沈伟伟
- 作品数：12 被引量：16H指数：2
- 供职机构：第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
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- CD147对肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响
- 目的：探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN,EMP,又称CD147)对肺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响及...
- 卓云云王洪凯沈伟伟陈武桂毛德举胡旭张超初同伟
- 关键词：CD147BETA-CATENIN肺肿瘤细胞增殖迁移
- shRNA干扰Semaphorin4D表达对乳腺癌细胞增殖、周期及迁移的影响
- 目的：研究Semaphorin 4D(Sema 4D)对乳腺癌细胞增殖、周期及迁移的影响,初步探讨其在乳腺癌发生和发展中的作用.方法：实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法检测Sema 4D在不同转移潜能乳腺癌细胞系MDA-M...
- 陈武桂沈伟伟胡旭卓云云毛德举初同伟
- 关键词：乳腺癌增殖细胞周期迁移
- 乳腺癌来源的Semaphorin4D抑制成骨细胞分化
- 目的：乳腺癌骨转移时乳腺癌的严重并发症之一,乳腺癌骨转移破坏了正常的骨重塑平衡,引起溶骨性病变.在这过程中肿瘤细胞分泌多种因子调控成骨与破骨细胞的生理活动,Semaphorin 4D(Sema 4D)是一类轴突引导生长因...
- 陈武桂沈伟伟胡旭卓云云毛德举初同伟
- 关键词：乳腺肿瘤骨转移成骨分化
- 有限稀释法分选人骨肉瘤143-B干细胞及鉴定
- 2015年
- 目的:探索人骨肉瘤143-B干细胞的分选及鉴定方法。方法:采用有限稀释法对143-B细胞进行干细胞的分选,并检测所获取细胞表面干细胞标志物Nanog和OCT4的表达水平;对所获取的细胞进行成骨及成脂诱导分化,以检测其是否具有多向分化的潜能;动物成瘤实验鉴定细胞的成瘤能力,耐药实验检测顺铂对细胞半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)的影响。结果:分选获得的单克隆143-L细胞具有较高的成球能力;143-L细胞表面Nanog和OCT4 m RNA和蛋白的表达水平均明显高于亲代143-B细胞;对其进行成骨及成脂多向诱导分化成功。143-L细胞的成瘤能力及耐药能力(顺铂对143-B及143-L细胞的IC50值分别为0.83和2.51μg/m L)均明显高于143-B细胞。结论:有限稀释法可以用于143-B细胞干细胞的分选。
- 毛德举胡旭张莹沈伟伟陈武桂陈培何建荣卓云云张超初同伟
- 关键词：骨肉瘤肿瘤干细胞
- CD147对肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响被引量：2
- 2015年
- 目的:探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN,EMP,又称CD147)对肺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响及其可能的机制。方法:将CD147过表达慢病毒、短发夹RNA(short hairpin RNA,sh RNA)干扰CD147表达的慢病毒及阴性对照(negative control,NC)慢病毒分别感染肺癌A549细胞,获得CD147稳定过表达的A549EMP细胞、稳定干扰CD147表达的A549sh EMP细胞和阴性对照A549NC细胞。应用CCK-8(cell counting kit-8)法、细胞划痕实验和Transwell小室法分别检测A549EMP、A549sh EMP和A549NC细胞的增殖、迁移及侵袭能力;蛋白质印迹法检测A549EMP、A549sh EMP和A549NC细胞中β-catenin的核表达情况。结果:A549EMP细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显高于未进行慢病毒感染的空白对照组A549细胞和阴性对照组A549NC细胞(P<0.05),而A549sh EMP细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显低于空白对照组A549细胞和阴性对照组A549NC细胞(P<0.05)。A549EMP细胞β-catenin的核表达水平明显高于空白对照组A549细胞和阴性对照组A549NC细胞(P<0.05),而A549sh EMP细胞β-catenin的核表达水平明显低于空白对照A549细胞和阴性对照组A549NC细胞(P<0.05)。结论:CD147可增强肺癌A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其机制可能与β-catenin的激活有关。
- 卓云云王洪凯沈伟伟陈武桂毛德举胡旭张超初同伟
- 关键词：细胞增殖细胞运动肿瘤浸润CD147BETA-CATENIN
- Jagged1活化Notch通路促进RAW 264.7向破骨分化但抑制增殖被引量：7
- 2014年
- 目的:探讨Jagged1通过活化Notch通路对RAW 264.7细胞向破骨分化及增殖的影响。方法:将RAW 264.7细胞分三组培养:对照组(细胞培养基+鼠RANKL 50 ng/L)、Jagged1组(细胞培养基+鼠RANKL+Jagged1重组蛋白)、γ-分泌酶抑制剂(DAPT)组(细胞培养基+鼠RANKL+Jagged1重组蛋白+DAPT),实时荧光定量PCR检测各组破骨细胞标志基因组织蛋白酶K(Cathepsin K,CK)、抗酒石酸性磷酸酶(Tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)、降钙素受体(Calcitionin receptor,CTR)及Notch靶基因HES-1、HEY-1 mRNA的表达,TRAP染色鉴定破骨细胞,扫描电镜检测破骨细胞溶骨功能。免疫荧光检测NICD的表达变化,CCK-8检测RAW 264.7细胞增殖。结果:Jagged1组TRAP、CK、CTR及HES-1、HEY-1 mRNA的表达、TRAP+细胞数较对照组及DAPT组明显升高(P<0.05),而DAPT组与对照组均无明显变化;细胞免疫荧光显示Jagged1组NICD除表达于细胞膜、细胞质外,细胞核也有较高表达,对照组及DAPT组细胞核中NICD无明显表达;细胞培养48 h,Jagged1组细增殖较对照组及DAPT组出现明显抑制。结论:Jagged1通过活化Notch通路促进RAW 264.7向破骨细胞分化、抑制其增殖。
