李文涵
- 作品数：13 被引量：24H指数：4
- 供职机构：华中科技大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划卫生部科学研究基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学艺术建筑科学更多>>
- SLC修饰肿瘤诱导外周血单个核细胞增殖与抗瘤作用
- 目的:本实验将转染次级淋巴组织趋化因子(SLC)的肿瘤细胞与外周血单个核细胞(PBMC)共培养后, 探讨致敏后PBMC凋亡及抗肿瘤效应。方法:①转染SLC的肿瘤细胞或未转染SLC的肿瘤细胞经丝裂霉素C处理,分别与PBMC...
- 吴砂赵晓平彭吉林王敏李文涵袁晓梅邢薇刘静雷萍朱慧芬沈关心
- 关键词：次级淋巴组织趋化因子PBMC
- 文献传递
- 内质网伴侣蛋白Grp78在STZ诱导Ⅰ型糖尿病不同时期表达变化
- 目的:葡萄糖调节蛋白78(Grp78)是热休克蛋白70家族的成员之一,作为一种分子伴侣在蛋白质的折叠和转运过程及内质网应激反应中发挥重要作用,也被称为内质网应激marker蛋白。本实验研究Grp78在 STZ诱导的Ⅰ型糖...
- 王敏吴砂赵晓平彭吉林李文涵何峰蓉李黎雷萍朱慧芬沈关心
- 关键词：内质网应激
- 文献传递
- 一种碱裂解菌液直接电泳快速筛选重组子的方法被引量：4
- 2005年
- 目的 :从碱裂解法提取质粒DNA的原理 ,经过实验摸索获得一种快速、经济、结果可靠的菌液直接碱裂解电泳筛选重组子的方法。方法 :不需提取质粒DNA ,只需将细菌培养液碱裂解后直接进行普通琼脂糖凝胶电泳分析 ,就可以快速筛选出转化重组子。结果 :结果和提取质粒酶切鉴定鉴定结果一致。结论 :经实验证明菌液直接碱裂解电泳筛选重组子是一种快速、经济、可靠的方法。
- 熊敏李青李文涵费世江吴雄文
- 关键词：重组子
- 应急避难场所在城市公园景观设计中的研究——以郑州市中原区桐柏路长江公园景观设计为例
- 城市的日益发展带来了许多不可避免的问题，城市的扩张、密度的急速增长、自然环境的破坏都对城市的发展带来了阻碍，影响了城市居民的生活质量。特别是近几年的自然灾害频发，关注城市安全城市成为社会的热门话题。城市安全隐患对城市的规...
- 李文涵
- 关键词：城市公园应急避难场所景观设计绿地建设
- ASGPR单链抗体-蜂毒肽融合蛋白的构建及其溶红细胞效应被引量：1
- 2007年
- 去唾液酸糖蛋白受体（asialoglycoprotein receptor，ASGPR）是一种异源低聚物的内吞受体，定位于肝脏实质细胞朝向窦状隙一侧的细胞膜表面，在介导肝脏疾病靶向治疗方面具有潜在应用价值。我们在获得抗ASGPR单链抗体CI的基础上，
- 曹利民朱慧芬赵晓蓉叶庆吴砂李文涵赵晓萍朱荫昌司进沈关心
- 关键词：单链抗体细胞效应融合蛋白去唾液酸糖蛋白受体蜂毒肽RECEPTOR
- 回归传统——现代设计的新趋势
- 2014年
- 传统艺术在现代的西方设计浪潮的影响下中失去了一定的地位,现代的人们又开始重新重视传统艺术设计,运用传统的思想打造出新的意境空间,将古代的"神韵"融入其中。
- 李文涵
- 关键词：禅宗新中式
- 内质网滞留型抗TfR胞内抗体的构建、表达及其对肿瘤细胞生长的抑制
- 目的:铁是细胞生长增殖及机能活动所必需的微量元素之一,而肿瘤细胞主要是通过高表达转铁蛋白受体(TfR)来摄取铁。铁剥夺可以抑制肿瘤细胞生长及促进肿瘤细胞凋亡,本研究拟通过胞内抗体技术探讨内质网滞留型抗转铁蛋白受体单链抗体...
