蒋俶
- 作品数：16 被引量：14H指数：4
- 供职机构：上海市计划生育科学研究所更多>>
- 发文基金：上海市科委科技攻关项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 癌细胞表面表达人绒毛膜促性腺激素的免疫荧光检测
- 2005年
- 目的筛选可供体外和动物体内肿瘤抑制试验的候选癌细胞株。方法通过间接免疫荧光法,用兔抗人绒毛膜促性腺激素(hCG)多克隆免疫球蛋白(IgG)和小鼠抗hCG单克隆免疫球蛋白(IgG),对人结(直)肠癌细胞(HCT15、HCT116、KM12、WiDr、LoVo、LS-174)、前列腺癌细胞(PC3)、小细胞肺癌细胞(A549)的细胞表达hCG情况进行检测。结果被检的8个癌细胞株均对兔抗hCG多克隆免疫球蛋白(IgG)呈阳性反应。其中4株结(直)肠癌细胞(HCT115、HCT116、Lo-Vo、LS-174)和小细胞肺癌(A549)能被小鼠抗hCG单克隆免疫球蛋白染色。结论这5株能与小鼠抗hCG单克隆免疫球蛋白结合的细胞株都适用于以后的肿瘤杀伤试验。
- 茅幼霞蒋俶蒋文珏申庆祥
- 关键词：免疫荧光检测细胞表面表达单克隆免疫球蛋白抗HCG杀伤试验
- 人绒毛膜促性腺激素β链羧基端37肽多聚体及用途
- 本发明公开了一种人绒毛膜促性腺激素β链羧基端37肽(CTP)多聚体及其制法和用途。本发明的CTP多聚体可重组表达生产，成本低，安全性好，而且免疫抗原强于单聚体。
- 申庆祥王健沈卫英蒋俶喻光荣
- 文献传递
- hCGβ-CTP37多聚体的表达、纯化及其多克隆抗体的制备被引量：4
- 2005年
- 目的:研究重组hCGβCTP37(CTP)多聚体编码基因在大肠杆菌BL21中的表达及表达产物多克隆抗体的制备。方法:分别将3、4个CTP编码基因通过串联的方式连接起来组成多聚体编码基因,进而将多聚体基因亚克隆入载体pGEX4T2中获得含目的基因的表达质粒pGEX4T2(CTP)n(n=3,4)。表达质粒转入大肠杆菌BL21,目的蛋白在IPTG诱导下进行表达。表达产物经谷胱甘肽转硫酶(GST)亲和层析柱纯化、凝血酶酶解去除GST后,获得多肽CTP3和CTP4。将其用于免疫家兔以制备多克隆抗体,并用ELISA法检测抗体滴度。结果:菌株经IPTG诱导后产生了大量可溶性的融合蛋白GSTCTPn(n=3,4),SDSPAGE分析表明融合蛋白GSTCTP3和GSTCTP4的表观分子量分别为38.0kDa和42.2kDa,纯化后的融合蛋白的纯度达到了90%以上;纯化的融合蛋白经牛凝血酶酶解,利用制备型SDSPAGE纯化,回收获得的多肽CTP3和CTP4的纯度均大于80%;将多肽CTP3和CTP4多次免疫家兔后,ELISA检测结果证实产生了滴度较高的多克隆抗体。结论:CTP多聚体能刺激家兔产生特异性抗体,这提示CTP多聚体有可能作为避孕疫苗或肿瘤疫苗的免疫原。
- 喻光荣蒋俶冯文华沈卫英蒋文珏申庆祥
- hCGb-CTP多聚体-3C3d融合蛋白在巴氏毕赤酵母中的表达被引量：2
- 2006年
- 目的:在巴氏毕赤酵母细胞中表达hCGβ-(CTP)n(n=3,4)-3C3d融合蛋白。方法:将(CTP)n(n=3,4)基因与分子佐剂C3d基因的三聚体连接后,克隆入载体pPIC9K得到表达质粒pPIC9Khis6(CTP)n(n=3,4)3C3d,经限制性内切酶酶切鉴定及DNA测序确认后电转入酵母细胞中进行表达。结果:在酵母细胞内检测到目的基因的表达产物,Westernblot结果显示它们的分子量分别为125kD和138kD左右。结论:运用巴氏毕赤酵母表达系统成功表达了hCGβ-(CTP)n(n=3,4)-3C3d融合蛋白,为进一步研究其免疫原性和用作抗肿瘤疫苗奠定了基础。
- 冯文华石燕喻光荣沈卫英蒋俶申庆祥
- 关键词：C3D毕赤酵母
- 重组人卵泡刺激素在昆虫细胞中的表达
- 2004年
- 为了研究在昆虫细胞中表达重组人卵泡刺激素,我们以人胎盘组织提取的染色体DNA为模板,利用重叠PCR方法扩增出hFSHβ亚基的cDNA的编码区。将此cDNA克隆入核型多角体病毒(AcNPV)非融合蛋白基因表达载体pVL1393,我们得到了表达载体pVL1393-hFSHβ,然后与BaculoGold^(TM)线性杆状病毒DNA共转染昆虫细胞SF9,经多次扩增后获得高滴度的重组病毒AcNPV-hFSHβ。将此重组病毒感染昆虫细胞,我们得到了在胞浆中表达的hFSHβ亚基,Western blot显示分子量大约为21kDa。以重组病毒AcNPV-hFSHβ与AcNPV-hCGα一同感染昆虫细胞得到了具有分泌性的重组hFSH异二聚体,在非还原的条件下Western blot显示分子量大约为33kDa。
- 侯理理蒋俶沈卫英黄哲平申庆祥
- 关键词：昆虫细胞重组病毒糖蛋白
- 一种半定量精子密度检测试剂盒
- 本实用新型公开了一种半定量精子密度检测试剂盒，包括精液收集计量容器、细胞染色液、洗涤液、检测板和滴管，所述检测板包括外壳和基板，外壳中央有一个色卡孔和三个检测孔，基板上附着有过滤膜和标准色标，其中过滤膜位于基板上方，外壳...
