王娅娜
- 作品数：2 被引量：22H指数：2
- 供职机构：清华大学化学工程系生物化工研究所更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- Nocardia sp.RS合成腈水合酶过程及其高酶活的表达工艺被引量：11
- 2003年
- 对Nocardia sp. RS合成腈水合酶的过程进行了分析,研究了菌体生长和酶活表达的相互关系、pH调控和葡萄糖消耗对产酶速率的影响. 根据腈水合酶在发酵过程中的生成特性,设计开发了葡萄糖-Co2+耦合补加工艺优化产酶过程,通过对产酶过程的优化,大大提高了腈水合酶的发酵水平,酶活达到了10195 U/ml,比优化前提高了43.2倍.
- 刘铭李春高毅王娅娜曹竹安
- 关键词：腈水合酶丙烯酰胺发酵酶活
- Nocardia sp.腈水合酶的纯化过程研究被引量：12
- 2004年
- 对Nocardia sp.高活力腈水合酶进行了纯化研究.在细胞破碎中,超声时间对腈水合酶比酶活存在一个最优值,超声时间为20.00min时得到的比酶活最高.在离子交换层析过程中,采用DEAE-Sepharose作为层析介质,分别对平衡缓冲液pH、离子强度和线性梯度洗脱体积进行了优化.结果表明,采用pH7.20、50mmo1·L-1的Na2HPO4-NaH2PO4溶液作为平衡缓冲液,0.00～1.00mo1·L-1的NaCI线性梯度洗脱,洗脱体积为20～25倍柱体积,此条件下腈水合酶的纯化倍数和酶活收率较佳.以Phenyl-Sepharose FF为层析介质研究了疏水层析精制腈水合酶的工艺过程,采用两步层析优化方法纯化出的Nocardia sp.腈水合酶比酶活达到2648.0 U·mg-1,酶活收率为40.84%,用SDS-PAGE检测其纯度为99 00%以上.Nocardia sp.腈水合酶的两个亚基分子量分别为22.90 kDa和27 38 kDa.
- 刘铭李春黄星王娅娜曹竹安
- 关键词：腈水合酶离子交换层析疏水层析蛋白质纯化丙烯酰胺
