它时间组(P<0.05)和对照组(P<0.01vs NS组);BALF蛋白含量和白细胞总数在6hHCl组达到峰值(P<0.05vs其它时间组,P<0.01vs NS组);炎性因子IL-1β、TNF-α、NF-κB和IL-6在左肺组织中表达随HCl刺激时间逐渐升高,12h后表达量降低,24h时继续下降;HCl刺激30min即出现嗜中性粒细胞肺组织浸润,而巨噬细胞和T淋巴细胞出现相对较晚。研究通过吸入稀盐酸模拟吸入性肺炎小鼠模型,发现吸入性肺炎早期即有大量炎性因子,随后出现白细胞升高而巨噬细胞增多出现较晚;大量炎性因子均参与了整个疾病发生发展过程。另外,实验经气管单侧滴注法获得单侧吸入性肺炎的模型,更符合临床吸入性肺炎的特点,为临床深入研究吸入性肺炎制作了很好的动物模型。
- 刘泽玉姜宝珍杨志伟刘星张志红
- 关键词：盐酸
- 饮食诱导代谢综合征小鼠模型的建立被引量：6
- 2009年
- 目的建立以高脂纯化饲料诱导的、遗传背景和环境因素共同起作用的C57BL/6J小鼠代谢综合征(MS)模型,为研究营养因素与代谢综合征的关系提供周期较短、稳定性好、可重复性、与人类发病可比性高的动物模型。方法雄性3周龄C57BL/6J小鼠30只适应性喂养10d后随机分为2组,其中一组(10只)给予普通生长饲料(对照组),另一组(20只)给予高脂纯化饲料(模型组)。喂养期间对空腹血糖(FBG)、体重进行连续监测,同时监测体重指数(BMI)、血清胰岛素(FINS)、血清甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C),实验期10周。实验结束时取内脏脂肪和肝脏称重,取肝胰做病理分析。结果分组喂养1周时,模型组小鼠体重出现显著性升高(P<0.001),并表现为中心型肥胖。4周时FBG显著性升高(P<0.05),5周时FINS开始升高但无显著性差异。8周时血清TC、HDL-C显著性升高(P<0.001),10周时TG、TC、HDL-C、LDL-C均升高(P<0.01)。HE染色显示肝脏中度脂肪变,胰岛细胞无明显改变。结论单纯施以高脂饲料10周即可建立MS小鼠模型。并且该模型造模方法简单易行、周期较短、稳定性好、可重复性高,与人类MS自然发病过程类似,是MS较理想的动物模型。
- 胡健萍闫熙杨志伟史良李万波
- 关键词：代谢综合征高脂饮食肥胖症
- P-选择素糖蛋白配体在盐酸诱导小鼠急性肺损伤中的作用机制研究被引量：3
- 2017年
- 目的利用盐酸诱导小鼠急性肺损伤模型,研究P-选择素糖蛋白配体(PSGL-1)在其中的作用及可能机制。方法野生型小鼠(WT)和PSGL-1敲除小鼠(PSGL-1-/-)随机分为生理盐水组和盐酸组,经导管左肺滴注生理盐水或0.1 mol/L盐酸(1μl/g体重),2 h后测定小鼠肺功能指标增强呼气间歇(Penh)、PaO_2和PaCO_2、肺湿干重比值(W/D)以及支气管肺泡灌洗液(BALF)总蛋白浓度和白细胞计数。镜下观察靶肺组织炎症细胞浸润情况,并检测肺组织炎症因子IL-6和IL-1β及核因子-κB(NF-κB)p65、IκBa和p-IκBa蛋白表达水平。结果盐酸刺激后,PSGL-1敲除小鼠Penh(4.77±1.22 vs.5.80±0.84)和PaCO_2[(63.7±3.9)mm Hg vs.(74.4±7.4)mm Hg]较WT组显著降低(P<0.05),而PaO_2较WT组显著增高[(81.0±7.1)mm Hg vs.(62.0±8.9)mm Hg,P<0.05],肺W/D(4.86±0.15 vs.5.22±0.20)和BALF蛋白浓度[(3.71±0.64)μg/μl vs.(4.74±0.98)μg/μl]及白细胞总数[(13.00±2.18)×10~7/L vs.(49.42±3.35)×10~7/L]较WT小鼠明显降低(P<0.05)。肺组织炎症因子IL-6、IL-1β及p65和p-IκBa表达水平显著低于WT组,而IκBa表达水平明显高于WT组(P<0.05)。与PSGL-1敲除小鼠比较,盐酸诱导的WT小鼠肺组织出现了更为明显的中性粒细胞和巨噬细胞浸润。生理盐水诱导的对照组小鼠各项检测指标未出现显著差异,但均明显低于其相应盐酸组(IκBa除外,P<0.05)。结论 PSGL-1可能通过激活NF-κB信号通路促进肺组织白细胞的浸润及炎症反应,在急性肺损伤疾病的发生发展中发挥重要的作用。
- 刘泽玉姜宝珍杨志伟刘星张志红
- 关键词：急性肺损伤核因子-ΚB
- GLP大小鼠生长繁殖饲料
- 本发明涉及一种符合GLP规范的大小鼠生长繁殖饲料的配制，具体根据动物营养学原理和消化生理特点，针对有可能混入饲料的毒素、农药、重金属等污染物质进行有效筛查，通过优选饲料原料，合理配比，有效控制饲料中一般无机物及重金属、有...
