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与肝癌细胞系HepG2特异性结合单链抗体的筛选与序列分析被引量：4: 2005年; 目的从人源噬菌体抗体库中筛选与肝癌细胞系HepG2特异性结合的单链抗体,为寻找肝癌细胞表面特异性标志及靶向研究奠定基础。方法以正常肝细胞系L02为阴性筛选细胞,以肝癌细胞系HepG2为阳性筛选靶细胞,从人源噬菌体抗体库(Griffin.1Library)经三轮筛选后,阳性菌质粒PCR确定其中含有单链抗体基因的克隆,通过细胞ELISA及FCM筛选特异性的单链抗体噬菌体,通过ABI3730全自动荧光测序仪测序,并通过GeneBank比对进行同源性分析,IPTG诱导可溶性单链抗体表达,并检测其与肝癌细胞株结合的特异性。结果获得了2个特异性较高的阳性噬菌体单个克隆。经DNA测序后,在Genebank中与人的免疫球蛋白库进行比对,并用IMGTVQuest软件进行分析,确定为2个插入序列不同的单链抗体片段。经细胞ELISA证明其阳性克隆菌培养上清可与肝癌细胞株特异性结合。获得的序列成功登陆Genebank,序列号为AY686498AY686499。结论从人源噬菌体抗体库中筛选到与肝癌细胞系HepG2特异性结合的具有功能活性的单链抗体,为进一步寻找肝癌细胞表面特异性抗原及靶向研究奠定了基础。; 余冰倪明雷萍李文涵朱慧芬张悦唐珍洁程欣沈关心; 关键词：人源噬菌体抗体库单链抗体

ACEI/D基因多态性与武汉地区原发性高血压代谢综合征关系的探讨被引量：4: 2007年; 目的:探讨武汉地区原发性高血压(EH)代谢综合征(MS)与血管紧张素转换酶(ACE)基因插入/缺失(I/D)多态性的关系。方法:701例武汉地区汉族人群分为3组,其中血压正常对照组303人,EH患者398例,其中EH患者中符合代谢综合征者189例,不伴随代谢综合组209例。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法测定3组人群中ACEI/D基因多态性。结果:①ACE各基因型频率在正常对照组与EH(包括MS与非MS组)组间差异无统计学意义;②ACEII基因型EH合并MS患者的胆固醇水平明显高于DD基因型。结论:ACE基因多态性与武汉地区原发性高血压无关,但D等位基因频率明显低于某些西方国家人群;对于EH合并代谢综合征的患者,其胆固醇水平和ACEII基因型明显相关。; 何峰容程欣沈关心王夜明; 关键词：原发性高血压代谢综合征血管紧张素转换酶基因多态性

肝癌细胞特异性结合单链抗体三维结构的同源模建被引量：1: 2005年; 用MSI公司开发的计算机辅助分子设计系统模建肝癌细胞表面抗原特异性单链抗体三维结构。先分别模建VH(variable region of the heave chain)和VL(variable region of the light chain)两个结构域,然后搭建出scFv(single chain variable fragment)片段的整体三维结构,并对模建的结构进行分子力学和动力学优化;对结构的合理性验证显示模建结构是合理的。文章可为预测该特异性单链抗体的生物活性以及研制高亲和力、高特异性的双价抗体提供结构信息。; 唐珍洁廖文君余冰钟继新朱慧芬叶庆程欣李文涵沈关心; 关键词：同源模建肝癌单链抗体

HCC特异性结合的scFv-AP融合蛋白的构建与表达被引量：2: 2005年; 目的:构建与肝癌细胞特异性结合的单链抗体-AP融合蛋白,并诱导表达。方法:提取从大型人源噬菌体抗体库中筛选的含有与HCC特异性结合的scFv-10基因的质粒,用SfiI、NotI分别酶切,连接至经同样双酶切后的原核分泌型表达载体pDAP2上,转化和筛选后,阳性细菌经IPTG诱导表达,细胞ELISA鉴定融合蛋白活性。结果:重组质粒经PCR扩增,Eco91Ⅰ单酶切及Eco91Ⅰ/NotI双酶切鉴定,证明scFv-10基因已插入到原核分泌型表达载体pDAP2上。表达产物的定位分析表明融合蛋白主要分泌性表达到周质腔,细胞ELISA证明表达产物有与HCC结合的活性。结论:成功地构建并表达了与HCC特异性结合的单链抗体-AP融合蛋白,为其应用奠定了基础。; 程欣黄永建黄宇朱慧芬余冰唐珍洁李文涵沈关心; 关键词：单链抗体碱性磷酸酶融合蛋白

湖北地区2004—2009年三级医院儿童感染不动杆菌耐药性分析: 2011年; 目的:动态调查分析湖北地区儿童感染不动杆菌的耐药性变迁趋势,了解湖北地区三级甲等医院儿科临床分离不动杆菌的耐药状况。方法:收集6年间湖北地区17所三级医院儿科临床分离的不动杆菌,用K2B方法药敏试验的抑菌圈直径输入计算机,采用WHONET5软件进行统计分析,根据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)2009年标准判定不动杆菌对抗菌药物的耐药率(R%)和敏感率(S%)。结果:6年中湖北地区儿童感染的不动杆菌对12种药物敏感率呈不同程度下降。耐药率唯一有大幅下降的是米诺环素,结论:湖北地区儿童感染不动杆菌对多种抗菌药物的耐药性呈上升趋势。目前头孢哌酮舒巴坦、亚胺培南或美罗培南仍是临床对儿童感染不动杆菌属较好的选择药物。; 黄永建程欣张建毅黄志华孙自镛陈中举; 关键词：儿童不动杆菌属耐药性监测米诺环素

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程欣