- 彭吉林吴砂赵晓平王敏李文涵沈昕代维雷萍朱慧芬沈关心
- 关键词：转铁蛋白受体胞内抗体肿瘤细胞
- 文献传递
- 与肝癌细胞系HepG2特异性结合单链抗体的筛选与序列分析被引量：4
- 2005年
- 目的从人源噬菌体抗体库中筛选与肝癌细胞系HepG2特异性结合的单链抗体,为寻找肝癌细胞表面特异性标志及靶向研究奠定基础。方法以正常肝细胞系L02为阴性筛选细胞,以肝癌细胞系HepG2为阳性筛选靶细胞,从人源噬菌体抗体库(Griffin.1Library)经三轮筛选后,阳性菌质粒PCR确定其中含有单链抗体基因的克隆,通过细胞ELISA及FCM筛选特异性的单链抗体噬菌体,通过ABI3730全自动荧光测序仪测序,并通过GeneBank比对进行同源性分析,IPTG诱导可溶性单链抗体表达,并检测其与肝癌细胞株结合的特异性。结果获得了2个特异性较高的阳性噬菌体单个克隆。经DNA测序后,在Genebank中与人的免疫球蛋白库进行比对,并用IMGTVQuest软件进行分析,确定为2个插入序列不同的单链抗体片段。经细胞ELISA证明其阳性克隆菌培养上清可与肝癌细胞株特异性结合。获得的序列成功登陆Genebank,序列号为AY686498AY686499。结论从人源噬菌体抗体库中筛选到与肝癌细胞系HepG2特异性结合的具有功能活性的单链抗体,为进一步寻找肝癌细胞表面特异性抗原及靶向研究奠定了基础。
- 余冰倪明雷萍李文涵朱慧芬张悦唐珍洁程欣沈关心
- 关键词：人源噬菌体抗体库单链抗体
- 肝癌细胞系HepG2特异性结合短肽的筛选及其特异性研究
- 肝癌的发生、发展过程非常复杂,涉及到肝癌细胞多分子的调变,利用不同的新技术和新方法或者将其排列组合,对肝癌细胞或肝癌组织进行鉴定筛选,在肝癌诊疗研究中具有重要的意义。表面展示技术/(surface display/)在筛...
- 李文涵
- 关键词：短肽肝癌细胞
- 文献传递
- 去唾液酸糖蛋白受体H1亚单位的表达、纯化及其单链抗体的筛选与鉴定被引量：7
- 2005年
- 目的去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)H1亚单位的重组、表达、纯化及其单链抗体的筛选与鉴定。方法将ASGPRH1亚单位糖识别区基因(CRDH1)定向克隆至原核表达载体pET-32c经IPTG诱导表达,表达产物用Ni2+螯合柱亲和纯化,免疫印迹技术(WB)检测;用纯化的CRDH1对人源噬菌体抗体库进行4轮固相筛选,阳性克隆用表达标记(Trx-His-stag)进行差异筛选。取阳性噬菌体C3感染宿主菌HB2151,37℃振荡培养过夜,终浓度为1mmol/L的IPTG诱导表达,12%SDS-PAGE与Westernblot鉴定以及免疫组化鉴定纯化的单链抗体C3与肝细胞结合的特性。结果CRDH1/pET-32c在原核系统经诱导表达出相对分子质量(Mr)约35×103大小的融合蛋白,以包涵体的形式存在;通过Ni2+亲和柱纯化获得CRDH1融合蛋白;经4轮筛选和差异筛选后,有2株可分泌性表达与CRDH1特异性结合的单链抗体,DNA序列分析表明单链抗体重链基因和轻链基因分别属于人免疫球蛋白VH3家族和VKI家族。噬菌体C3经诱导表达出Mr约28×103大小的融合蛋白,可溶性分泌表达于培养基中;通过Ni2+亲和柱纯化获得单链抗体,ELISA、Westernblot表明单链抗体C3能较好结合rCRDH1,免疫组化显示该单链抗体可与肝癌细胞、肝细胞特异结合。结论成功表达ASGPR并筛选出其人源单链抗体。该单链抗体可与表达的rCRDH1以及肝细胞和肝癌细胞特异性结合,提示对肝脏疾病的靶向治疗有潜在的应用价值。
- 曹利民司进朱荫昌王炜煜赵晓蓉叶庆李文涵朱慧芬沈关心
- 关键词：去唾液酸糖蛋白受体人源噬菌体抗体库单链抗体去唾液酸糖蛋白受体人源单链抗体亚单位H1噬菌体抗体库
