相恒伟
- 作品数：6 被引量：4H指数：1
- 供职机构：青岛大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省科技发展计划项目山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- TK基因治疗库欣病的实验研究
- 2014年
- 目的探讨胸苷激酶(TK)基因在库欣病的基因治疗中的作用及机制。方法采用免疫印迹法检测腺病毒载体AdPOMCTK转入小鼠垂体瘤AtT20细胞及人乳腺癌T47D细胞后TK基因的表达情况;采用非放射性细胞增殖检测试剂盒检测AdPOMCTK在不同感染复数(MOI)下转染AtT20细胞和人T47D细胞后对更昔洛韦(GCV)的敏感性。将转染了AdPOMCTK的AtT20细胞和未经转染的细胞以不同比例混合,观察旁观者效应。结果 TK基因转染入AtT20细胞并成功表达,但在T47D细胞中表达不明显,说明POMC启动子具有靶向性;即使在低MOI下,转染组细胞仍明显表现出对GCV的敏感性;混合细胞与对照细胞相比杀伤作用明显,说明旁观者效应存在。结论将TK基因导入AtT20细胞并经GCV处理后可明显降低细胞存活率。本研究为临床TK基因治疗库欣病奠定了实验基础。
- 宋庆鑫王建鹏阴晓峰相恒伟刘霞张欣孙鹏
- 关键词：库欣病基因疗法更昔洛韦胸苷激酶
- 帕金森病的干细胞移植治疗技术创新体系
- 孙鹏姜云霞邓文帅阴晓峰韩昆和政刘凯樊明超相恒伟
- 该项目的计划实施来源于2011年国家自然基金面上资助项目，自体BMSCs源多巴胺神经元移植促进老龄食蟹猴帕金森病模型神经功能重塑的实验研究(项目批准号：81171208)。帕金森病(Parkinson’s disease...
- 关键词：
- 关键词：帕金森病基因治疗干细胞移植治疗
- 慢病毒介导artemin基因修饰的骨髓间充质干细胞对帕金森病大鼠的治疗作用被引量：1
- 2015年
- 目的 探讨慢病毒介导的artemin（ARTN）基因修饰的骨髓间充质干细胞（MSCs）对帕金森病模型大鼠潜在性治疗作用及对脑内相关蛋白表达的影响.方法 分离培养大鼠MSCs,将携带ARTN的慢病毒载体转染MSCs;6-羟多巴胺（6-OHDA）制备帕金森病大鼠模型,按随机数字表法随机分为假手术（Sham）组、帕金森病组、移植MSCs（MSCs）组、移植空病毒转染的MSCs（LV-MSCs）组、移植慢病毒介导的ARTN基因修饰的MSCs （LV-ARTN-MSCs）组,对帕金森病大鼠左侧纹状体进行细胞移植;术后2、4、6、8周,腹腔注射阿扑吗啡,进行行为学检测;采用Western印迹及免疫荧光法检测各组大鼠黑质酪氨酸羟化酶（TH）表达变化,移植ARTN修饰的MSCs在大鼠脑组织内表达;高效液相色谱仪检测各组大鼠纹状体内多巴胺、二羟基苯乙酸、高香草酸含量.结果 LV-ARTN-MSCs组在阿扑吗啡诱发下30 min内旋转圈数（179.33±18.74）明显低于帕金森病组、MSCs组和LV-MSCs组（235.83±18.95、203.67±11.50和206.33±11.86;q=8.828,P＜0.01;q=3.802,P＜0.05;q=4.219,P＜0.05）.LV-ARTN-MSCs组大鼠黑质TH阳性细胞百分比（64.05％±5.49％）显著高于帕金森病组（34.18％±3.35％）、MSCs组（52.59％±4.48％）和LV-MSCs组（50.57％±4.41％;q=13.280、5.135、6.028,均P＜0.01）,黑质TH蛋白表达也明显提高,同时慢病毒介导ARTN修饰的MSCs可以在帕金森病大鼠脑内存活至少6周,主要集中在移植侧的纹状体区.细胞移植8周后,MSCs组（2.34±0.54）、LV-MSCs组（2.28±0.45）、LV-ARTN-MSCs组（6.54±0.51）与帕金森病组（0.87±0.07）大鼠相比,纹状体多巴胺表达明显提高（q =5.233,P＜0.05;q=5.020,P＜0.01;q=20.190,P＜0.01）,以LV-ARTN-MSCs组最明显.结论 纹状体移植慢病毒介导ARTN基因修饰的MSCs对帕金森病模型大鼠有一定的治疗作用.