- 王汝杰刘复州沈伟伟胡旭陈培毛德举卓云云陈武桂周跃初同伟
- 关键词：JAGGED1NOTCH
- 不同前列腺癌细胞对成骨前体细胞增殖和成熟能力的影响
- 2013年
- 目的 :探讨前列腺癌LNCaP和PC-3细胞条件培养液(conditioned medium,CM)对成骨前体细胞MC3T3-E1增殖和分化的影响。方法 :分别用含20%LNCaP CM、20%PC-3 CM和不含CM的α-MEM培养液(作为对照组)处理MC3T3-E1细胞。CCK-8法检测各组细胞的增殖情况,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性检测试剂盒检测各组细胞中ALP的活性,茜素红染色法检测各组细胞的钙化情况,实时荧光定量-PCR法检测各组细胞中Ⅰ型胶原蛋白α1(collagen typeⅠalpha 1,Col1α1)、骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)和RUNX2(runt-related transcription factor 2)的mRNA表达水平。结果 :与对照组和LNCaP CM组相比,PC-3CM组MC3T3-E1细胞的增殖能力明显增高(P<0.05);LNCaP CM组MC3T3-E1细胞中ALP的活性明显高于对照组(P<0.05),钙化面积大于对照组(P<0.05);PC-3 CM组MC3T3-E1细胞中ALP的活性较对照组明显降低(P<0.05),钙化面积明显小于对照组(P<0.05);LNCaP CM组MC3T3-E1细胞中Col1α1、OCN和RUNX2的mRNA表达水平均明显高于对照组(P<0.05),而PC-3 CM组MC3T3-E1细胞中Col1α1、OCN和RUNX2的mRNA表达水平均明显低于对照组(P<0.05)。结论 :PC-3 CM可明显促进成骨前体细胞增殖,但抑制其分化成熟;而LNCaP CM可显著促进成骨前体细胞分化成熟,说明该模型能够充分反映不同前列腺癌细胞对成骨前体细胞增殖和分化的差异,可以作为后续研究前列腺癌骨转移机制的体外模型。
- 刘复州邱浩王汝杰邹传奇刘栓得胡旭沈伟伟张超周跃初同伟
- 关键词：前列腺肿瘤细胞增殖细胞分化体外研究
- siRNA介导的Semaphorin4D沉默对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及迁移的影响
- 目的：观察siRNA沉默信号素4D(Semaphorin 4D,Sema 4D)对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移的影响.方法：构建靶向Sema 4D基因的siRNA,脂质体法转染MDA-MB-231细胞系,通过...
- 陈武桂沈伟伟胡旭卓云云毛德举初同伟
- 关键词：SIRNA乳腺癌迁移
- RNA干扰Semaphorin 4D表达对乳腺癌细胞增殖、周期及迁移的影响被引量：2
- 2015年
- 目的 :研究Semaphorin 4D(Sema 4D)表达沉默对乳腺癌细胞增殖、周期及迁移的影响,初步探讨该蛋白在乳腺癌发生和发展中的作用。方法 :实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测Sema 4D在不同转移潜能的乳腺癌细胞株MDA-MB-231和MCF-7中的表达水平。采用短发夹RNA(short hairpin RNA,sh RNA)慢病毒感染法,建立Sema 4D稳定低表达的MDA-MB-231细胞系,然后采用CCK-8法、FCM法、划痕愈合实验及Transwell迁移实验检测细胞增殖、周期分布及迁移能力的变化。结果 :Sema 4D在MDA-MB-231细胞中表达水平明显高于MCF-7细胞(P<0.05);sh RNA慢病毒感染可明显下调MDA-MB-231细胞中Sema4D的表达;与空白对照组比较,Sema 4D干扰组的MDA-MB-231细胞增殖明显被抑制(P<0.05),G0/G1期细胞所占比例明显增高(P<0.05),而细胞迁移能力明显降低(P<0.05)。结论:Sema 4D在高转移潜能的乳腺癌MDA-MB-231细胞中高表达,sh RNA干扰Sema 4D表达可抑制该细胞的增殖和迁移,并阻滞细胞周期于G1期。
- 陈武桂沈伟伟胡旭卓云云毛德举初同伟
- 关键词：乳腺肿瘤细胞增殖细胞周期
- siRNA沉默Sema 4D对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及迁移的影响被引量：4
- 2015年
- 目的:观察siRNA沉默信号素4D(semaphorin 4D,Sema 4D)对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移的影响。方法:构建靶向Sema 4D基因的siRNA,脂质体法转染MDA-MB-231细胞系,通过实时荧光定量-PCR、Western blotting检测干扰效率,筛选有效序列。siRNA有效干扰MDA-MB-231细胞Sema 4D表达后,CCK-8法及Transwell迁移实验检测细胞增殖及迁移能力的变化。结果:Sema 4D siRNA转染MDA-MB-231细胞后Sema 4D的(mRNA及蛋白)表达水平明显下降(P<0.05),其中以siRNA-C最明显(P<0.05);与空白、阴性对照组相比,siRNA-C沉默MDA-MB-231细胞Sema 4D表达可明显抑制MDA-MB-231细胞增殖(均P<0.05),同时明显减弱细胞的迁移能力[穿膜细胞数:(105.60±12.07)vs(196.20±9.04)、(186.40±6.69)个,均P<0.05]。结论:siRNA沉默Sema 4D可抑制MDA-MB-231细胞增殖,并抑制细胞迁移,可作为乳腺癌基因治疗的潜在位点。
- 陈武桂沈伟伟胡旭卓云云毛德举初同伟
- 关键词：SIRNA乳腺癌迁移
