蔡国斌
- 作品数：28 被引量：57H指数：6
- 供职机构：武汉大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金湖北省教育厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生历史地理文化科学更多>>
- 寄生性吸虫谷胱甘肽过氧化物酶生物信息学分析被引量：4
- 2010年
- 目的分析几种重要医学吸虫谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPx)基因及其编码蛋白的生物学信息,探讨吸虫GPx在生物系统发育中的进化地位。方法从网络数据库获取各类目标序列,用NCBI Blast、Clustal X、GeneDoc、PH YLIP和SECISearch等工具,以及比较基因组学方法进行信息学分析。结果获得来自6种不同吸虫共12个GPx基因,分析发现它们均属磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(PHGPx)家族,各成员之间具有较高的序列同源性(35%～87%)。除卫氏并殖吸虫一PHGPx基因外,其他基因开放阅读框内均含有"TGA"密码子,编码硒半胱氨酸,且其3’-端非翻译区均含有硒半胱氨酸插入序列(SECIS)。除华支睾吸虫一GPx基因组结构由5个外显子和4个内含子组成外,其他均由6个外显子和5个内含子组成。而且,吸虫的GPx基因"内含子?外显子"结构和脊椎动物的PHGPx基因相似,高度保守。结论医学吸虫和脊椎动物宿主的PHGPx基因可能来源于共同的祖先,提示寄生虫与宿主之间的相容性和协同进化的特征。
- 章莹蔡国斌何立蒋明森
- 关键词：谷胱甘肽过氧化物酶生物信息学协同进化
- 晚清新政与财政
- 蔡国斌
- 关键词：晚清新政财政
- 日本血吸虫酚氧化酶抗原诱导免疫对病鼠肝脏病理变化的影响
- 2004年
- 目的 观察日本血吸虫酚氧化酶天然蛋白抗原诱导免疫对病鼠肝脏的病理变化。方法 将 4 2 d活成虫置于含 0 .0 5 %戊巴比妥钠的 RPMI 16 4 0培养基中孵育 8h后洗净 ,匀浆 ,超声粉碎、低温高速离心 ,将含酚氧化酶的上清液进行聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,嗣后分别在两侧切取胶宽约 1cm进行酶染色 ,解剖刀准确切下相应的未染色的凝胶。冻干后碾成粉末 ,高速电动匀浆成浆糊状 ,冷浸过夜。高速离心得上清即为日本血吸虫酚氧化酶粗抗原。设立 3组进行免疫实验 :实验组、佐剂对照组和空白对照组。初次免疫后第 2、4周 ,各重复 1次加强免疫 ,最后 1次免疫 10 d后用新鲜逸出尾蚴 (4 0± 1)条 /鼠进行攻击感染。 4 2 d剖杀动物 ,观察日本血吸虫感染小鼠肝脏的病理变化。结果 与对照组相比 ,酚氧化酶免疫实验组小鼠肝脏表面较光滑 ,隐约可见少量灰白色小点 ,肝色泽略带灰色 ,质地较软 ;压片观察小鼠肝脏内虫卵集聚数量明显减少 ,且以未成熟虫卵为主。肝脏内伴少量肝细胞坏死 ,细胞浸润不明显 ,可见较多未成熟卵周围无肉芽肿反应。小鼠肝组织内虫卵肉芽肿的平均直径和面积比对照组小鼠肝组织内虫卵肉芽肿的平均直径和面积明显减小 ,两组间差异有非常显著性 (P<0 .0 1)。结论 日本血吸虫酚氧化酶蛋白具抗原性 。
- 章莹蔡国斌蒋明森何立杨孟祥
- 关键词：日本血吸虫酚氧化酶肝脏病理变化
- 经抑制成虫产卵建立日本血吸虫感染小鼠新模型及其免疫机制的研究
- 何立蒋明森蔡国斌赵琴平杨孟祥张培喜
- 该课题首次建立了无虫卵肉芽肿形成的日本血吸虫感染小鼠新模型，并对其抗攻击感染的抵抗力变化及其免疫机制进行了研究，此外，用该新模型血清筛选到一个编码日本血吸虫成虫ATP酶（ATPase）的新基因序列，初步实验表明该重组融合...
