查新民 作品数:8 被引量:40 H指数:4 供职机构: 信州大学 更多>> 发文基金: 江苏省自然科学基金 教育部留学回国人员科研启动基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 化学工程 更多>>
信号肽引导源基因在昆虫表达系统中的分泌表达 被引量:2 2003年 将杆状病来源的gp67信号肽引导的慈姑蛋白酶抑制剂(API)基因与植物来源的慈姑蛋白酶抑制剂信号肽引导的慈姑蛋白抑制剂(API)基因,分别克隆到昆虫杆状病毒转载体pBacPAK8中,通过共转染将它们分别整合到昆虫病毒表达载体Bm-BacPAK6中,将获得的重组病毒CrBK-API2和CrBK-bpAPI4分别接种家蚕(Bombyxmori)细胞、家蚕幼虫及蛹体中,慈姑蛋白酶抑制剂得到了高效表达。从家蚕细胞的表达来看,外源表达产物大多存在于细胞外的上清液中;从家蚕幼虫体内表达来看,信号肽能引导外源基因高效表达,且表达产物的90%以上能分泌到细胞外;蛹体中的表达情况与幼虫中的相似,但表达产物出了不均一的现象,从表达产物的分子量测定来看,这两种信号肽在表达过程中都没有被切除。 季平 查新民 张国英 沈卫德关键词:基因 杆状病毒 家蚕 接种 分泌表达 太湖流域野桑蚕的生态学研究 被引量:11 2003年 通过对太湖流域地区的野桑蚕进行跟踪调查 ,发现吴县地区的野桑蚕年发生代数多为 4代 ,吴江市南部乡镇的野桑蚕年发生代数以 3代为主。 李兵 于继彬 耿世勇 查新民 季平 沈卫德关键词:野桑蚕 生态学 太湖流域 东亚钳蝎神经毒素基因BmK IT_3的克隆及其在大肠杆菌中的表达 被引量:3 2002年 According to the reported sequence of \%Buthus martensii\% Karsch scorpion toxin gene (BmK IT 3),we synthesized two primers,which were complementary in a region.By the means of PCR,we got the gene.The gene was fused in expression vector pET-28a,which gave rise to a recombinant plasmid pET(IT 3 R).Then it was transformed into \%E.coli\% BL21 (DE 3).With IPTG induction,the gene was efficiently expressed.And the fusion product was soluble. 于继彬 季平 查新民 沈卫德 吴祥甫关键词:东亚钳蝎 大肠杆菌 核型多角体病毒的遗传改造及功能分析 核型多角体病毒用作生物杀虫剂有许多突出的优点,但其过狭的宿主域与缓慢的发病致死作用两大缺点也在一定程度上影响了商品化的速度.对核型多角体病毒进行遗传修饰及功能分析,以期逐步解决以上问题.将苜蓿尺蠖核型多角体病毒(Auto... 查新民关键词:核型多角体病毒 生物杀虫剂 文献传递 家蚕血细胞分类和造血功能研究 被引量:7 2005年 荧光染料丫啶橙和碘化丙啶可以用来正确分类家蚕所有的血细胞,并了解许多尚未知的血球特征。运用BrdU标记循环血细胞,结果表明:外科手术摘除家蚕造血器官后,血细胞以接近40%的比率分裂,说明家蚕血细胞自身的分裂能力是其造血功能的重要补充,也显示出昆虫具有高度免疫功能。 傅吉涛 刘朝良 凌尔军 查新民 李东升关键词:家蚕 血细胞 造血功能 细胞分裂 东亚钳蝎抑制型神经毒素基因在昆虫细胞中的表达及活性鉴定 被引量:4 2003年 基因BmKIT3R 是根据东亚钳蝎 (ButhusmartensiiKarsch)抑制型神经毒素基因BmKIT3 优化而得的 .将优化过的蝎毒素基因BmKIT3R 通过Bac to Bac操作技术 ,使重组杆状病毒基因组DNA转染到草地粘虫sf2 1细胞中对IT3R 基因进行表达 ,经SDS PAGE检测在 8.7× 10 3 处有一表达条带 .表达产物经生物鉴定 ,证明具有很高的活性 ,它对昆虫具有非常明显的致死作用 .图 3参 于继彬 季平 查新民 沈卫德 沈小川 杨扬 吴祥甫关键词:生物活性鉴定 异源多角体蛋白对家蚕核型多角体病毒粒子的包装 被引量:10 2002年 利用PCR方法从AcMNPV基因组DNA中分离出多角体蛋白基因 ,将该扩增片段克隆到转移载体pBacPAK8中 ,得到重组转移载体pOAc。将该质粒DNA与线性化的Bm BacPAK6病毒基因组DNA共传染BmN细胞 ,得到了能形成多角体且不产生蓝色空斑的重组病毒hp BmNPV。纯化该重组病毒的多角体颗粒 ,并对多角体蛋白、病毒核酸及多角体病毒颗粒进行分析 ,发现AcMNPV的多角体蛋白能在家蚕细胞中大量表达且能在细胞内识别家蚕核型多角体病毒并组装成多角体颗粒 ;病毒基因组DNA因部分交换 ,其酶切行为发生了相应的变化 ;电镜观察发现经AcMNPV多角体蛋白包装的家蚕核型多角体病毒的多角体颗粒大小为1 2 μm~ 2 9μm 。 季平 查新民 张国英 于继彬 顾维 沈卫德关键词:多角体蛋白 家蚕核型多角体病毒 拓展AcMNPV宿主域至家蚕的研究 被引量:5 2001年 将核型多角体病毒(Autographa caliphanic nuclear polyhedrosis virus,AcMNPV)与家蚕核型多角体病毒(Bombyxmori nuclear polyhedrosis virus,NmNPV)基因组DNA的Sma I酶切C片段共转染Sf细胞,共转染上清液接种到BmN细胞中进行扩增,然后在BnN中进行空斑分析,挑取多角体空斑进行扩增。发现所得到的病毒即能在Sf纫胞中增殖,也能在BmN细胞中增殖,并产生多角体颗粒。用重组病毒的多角体口服感染幼虫,能引起家蚕幼虫发病。 查新民 季平 于继彬 沈卫德关键词:ACMNPV BMNPV 共转染 杆状病毒 病毒杀虫剂 家蚕