- 刘凯阴晓峰相恒伟邓文帅孙鹏
- 关键词：帕金森病间质干细胞神经组织蛋白质类慢病毒属
- Artemin基因修饰的骨髓间充质干细胞对多巴胺能神经元的保护作用被引量：3
- 2015年
- 目的 探讨Artemin（ARTN）对6-羟基多巴胺（6-OHDA）诱导的多巴胺能神经元损伤的保护作用及对帕金森病（PD）大鼠脑内相关蛋白表达的影响。 方法 分离培养大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）,将携带ARTN基因的慢病毒载体转染MSCs,获得稳定表达ARTN的MSCs细胞株。应用MTT法测定细胞存活率,Hochest33258荧光染色观察凋亡细胞形态学改变,同时检测Lv-ARTN-MSCs细胞上清液对6-OHDA诱导SH-SY5Y细胞凋亡作用的影响。制备PD大鼠模型,按照随机数字表法分为PD组（左侧纹状体输注生理盐水5μL）、MSCs组（左侧纹状体移植MSCs,1.0×10^5个/5 μL）、Lv-MSCs组（左侧纹状体移植Lv-MSCs,1.0×10^5个/5 μL）、Lv-ARTN-MSCs组（左侧纹状体移植Lv-ARTN-MSCs,1.0×10^5个/5 μL）,每组各6只;另取6只大鼠设为假手术组（以等量生理盐水代替6-OHDA,手术步骤及坐标同PD模型大鼠制备）。Western blotting检测各组大鼠纹状体酪氨酸羟化酶（TH）和多巴胺转运体（DAT）表达。 结果 Lv-ARTN-MSCs组可见明显的ARTN蛋白条带。Lv-ARTN-MSCs上清液可明显拮抗6-OHDA引起的细胞存活率降低,与6-OHDA组相比,Lv-ARTN-MSCs组细胞存活率提高13.67％,差异有统计学意义（P＜0.05）。细胞移植8周后,MSCs组、LV-MSCs组、LV-ARTN-MSCs组与PD组大鼠相比,纹状体TH、DAT蛋白表达明显提高,差异有统计学意义（P＜0.05）,以LV-ARTN-MSCs组最明显。 结论 ARTN作为一种分泌蛋白,可以抑制6-OHDA诱导的多巴胺能神经元损伤,推测机制为上调TH、DAT蛋白表达。
- 刘凯阴晓峰相恒伟邓文帅孙鹏
- 关键词：帕金森病骨髓间充质干细胞基因转染
- 重组Persephin慢病毒对多巴胺能神经元的保护作用被引量：1
- 2015年
- 目的探讨重组慢病毒介导的Persephin基因治疗对6-OHDA制备的帕金森病（PD）模型大鼠多巴胺能神经元的保护作用。方法将64只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、6-OHDA组、空病毒＋6-OHDA组、Persephin慢病毒预处理＋6-OHDA组,并给予相应处理。6-OHDA注射21d后检测大鼠的旋转行为,免疫荧光检测黑质多巴胺能神经元数目,Western blot检测Persephin及酪氨酸羟化酶（TH）在脑内黑质区的表达。结果Persephin慢病毒黑质注射4周后,多巴胺能神经元成功表达Persephin蛋白（F=5.451,q=3.228~4.736,P〈0.05）。6-OHDA注射21d后,Persephin慢病毒预处理＋6-OHDA组旋转次数明显低于6-OHDA组和空病毒＋6-OHDA组（F=7.551,q=4.228、5.336,P〈0.05）,多巴胺能神经元数目和TH表达水平显著高于6-OHDA组和空病毒＋6-OHDA组（F=6.251、5.251,q=3.228~5.736,P〈0.05）。结论 Persephin对6-OHDA制备的PD模型大鼠多巴胺能神经元具有保护作用。
- 相恒伟唐顺花刘凯阴晓峰邓文帅孙鹏
- 关键词：慢病毒属帕金森病多巴胺能神经元
- Ndfip1对多巴胺能神经元的保护作用
- 帕金森病是一种常见的神经系统退行性疾病，主要的疾病特点为多巴胺能神经元的减少，多巴胺释放减少，黑质-纹状体功能障碍，本文旨在进行Ndfip1大鼠黑质预处理，证实Ndfip1对多巴胺能神经元的保护作用，为帕金森病的治疗提供...
- 相恒伟
- 关键词：帕金森病免疫荧光技术多巴胺能神经元
- 文献传递
