赵琴平 作品数:39 被引量:191 H指数:7 供职机构: 武汉大学基础医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 湖北省自然科学基金 湖北省教育厅资助项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 兵器科学与技术 农业科学 更多>>
经抑制成虫产卵建立日本血吸虫感染小鼠新模型及其免疫机制的研究 何立 蒋明森 蔡国斌 赵琴平 杨孟祥 张培喜 该课题首次建立了无虫卵肉芽肿形成的日本血吸虫感染小鼠新模型,并对其抗攻击感染的抵抗力变化及其免疫机制进行了研究,此外,用该新模型血清筛选到一个编码日本血吸虫成虫ATP酶(ATPase)的新基因序列,初步实验表明该重组融合...关键词:关键词:日本血吸虫 免疫 酚酶抑制剂对日本血吸虫感染小鼠抗再感染的影响 被引量:9 2002年 目的 观察雌虫酚酶活性被抑制后 ,日本血吸虫成虫诱导感染小鼠的伴随免疫作用。方法 每只小鼠初次感染日本血吸虫尾蚴 (40± 1)条 ,4 2 d后攻击感染 (40± 1)条尾蚴 ,其间初次感染 2 1d开始 ,按 30 0 m g/ kg的剂量隔日 1次腹腔注射丙烯基硫脲 ,至攻击感染后 2 0 d剖杀小鼠。同时设立实验对照组 (未注射丙烯基硫脲组 ) ,初次感染对照组及攻击感染对照组。计算各组减虫率并进行统计学处理。结果 实验组和对照组减虫率分别为 86 .4 %和 36 .8%。经χ2 检验差异有非常显著意义 (χ2 =10 .7,P <0 .0 1)。两组检获虫体总数分别为 2 8.9± 10 .2和 34.8± 14 .2。经 t检验差异也有显著意义 (t=1.785 ,P <0 .0 5 )。结论 日本血吸虫酚酶活性被抑制后 ,虫卵卵壳形成被抑制 ,雌虫不能产出正常虫卵或虫卵不能发育成熟。依此建立的新模型提示 ,无可溶性虫卵抗原(SEA)存在 。 蔡国斌 蒋明森 何立 赵琴平 章莹 易新元 曾宪芳关键词:日本血吸虫 日本血吸虫病 日本血吸虫酚氧化酶天然蛋白分子特征的初步分析 被引量:1 2004年 目的 初步分析日本血吸虫酚氧化酶 (phenol oxidase,PO)天然蛋白分子的分子量及其亚基组成。方法 将 4 2 d龄活成虫置于含 0 .0 5 %戊巴比妥钠的 RPMI16 4 0培养基中 2 3℃孵育 8h后 ,PBS(p H6 .8)洗净 ,分离雌、雄成虫 ,研磨呈匀浆 ,超声粉碎、低温高速离心 ,取上清 (含 PO)进行聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE) ,分别在两侧切取胶宽约 1cm进行酶染色 ,然后用解剖刀准确切下相应的未染色的凝胶。经真空冷冻干燥机冻干后碾成粉末 ,高速电动匀浆成浆糊状 ,冷浸过夜 ,高速离心得上清即为日本血吸虫酚氧化酶粗蛋白 ,进行 SDS- PAGE。利用 SDS- PAGE与 PAGE(点加 1孔预染 Mark蛋白 )的结果 ,对照分析酚氧化酶蛋白的可能分子量及其亚基组成。结果 PAGE:日本血吸虫雌虫、雄虫酚氧化酶蛋白均表现为迁移率相同的 1条主带 ,其对应分子量大约为 81k D。SDS-PAGE:酚氧化酶粗蛋白共出现 5条带 ,分别为 81、6 4、5 4、4 1k D和 2 7k D。结论 初步分析日本血吸虫雌、雄成虫酚氧化酶天然蛋白分子的分子量及其亚基组成基本相同 ,可能为单体酶 (分子量 81k D)或由 3个 2 7k D相同亚基构成的同聚体。 蔡国斌 何立 蒋明森 章莹 赵琴平 杨孟祥关键词:日本血吸虫 酚氧化酶 分子量 华支睾吸虫免疫糖蛋白质组学研究 赵琴平关键词:华枝睾吸虫 肝吸虫 蛋白质 基因组 糖蛋白 软体动物模式识别受体研究进展 2015年 软体动物建立了复杂的固有免疫系统以对抗病原生物体的入侵。模式识别受体(Pattern recognition receptors,PRRs)是软体动物启动固有免疫应答的首要分子,其种类甚多,如Toll样受体、C型凝集素及半乳凝素、脂多糖葡聚糖结合蛋白、补体相关分子和肽聚糖识别蛋白等。PRRs具有多种生物学特性,在软体动物的固有免疫中发挥着重要作用。本文对软体动物PRRs的研究进展作一综述。 高倩 赵琴平 马晓雪 董惠芬关键词:软体动物 模式识别受体 固有免疫 凝集素 半乳凝素 肽聚糖识别蛋白 日本血吸虫酚氧化酶的组化定位研究 被引量:3 2004年 目的 观察酚氧化酶 (phenol oxidase,PO)在日本血吸虫成虫的组织学分布。方法 酚氧化酶组化方法 :将 4 2 d虫龄的日本血吸虫活成虫置含 2 5 mm ol/ L 邻苯二酚的磷酸盐缓冲液 (p H6 .8)中 ,37℃孵育 30 m in后 ,转移虫体至载玻片上 ,吸去虫体表面液体 ,将其中一部分虫体置Olym pus显微镜下观察酚氧化酶在虫体的组织学分布。