- 施惠娟王健袁瑶陆明兰蒋俶
- 文献传递
- 受精蛋白β在人精子表面的免疫组织化学定位被引量：6
- 2001年
- 以人受精蛋白β整联蛋白配体区为抗原免疫小鼠并制备单抗,应用免疫组化方法研究了受精蛋白β在不同状态人精子表面的分布规律。结果表明受精蛋白β散在分布于新鲜人精子的头部,获能后则向顶体区集中,顶体反应过程中同时出现表达量及分布位置的急剧变化,最后定位于精子头后部。其分布规律与动物受精蛋白有所不同。受精蛋白β在人精子表面分布的位置及其变化揭示其在受精过程中的重要作用。
- 丁蓓蓓蒋俶蒋文珏王健高尔生左嘉客申庆祥
- 关键词：人精子获能免疫组织化学定位
- hCGβ-CTP37多聚体在巴斯德毕赤酵母中的表达及其表达产物的结构预测被引量：5
- 2005年
- hCGβ-CTP37(简称CTP)肽段是hCG分子的特有部分,存在hCG的特异表位。为了解CTP利用毕赤酵母进行表达的情况及探索其作为研制调节生育和抗肿瘤疫苗的可行性,本研究中我们将2、3、4个CTP以头尾串联的方式重组成多聚体基因,然后克隆入载体pPIC9K得到表达质粒pPIC9K-Cα-(CTP)_n(n=2,3,4),电转染入酵母细胞进行表达。在培养基上清中我们检测到了目的基因表达产物,Westernblot结果显示它们的分子量分别约为:20KDa、30KDa、40KDa,且能与抗hCG多克隆抗体结合。另外,我们还利用ANTHEPROT4.3蛋白序列分析软件包对表达产物CTP四聚体的结构进行了预测分析,结果表明CTP四聚体的抗原性明显强于hCGβ-CTP37单聚体,CTP四聚体与hCGβ二级结构较为相似,但CTP四聚体的抗原专一性要优于hCGβ。CTP多聚体在毕赤酵母系统中的成功表达及对表达产物抗原性的初步分析为今后利用CTP研制调节生育和抗肿瘤疫苗奠定了基础。
- 喻光荣孙学铮沈卫英侯理理冯文华蒋俶申庆祥
- 关键词：巴斯德毕赤酵母多聚体基因表达产物分析软件包四聚体酵母系统
- 水凝胶型睾丸透皮给药贴剂
- 本实用新型公开了一种水凝胶型睾丸透皮给药贴剂。包括一背衬层，所述的背衬层上附着有由活性药物、分子凝胶、水凝胶和促渗剂这些材料组分组成的通过贴附皮肤来给药的粘胶层，所述粘胶层上再附着有一用来防止粘胶层药物组分流失，并保护粘...
- 施惠娟汪济奎李元春田孝才蒋俶郭卫红袁瑶王鹏徐彦
- 文献传递
- 人绒毛膜促性腺激素β亚基(hCGβ)抗生育/抗癌疫苗的初步研究
- 人绒毛膜促性腺激素(hCG)是一种与妊娠有关的糖蛋白激素。抗hCG疫苗能有效地预防受孕,但不抑制排卵和干扰月经周期,因此在免疫避孕的研究中得到重点支持和发展。Talwar等从天然hCG解离得到β亚基,然后将其与绵羊促黄体...
- 申庆祥沈卫英蒋俶王健
- 文献传递
