王志华
- 作品数:3 被引量:7H指数:2
- 供职机构:中国科学院研究生院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 水杨酸-5-羟化酶基因和p35基因表达影响植物抗病及抗病机理研究
- 本论文研究了外源基因表达对植物抗病的影响及可能抗病机理,由三部分组成:<br> 第一章:概述了植物抗病信号分子水杨酸(SA)、茉莉酸(JA)和乙烯(ET)的作用机理和抗病途径中相关基因的作用以及SA、J...
- 王志华
- 关键词:水杨酸抗病机理外源基因表达
- 烟草MARs的分离及其功能分析被引量:5
- 2005年
- 从烟草基因组中克隆到两条新的MAR片段(M14和M17),序列分析表明,它们具有90%ATbox,Abox,Tbox,碱基非配对区域,拓扑异构酶Ⅱ识别位点,弯曲DNA序列,复制起始序列和ATATTT等典型的MAR序列特征,并与原有MAR序列的特征不同。将它们分别构建到植物表达载体pCAMBIA2301GUS基因(uidA)表达盒一侧及两侧,通过农杆菌介导转化烟草。组织化学染色法定性检测GUS活性表明,带有M14和M17的uidA基因在转基因烟草中稳定表达。GUS活性的定量检测表明,表达载体上uidA基因一端或两端连接有MAR的转化烟草中,GUS的表达水平与对照相比都有了明显提高,而uidA基因两侧连有MAR的载体提高表达水平的效果优于一端连有MAR的载体,可使GUS活性增强3.14倍,但不同转化个体之间表达水平的差异仍然明显。上述结果表明,所得DNA序列为两条新的MAR片段,并且具有提高转基因表达水平的功能。
- 黄慧珍王瑶陈士云王志华杨宝玉
- 关键词:MARS烟草转基因表达
- 杆状病毒p35基因诱导烟草产生广谱抗病机理分析(英文)被引量:2
- 2008年
- 来源于昆虫病毒和动物的抗细胞凋亡基因能够诱导植物对生物或者非生物胁迫产生抗性,但其抗性机理有不同甚至相反的报道。本研究将来源于苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒的p35基因转化烟草,T1代转化烟草Western blotting检测P35蛋白的表达,转化烟草接种烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)抗病效果增强。进一步的抗病机理研究表明,转化和野生型烟草感染TMV后诱导过氧化氢积累无明显区别,野生型烟草感染24 h后出现DNA Laddering而转化烟草则没有;Western blotting结果显示PR-1蛋白表达没有显著差异。但接种另外一种病原真菌核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)后的RT-PCR分析结果表明,表达P35蛋白的烟草可增强感染核盘菌后PR-1基因的转录,而且表达时间提前。以上结果说明p35基因介导的广谱抗病反应的机理与接种的不同病原有关,对不同病原物的抗病机理存在差异,除抑制细胞凋亡外,还可能通过激活PR基因的表达提高对病原物的抗病能力。
- 王志华宋建华张勇杨宝玉王瑶陈士云
- 关键词:细胞凋亡杆状病毒P35病程相关蛋白