荧光组织化学方法 :经上述过程处理后 ,在另一部分虫体上滴加 2滴含 0 .0 5 %戊巴比妥钠的 PBS溶液 ,然后置 L eica荧光显微镜下观察酚氧化酶在虫体的组织学分布。结果 酶组织化学方法显示 ,日本血吸虫酚氧化酶仅分布于雌虫卵黄腺及子宫内虫卵卵壳表面 ,呈现棕褐色显色反应 ;雌虫卵巢和雄虫均未发现酚氧化酶活性。然而 ,荧光组织化学方法显示 ,酚氧化酶除主要分布于雌虫卵黄腺及子宫内虫卵卵壳表面 ,呈现强荧光外 ,还少量分布于雄虫体壁表层 ,呈现弱荧光反应。结论 不仅日本血吸虫雌虫含有酚氧化酶活性 ,而且雄虫也含酚氧化酶活性 ,只不过其含量少、活性低。荧光组织化学方法能更灵敏地显示日本血吸虫酚氧化酶活性 ,更适用于日本血吸虫酚氧化酶的组织学定位。 蔡国斌 何立 蒋明森 赵琴平 章莹 杨孟祥关键词:日本血吸虫 酚氧化酶 酶组织化学 血吸虫虫卵形成的生理研究 2002年 赵琴平 何立 蒋明森关键词:血吸虫病 血吸虫虫卵 生理 相关基因 血吸虫感染新模型小鼠细胞因子的诱生实验 被引量:3 2003年 目的 在已建立了一种血吸虫感染伴随免疫新模型的基础上 ,检测该模型小鼠脾细胞培养诱生白细胞介素 -2 (IL-2 )和白细胞介素 -5(IL-5)的水平 ,初步探讨该新模型抗再感染的细胞免疫机制。方法 小鼠感染日本血吸虫尾蚴 2 0 d后 ,按 3 0 0 mg/ (kg· d)腹腔注射酚酶抑制剂——丙烯基硫脲 ,同时设立未用药对照组和正常小鼠组 ,感染后第 42 d剖杀动物 ,分别用成虫抗原 (SWAP)、虫卵抗原 (SEA)及刀豆素 A(Con A)体外刺激脾细胞诱生细胞因子 ,并检测 IL -2和 IL -5的诱生水平。结果 新模型小鼠经 SWAP诱生 IL -2的水平高于未用药对照组和正常组小鼠 ;经 SEA诱生 IL-2的水平低于对照组小鼠 ,而与正常组小鼠无差异 ;经 Con A诱生 IL-2的水平与对照组小鼠和正常小鼠无差异。此外 ,新模型小鼠经 SWAP、SEA及 Con A 3种抗原刺激诱生 IL -5的水平均明显低于对照组和正常组小鼠。结论 伴随免疫新模型小鼠体内成虫诱导的细胞免疫似以 Th1细胞功能占优势 ,而 赵琴平 何立 蒋明森 蔡国斌 杨孟祥关键词:血吸虫感染 细胞因子 白细胞介素-2 白细胞介素-5 IL-5 血吸虫感染新模型小鼠血清IgG与抗原的免疫印迹分析 <正> 给感染日本血吸虫小鼠腹腔注射丙烯基硫脲,可建立一种日本血吸虫感染伴随免疫新模型。由于该模型动物体内血吸虫产卵被抑制,从而避免了SEA诱生封闭抗体的干扰,可作为研究伴随免疫的动物新模型。本研究比较了新模型与常规感染... 何立 蒋明森 赵琴平 蔡国斌 杨孟祥 易新元 曾宪芳文献传递 湖北钉螺髓样分化因子88的鉴定及其在抗血吸虫感染固有免疫中的地位 被引量:3 2017年 目的克隆、鉴定湖北钉螺(Oncomelania hupensis)髓样分化因子88(MyD88)基因,并通过观察感染日本血吸虫前后钉螺各组织中MyD88 m RNA表达水平的变化,探讨其在抗血吸虫感染固有免疫中的地位。方法通过c DNA末端快速扩增技术(Rapid amplification of c DNA ends,RACE)获取湖北钉螺MyD88全长c DNA序列,预测其蛋白结构域,并进行多序列比对及保守区域分析,构建系统进化树。使用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,RT-q PCR)技术检测MyD88基因在血吸虫感染前后钉螺各组织中的表达变化。结果湖北钉螺MyD88全长c DNA开放阅读框(Open reading frame,ORF)1 406 bp,编码468个氨基酸,蛋白N端和C端分别存在死亡结构域和TIR(Toll/interlrukin-1 receptor,TIR)结构域。与其他软体类MyD88氨基酸序列比对,相似性为38%~52%;系统进化树提示钉螺MyD88和光滑双脐螺MyD88起源于共同的祖先基因。q PCR结果显示,检测的所有组织中均有MyD88 m RNA的表达,其中血淋巴细胞中表达最为丰富。感染日本血吸虫后,除钉螺头足外,MyD88 m RNA在肝脏、生殖腺、血淋巴细胞等组织中均有上调表达,以血淋巴细胞中上调表达最显著。结论湖北钉螺存在依赖MyD88的TLRs(Toll-like receptors,TLRs)信号通路,MyD88分子可能在钉螺对抗日本血吸虫感染的固有免疫中发挥重要作用。 高倩 李艳伟 黄文铃 赵琴平 董惠芬关键词:湖北钉螺 日本血吸虫 固有免疫 髓样分化因子88