- 史良苏卫杨志伟秦川
- 文献传递
- 高血压实验动物模型被引量：12
- 2008年
- 建立适当的动物模型是开展疾病的发病机制、治疗和预防等研究的重要工具。高血压是遗传因素和环境因素相互作用而形成的多因素疾病，根据模型制作方法的不同，高血压实验动物模型主要包括3类：自发性高血压、诱发性高血压和基因工程高血压动物模型。本文对近年来国内外高血压动物模型的制作及其应用进行总结，为高血压疾病的发病机制和防治研究提供参考。
- 张艳荣张连峰杨志伟
- 关键词：自发性高血压实验动物模型多因素疾病发病机制相互作用环境因素
- 饮食诱导代谢综合征小鼠模型的建立
- 背景代谢综合征（Ms）是指一组与腹部肥胖、血脂异常、感染、胰岛素抵抗、糖尿病相关的代谢症候群。MS的出现是遗传多基因和环境因素相互作用的结果。其中,坐式生活方式和高脂/高糖饮食摄入是最主要的环境因素。目前MS动物模型主要...
- 胡健萍闫熙杨志伟李万波
- 关键词：代谢综合征动物模型饮食诱导
- 文献传递
- B亚型SHIV_(SF162p3)中国恒河猴小剂量多次阴道黏膜感染被引量：3
- 2011年
- 目的模拟HIV性传播感染特点进行中国恒河猴阴道黏膜小剂量多次感染研究,为我国艾滋病疫苗有效性评价提供新的模型构建思路。方法选用20-30TCID50剂量的SHIVSF162p3病毒阴道黏膜途径感染六只成年雌性中国恒河猴,共感染13次,每次攻毒间隔4～7 d。采取测定血浆病毒载量和外周血CD4+∶CD8+。结果 6只中国恒河猴经13次病毒攻击后,经检测均建立系统性感染,血浆病毒载量呈阳性;CD4+∶CD8+均有下降。结论成功建立了中国恒河猴阴道黏膜小剂量多次感染模型,为艾滋病研究提供了新的更接近于自然感染状态的模型建立模式。
- 丛喆刘浩朵建英王卫蒋虹高虹杨志伟Sylvain Fleury魏强秦川
- 关键词：黏膜感染
- β-tubulin在肾脏D5R与CCKBR相互调节中的重要作用
- 2018年
- 目的探讨β-tubulin在胆囊收缩素B受体(cholecystokinin B receptor,CCKBR)和多巴胺D5受体(dopamine D5 receptor,D5R)相互作用的调节机制。方法选用正常人和高血压患者肾脏近曲小管细胞(renal proximal tubular cells,RPTC),各分为3组:CCKBR激动剂(gastrin)处理组;D5R激动剂(fenoldopam)处理组;gastrin+微管抑制剂(nocodazole)组。免疫荧光法测定β-tubulin、CCKBR和D5R的定位,免疫印迹方法检测CCKBR、D5R和Na+,K+-ATP酶的表达。结果 Gastrin处理正常RPTC后D5R表达显著增加(P<0.05),Na+,K+-ATP酶的表达降低(P<0.05),fenoldopam同样能够刺激CCKBR表达增加(P<0.05),但nocodazole预处理后再加入gastrin并不能够增加D5R的表达,也不能降低Na+,K+-ATP酶的表达。高血压患者RPTC中CCKBR和D5R的相互作用以及Na+,K+-ATP酶的表达变化并不明显。免疫荧光结果显示,正常RPTC中CCKBR和D5R蛋白能够被诱导转移到细胞膜上,微管抑制剂能够显著阻断转移过程,但高血压患者RPTC中β-tubulin杂乱无章,CCKBR和D5R蛋白也没能有效转移到细胞膜上。结论 tubulin通过促进CCKBR和D5R从细胞质向细胞膜转运,从而发挥生物学功能,可能在二者相互作用和钠水代谢中起到重要作用。
