范凡
- 作品数：9 被引量：20H指数：3
- 供职机构：复旦大学附属中山医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- ALDH2 Knockout Aggravates Pressure Overload Induced Cardiac Dysfunction and Hypertrophy by Inhibiting Myocardial Fatty Acid Utilization
- 范凡
- 长期慢性饮酒及乙醛脱氢酶2基因缺失对血脂的影响
- <正>目的长期以来对长期低剂量饮酒引起的高密度脂蛋白(HDL)升高的机制并不十分清楚,本实验拟通过乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因敲除鼠观察长期慢性酒精刺激及基因型对小鼠血脂的影响。方法6-8周健康C57BL与ALDH2基...
- 王聪范凡马鑫朱洪曹全孙爱军葛均波
- 关键词：血脂乙醛脱氢酶2基因缺失
- 文献传递
- 微量氯化钴法与普通SDS缓冲液裂解法提取缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白效率的比较
- 2013年
- 目的通过引入微量氯化钴作为稳定剂,建立一种更加简便有效提取HIF-1α蛋白的方法。方法取8只体重在22±2克之间雄性8周龄的C57BL/6小鼠,对其左侧下肢行股动脉段离断术制成下肢缺血模型,并分别以右侧下肢为对照;术后1天采用激光多普勒技术检测下肢血流灌注;术后3天取小鼠双侧股四头肌,分别用微量氯化钴法和普通SDS裂解液裂解法来提取总蛋白;用Western Blot对HIF-1α蛋白水平进行检测。结果 8只小鼠手术均成功;术后1天激光多普勒检测结果显示,小鼠缺血下肢血流灌注/健侧肢血流灌注为15.4±4.8%,下肢缺血手术成功;Western Blot显示,使用普通SDS裂解液法,缺血组HIF-1α条带较浅淡,而使用微量氯化钴法,可以清楚地观察到HIF-1α蛋白水平升高。结论微量氯化钴法能够有效稳定HIF-1α蛋白,其提取物用于后续蛋白水平实验显著优于普通的SDS裂解液法。
- 刘湘玮范书霞王聪范凡马鑫申程朱洪曹全王鹏邹云增葛均波孙爱军
- 关键词：下肢缺血
- 心力衰竭的代谢异常机制及防治策略
- 葛均波孙爱军张英梅任骏钱菊英周京敏金雪娟张磊崔晓通张书宁徐磊周俊范凡王聪
- 该项目属于心血管系统内科学领域(代码：3202040)。 心力衰竭是各种心血管疾病的共同归宿，5年死亡率高于50%。该项目基于队列研究及全国慢性心衰注册管理系统，挖掘到心衰代谢异常标志物，进而探寻代谢相关干预靶点，实现心...
- 关键词：
- MassARRAY定量分析法与普通亚硫酸盐测序法检测心肌梗死大鼠模型低甲基化基因序列的效果比较被引量：3
- 2015年
- 目的通过比较MassARRAY定量分析法与普通亚硫酸盐测序法(BSP)检测心肌梗死大鼠乙醛脱氢酶(ALDH2)基因启动子甲基化的效果,为确定适用于低甲基化基因序列检测的最佳方法提供依据。方法取10只平均体重为(200±10)g的雄性Sprague-Dawley大鼠,将其随机分入对照组和实验组,每组5只。实验组行心脏冠状动脉左前降支结扎术,制备心肌梗死模型。常规饲养7d后,取实验组大鼠心脏梗死边缘区心肌组织,同时在对照组的相同区域取材。提取边缘区心肌组织DNA,分别采用MassARRAY定量分析法和普通BSP检测两组大鼠ALDH2基因核心启动子上游同一段DNA序列甲基化情况。结果 BSP可检测显示目标区域12个CpG位点,但检测结果示对照组和实验组均无DNA甲基化发生;MassARRAY定量分析法可检测显示目标区域10个CpG位点(2号至11号位点),实验组和对照组10个CpG位点均有低度DNA甲基化(<30%),且两组间5号、6号和7号CpG位点甲基化水平的差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论对于低甲基化基因序列,MassARRAY定量分析法较BSP拥有更好的DNA甲基化检测精度和检测效率。
- 王鹏申程刘湘玮董震马鑫朱洪王聪范凡曹全邹云增胡凯任骏孙爱军葛均波
- miR34a通过调控乙醛脱氢酶2参与心肌细胞凋亡及心室重构被引量：6
- 2011年
- 背景和目的乙醛脱氢酶2(ALDH2)是一种内源性心肌保护因子,通过代谢4-HNE等毒性醛类在心肌梗死过程中起抗心肌细胞凋亡并改善心室重构作用。miRNA在很多生物的生理和病理过程中发挥重要作用,影响细胞凋亡、增殖,并与许多疾病相关。我们前期研究发现,ALDH2在心肌缺氧早期呈显著下降趋势。本研究拟从microRNA角度探讨ALDH2下降的机制,并探索内源性抑制ALDH2下降的作用靶点。方法利用实时定量PCR研究缺氧心肌细胞中miR34a及ALDH2 mRNA的表达情况,同时利用Western blot检测ALDH2蛋白表达,以观察miR34a与ALDH2在缺氧心肌细胞中变化趋势是否相关。在此基础上,利用microRNA特异模拟及抑制技术调控miR34a的表达,同时利用siRNA及高表达病毒转染技术调控ALDH2表达,观察miR34a与ALDH2的改变是否都能够改变心肌细胞缺氧后凋亡的反应情况。