- 关键词：
- 关键词：日本血吸虫免疫
- 丙烯硫脲对日本血吸虫感染小鼠肝脏病变的影响被引量：12
- 2001年
- 目的 观察丙烯硫脲对日本血吸虫感染小鼠肝脏病变的影响。方法 小鼠感染日本血吸虫尾蚴 2 2d后 ,隔日一次按 30 0mg/kg腹腔注射酚酶抑制剂丙烯硫脲 ,至感染后 4 2d剖杀动物 ,观察日本血吸虫感染小鼠肝脏的病理变化。结果 与感染对照组相比 ,实验组小鼠肝脏表现为散在分布的炎性细胞浸润灶 ,中心未见虫卵 ,仅见一些颗粒状物质。其平均直径和面积均较感染对照组的典型虫卵肉芽肿显著减小 (P <0 .0 1)。结论 感染小鼠腹腔注射丙烯硫脲后肝脏内未见虫卵肉芽肿的形成。
- 何立蒋明森蔡国斌杨孟祥易新元曾宪芳
- 关键词：日本血吸虫肝脏病理变化
- 酚酶抑制剂对日本血吸虫感染小鼠抗再感染的影响被引量：9
- 2002年
- 目的 观察雌虫酚酶活性被抑制后 ,日本血吸虫成虫诱导感染小鼠的伴随免疫作用。方法 每只小鼠初次感染日本血吸虫尾蚴 (40± 1)条 ,4 2 d后攻击感染 (40± 1)条尾蚴 ,其间初次感染 2 1d开始 ,按 30 0 m g/ kg的剂量隔日 1次腹腔注射丙烯基硫脲 ,至攻击感染后 2 0 d剖杀小鼠。同时设立实验对照组 (未注射丙烯基硫脲组 ) ,初次感染对照组及攻击感染对照组。计算各组减虫率并进行统计学处理。结果 实验组和对照组减虫率分别为 86 .4 %和 36 .8%。经χ2 检验差异有非常显著意义 (χ2 =10 .7,P <0 .0 1)。两组检获虫体总数分别为 2 8.9± 10 .2和 34.8± 14 .2。经 t检验差异也有显著意义 (t=1.785 ,P <0 .0 5 )。结论 日本血吸虫酚酶活性被抑制后 ,虫卵卵壳形成被抑制 ,雌虫不能产出正常虫卵或虫卵不能发育成熟。依此建立的新模型提示 ,无可溶性虫卵抗原(SEA)存在 。
- 蔡国斌蒋明森何立赵琴平章莹易新元曾宪芳
- 关键词：日本血吸虫日本血吸虫病
- 日本血吸虫酚氧化酶天然蛋白分子特征的初步分析被引量：1
- 2004年
- 目的 初步分析日本血吸虫酚氧化酶 (phenol oxidase,PO)天然蛋白分子的分子量及其亚基组成。方法 将 4 2 d龄活成虫置于含 0 .0 5 %戊巴比妥钠的 RPMI16 4 0培养基中 2 3℃孵育 8h后 ,PBS(p H6 .8)洗净 ,分离雌、雄成虫 ,研磨呈匀浆 ,超声粉碎、低温高速离心 ,取上清 (含 PO)进行聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE) ,分别在两侧切取胶宽约 1cm进行酶染色 ,然后用解剖刀准确切下相应的未染色的凝胶。经真空冷冻干燥机冻干后碾成粉末 ,高速电动匀浆成浆糊状 ,冷浸过夜 ,高速离心得上清即为日本血吸虫酚氧化酶粗蛋白 ,进行 SDS- PAGE。利用 SDS- PAGE与 PAGE(点加 1孔预染 Mark蛋白 )的结果 ,对照分析酚氧化酶蛋白的可能分子量及其亚基组成。结果 PAGE:日本血吸虫雌虫、雄虫酚氧化酶蛋白均表现为迁移率相同的 1条主带 ,其对应分子量大约为 81k D。SDS-PAGE:酚氧化酶粗蛋白共出现 5条带 ,分别为 81、6 4、5 4、4 1k D和 2 7k D。结论 初步分析日本血吸虫雌、雄成虫酚氧化酶天然蛋白分子的分子量及其亚基组成基本相同 ,可能为单体酶 (分子量 81k D)或由 3个 2 7k D相同亚基构成的同聚体。