- 刘星刘云鹏付慧刘雪姜晓亮杨志伟
- 关键词：Β-TUBULIN蛋白转运
- Sestrin2在吸烟诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤中的作用机制被引量：3
- 2018年
- 目的探索Sestrin2在吸烟诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤中的作用机制。方法使用香烟烟雾提取物(CSE)处理人肺泡Ⅱ型上皮细胞复制吸烟诱导的肺泡上皮细胞损伤。使用DCFDA荧光探针检测ROS的生成,ELISA方法检测炎症因子TNF-α和IL-8的水平,免疫印迹方法检测Sestrin2的表达以及过氧化物酶(Prx-SO_(2/3)H)的氧化情况。同时检测Sestrin2 siRNA以及阿奇霉素处理后细胞中Sestrin2和Prx-SO_(2/3)H的表达以及ROS的生成和炎症因子的分泌。结果 CSE处理A549细胞后Sestrin2的表达降低,Prx-SO_(2/3)H的表达增加,ROS的产量升高,TNF-α和IL-8的分泌增多,阿奇霉素能够显著缓解CSE诱导的氧化应激及炎症损伤(P<0.05)。A549细胞经Sestrin2 siRNA沉默后,超氧化的Prx-SO_(2/3)H表达增多,ROS的产量升高,TNF-α和IL-8的分泌增多,但额外给予阿奇霉素不能缓解细胞的氧化应激及炎症损伤。结论 Sestrin2通过抑制细胞内ROS的生成在吸烟诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤中发挥重要的保护作用,其机制与Sestrin2催化还原超氧化的过氧化物酶有关。
- 姜晓亮刘雪刘云鹏付慧刘星杨志伟
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病活性氧
- 共伴侣蛋白FKBP51在高脂诱导肥胖中的作用被引量：4
- 2015年
- 目的通过FKBP51基因敲除小鼠模型和细胞脂肪分化模型,探究FKBP51在高脂诱导肥胖中的机制。方法 4周龄雄性野生型和FKBP51基因敲除小鼠以普通或高脂饲料单只单笼喂养6周,每周记录小鼠体重和饮食量,应用MM-100代谢笼系统,监测各组小鼠24 h内氧气消耗量、二氧化碳产生量、呼吸交换率和产热量的变化,对上述小鼠肝脏组织进行油红O染色,同时检测肝脏和脂肪组织代谢相关基因的表达情况。同时对取自野生型和FKBP51基因敲除小鼠的永生化成纤维细胞(MEF)进行脂肪诱导分化,观察FKBP51缺失对脂肪分化的影响。结果高脂饮食诱导后,两种基因型小鼠饮食量无明显变化,但与野生型小鼠相比,FKBP51基因敲除小鼠体重明显减轻,肝脏中脂滴减少。FKBP51基因敲除小鼠在基础和高脂诱导条件下,氧气消耗量、二氧化碳产生量、呼吸交换率以及产热量均高于野生型小鼠,肝脏中糖异生相关酶PEPCK、G6Pase等表达上调,脂肪中能量代谢相关基因UCP-1等表达上调。此外,FKBP51基因缺失的MEF诱导脂肪分化,细胞内脂滴明显少于野生型MEF细胞。结论 FKBP51基因在脂肪合成和能量代谢方面起着重要作用,因此FKBP51基因缺失小鼠能够抵制高脂诱导的肥胖。
- 张曼邱彬曹勇徐玉雪邓然杨志伟雍伟东
- 关键词：能量代谢肥胖