进一步利用miR34a特异模拟剂和抑制剂分别上调和下调microRNA的表达后,检测心肌细胞内ALDH2表达变化,以证实miR34a可以抑制ALDH2的翻译表达。进而,我们将采用荧光报告基因质粒技术,构建GFP后带有ALDH2 3’UTR的报告质粒,同时与miR34a模拟剂共转染至HEK293细胞后观察GFP荧光亮度,从而得到miR34a与ALDH2 3’UTR结合的直接证据。结果在心肌细胞缺氧早期(48 h以内),我们发现ALDH2蛋白水平于6 h开始下降而其mRNA水平于48 h才出现显著降低,表明ALDH2蛋白在缺氧早期的下降并不是由转录水平调控引起的,提示可能存在转录后水平调节。接下来我们对缺氧状态下miR34a变化趋势进行观察,发现miR-NA34a于2 h上升至对照组10倍左右,直至4 h仍保持在4倍左右水平(P<0.05),提示其可能参与心肌细胞缺氧的早期调节。ALDH2与miR34a之间是否存在联系?ALDH2的下降是否由miR34a引起?为证实以上猜想,我们利用miR34a模拟剂转染心肌细胞,上调其表达后Western blot检测发现ALDH2蛋白表达水平下降,同�
- 范凡孙爱军卜丽萍邹云增葛均波
- 关键词：心肌细胞凋亡ALDH2
- 解酒药对大鼠心肌急性缺血再灌注损伤的保护作用及其机制的初步研究
- 2013年
- 目的通过大鼠心肌缺血再灌注模型研究解酒药对缺血再灌注(IR)损伤的保护作用。方法雄性SD大鼠分为IR+生理盐水对照组、IR+解酒药组、IR+解酒药+cyanamide(乙醛脱氢酶2抑制剂,氨基氰,CH2N2)组。伊文思蓝和TTC染色评估心肌梗死面积,TUNEL法测定缺血再灌注区域心肌细胞凋亡情况,Western blot测定分析内质网应激相关蛋白Grp78和Chop含量变化以及凋亡相关蛋白Caspase12含量变化。结果解酒药减轻心肌梗死面积,而cyanamide的加入部分抵消了解酒药对心肌缺血再灌注的保护作用[IR+生理盐水对照组:(57.72±6.52)%;IR+解酒药组:(35.59±5.77)%;IR+解酒药+cyanamide组:(46.83±5.96)%;IR+生理盐水对照组vs.IR+解酒药组,P<0.01;IR+生理盐水对照组vs.IR+解酒药+cyanamide组,P<0.01;IR+解酒药组vs.IR+解酒药+cyanamide组,P<0.01]。Grp78、Chop、Caspase12蛋白水平于IR+生理盐水对照组、IR+解酒药组、IR+解酒药+cyanamide组中均无统计学差异(P>0.05)。结论在心肌缺血再灌注损伤早期,解酒药对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,且抑制ALDH2后此作用消失,但其机制可能不是通过调控ALDH2参与的内质网应激而实现的。
- 赵航天陈学颖范凡刘湘玮王聪申程马鑫朱洪孙爱军葛均波
- 关键词：再灌注损伤内质网解酒药乙醛脱氢酶2
- 超声生物显微镜在心血管疾病研究中的应用进展被引量：1
- 2011年
- 超声生物显微镜(ultrasound biomicroscopy,UBM)作为近年新兴的活体成像技术,已成功用于观察各种小动物模型及人类浅表组织。在心血管疾病研究领域,该技术显现出独特优势,如非侵入性、观察连续性、高分辨率、实时性、价格优势等,使充分利用模型动物进行实时连续心血管形态功能分析成为可能。本文对UBM的特点进行介绍,并就其在动脉粥样斑块、心肌梗死、心力衰竭、心肌病、瓣膜病、心脏发育和引导穿刺等方面的应用进行综述。
- 范凡卜丽萍
- 关键词：超声生物显微镜心血管疾病疾病模型小鼠
- 乙醛脱氢酶2基因多态性在上海市与山东省汉族人群中的分布差异被引量：10
- 2011年
- 目的：了解乙醛脱氢酶2（aldehyde dehydrogenase 2,ALDH2）基因多态性在上海市与山东省汉族人群中的分布。方法：随机采集无血缘相关的601例上海市和617例山东省健康汉族人群的静脉血,提取DNA后应用变性高效液相色谱（denatu-ringhigh-performance liquid chromatography,DHPLC）技术检测研究对象的ALDH2基因型,并进行相应等位基因频率的比较。结果：上海市汉族人群ALDH2＊1/ALDH2＊1、ALDH2＊1/ALDH2＊2和ALDH2＊2/ALDH2＊2,3种基因型分别为65.4%,29.8%,4.8%;ALDH2＊1和ALDH2＊2等位基因的频率分别为80.3%和19.7%。山东省汉族人群ALDH2＊1/ALDH2＊1、ALDH2＊1/ALDH2＊2和ALDH2＊2/ALDH2＊2,3种基因型分别为72.1%、26.3%、1.6%;ALDH2＊1和ALDH2＊2等位基因的频率分别为85.3%和14.7%。基因型和等位基因的频率两个人群比较,差异均有统计学意义（P〈0.001）。结论：上海市汉族人群ALDH2~＊2等位基因的频率高于山东省汉族人群。
- 弭守玲范凡李纪明付明强孙爱军葛均波
- 关键词：乙醛脱氢酶2变性高效液相色谱基因多态性等位基因