- 蔡国斌何立蒋明森章莹赵琴平杨孟祥
- 关键词：日本血吸虫酚氧化酶分子量
- 卫氏并殖吸虫和华支睾吸虫谷胱甘肽过氧化物酶的分子研究
- 蔡国斌
- 关键词：卫氏并殖吸虫华支睾吸虫抗氧化酶基因进化
- 日本血吸虫酚氧化酶的组化定位研究被引量：3
- 2004年
- 目的 观察酚氧化酶 (phenol oxidase,PO)在日本血吸虫成虫的组织学分布。方法 酚氧化酶组化方法 :将 4 2 d虫龄的日本血吸虫活成虫置含 2 5 mm ol/ L 邻苯二酚的磷酸盐缓冲液 (p H6 .8)中 ,37℃孵育 30 m in后 ,转移虫体至载玻片上 ,吸去虫体表面液体 ,将其中一部分虫体置Olym pus显微镜下观察酚氧化酶在虫体的组织学分布。荧光组织化学方法 :经上述过程处理后 ,在另一部分虫体上滴加 2滴含 0 .0 5 %戊巴比妥钠的 PBS溶液 ,然后置 L eica荧光显微镜下观察酚氧化酶在虫体的组织学分布。结果 酶组织化学方法显示 ,日本血吸虫酚氧化酶仅分布于雌虫卵黄腺及子宫内虫卵卵壳表面 ,呈现棕褐色显色反应 ;雌虫卵巢和雄虫均未发现酚氧化酶活性。然而 ,荧光组织化学方法显示 ,酚氧化酶除主要分布于雌虫卵黄腺及子宫内虫卵卵壳表面 ,呈现强荧光外 ,还少量分布于雄虫体壁表层 ,呈现弱荧光反应。结论 不仅日本血吸虫雌虫含有酚氧化酶活性 ,而且雄虫也含酚氧化酶活性 ,只不过其含量少、活性低。荧光组织化学方法能更灵敏地显示日本血吸虫酚氧化酶活性 ,更适用于日本血吸虫酚氧化酶的组织学定位。
- 蔡国斌何立蒋明森赵琴平章莹杨孟祥
- 关键词：日本血吸虫酚氧化酶酶组织化学
- 血吸虫感染新模型小鼠细胞因子的诱生实验被引量：3
- 2003年
- 目的 在已建立了一种血吸虫感染伴随免疫新模型的基础上 ,检测该模型小鼠脾细胞培养诱生白细胞介素 -2 (IL-2 )和白细胞介素 -5(IL-5)的水平 ,初步探讨该新模型抗再感染的细胞免疫机制。方法 小鼠感染日本血吸虫尾蚴 2 0 d后 ,按 3 0 0 mg/ (kg· d)腹腔注射酚酶抑制剂——丙烯基硫脲 ,同时设立未用药对照组和正常小鼠组 ,感染后第 42 d剖杀动物 ,分别用成虫抗原 (SWAP)、虫卵抗原 (SEA)及刀豆素 A(Con A)体外刺激脾细胞诱生细胞因子 ,并检测 IL -2和 IL -5的诱生水平。结果 新模型小鼠经 SWAP诱生 IL -2的水平高于未用药对照组和正常组小鼠 ;经 SEA诱生 IL-2的水平低于对照组小鼠 ,而与正常组小鼠无差异 ;经 Con A诱生 IL-2的水平与对照组小鼠和正常小鼠无差异。此外 ,新模型小鼠经 SWAP、SEA及 Con A 3种抗原刺激诱生 IL -5的水平均明显低于对照组和正常组小鼠。结论 伴随免疫新模型小鼠体内成虫诱导的细胞免疫似以 Th1细胞功能占优势 ,而
- 赵琴平何立蒋明森蔡国斌杨孟祥
- 关键词：血吸虫感染细胞因子白细胞介素-2白细胞介素-5IL-5
