蔡春
- 作品数：36 被引量：146H指数：8
- 供职机构：中南大学更多>>
- 发文基金：World Health Organization湖南省科技厅资助项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 日本血吸虫成虫体外传代培养细胞的生物学鉴定被引量：13
- 2006年
- 本研究结果显示:血吸虫成虫细胞在体外培养中呈半悬浮聚集生长状态,4代内的培养细胞及冻存复苏细胞存活率达90%,并在各代培养中均可见细胞分裂相;传5代细胞的染色体核型为8对16条。超微结构既观察到形态正常细胞,也可见形态异常细胞。表明1640-40特定培养基对血吸虫成虫中的部分细胞体外传代培养获得成功。
- 刘伟曾铁兵曾庆仁蔡春张祖萍龚燕飞蔡力汀张顺科徐锡萍
- 关键词：日本血吸虫细胞传代培养染色体核型
- 日本血吸虫Sj-Ts1基因的亚克隆表达与免疫保护效果测定被引量：1
- 2004年
- 在大肠杆菌中高效表达日本血吸虫 (Schistosomajaponicum ,Sj)Sj -Ts1融合蛋白并测定其免疫保护效果。将Sj-Ts1基因亚克隆至 pGEX - 5X - 3原核载体 ,转化入大肠杆菌ER2 5 6 6 ,并用IPTG对该重组菌进行诱导表达中。将此表达产物进行WesternBlot分析后免疫小鼠 ,免疫剂量为 10 0 μg/次 /鼠。并设蛋白佐剂对照和PBS对照。免疫三次后进行攻击感染 ,计数虫负荷及肝卵负荷。在IPTG诱导下 ,亚克隆至 pGEX - 5X - 3的Sj-Ts1基因在大肠杆菌内高效表达融合蛋白SjGST -Ts1,用此融合蛋白免疫小鼠 ,能诱导产生 2 4 16 %的减虫率和 4 8 74 %的减卵率。Sj-Ts1基因亚克隆至 pGEX -5X - 3载体后可在大肠杆菌中高效表达 ,表达产物可诱导小鼠产生一定程度的抗Sj保护性免疫力。
- 王林纤陈欲晓周东明蔡春陈利玉唐连飞罗永慧张顺科曾宪芳易新元
- 关键词：日本血吸虫亚克隆免疫保护效果
- 日本血吸虫Rho GTPase DNA疫苗及亚单位疫苗的构建和分析被引量：2
- 2003年
- 目的 构建日本血吸虫大陆株Sj -RhoGTPase -like真核及原核表达重组质粒 ,并进行鉴定分析。 方法 用PCR法将Sj -RhoGTPase -like基因从已剪切阳性克隆中扩增出来 ,亚克隆至pcDNA3.1和pGEX -5X -3中 ,分别经PCR、双酶切、测序、SDS -PAGE和Westernblot等方法鉴定。 结果 PCR和测序均证明Sj -RhoGTPase -like基因疫苗构建成功 ,重组蛋白经SDS -PAGE电泳可观察到与预期分子量相应的条带 ,转印后可被水牛感染血清识别。 结论 成功构建了Sj -RhoGTPase -like基因的两种重组载体 。
- 张冉易新元曾宪芳黄跃龙蔡春张顺科Larry Mc Reynolds
- 关键词：日本血吸虫亚单位疫苗克隆
- 模拟多肽表位诱导抗日本血吸虫免疫保护性的研究
- ＜正＞ 血吸虫病是一种严重危害人类健康的疾病。血吸虫病疫苗的研制成为当今血防工作的重点,但迄今仍未研制出有实用价值的兽用或人用血吸虫病疫苗。噬菌体随机肽库技术是近年来发展起来的一项新技术,是研究蛋白质分子之间的相互作用,...
- 曾宪芳易新元蔡春张冉陈欲晓曾宪忠田明礼
- 文献传递
- 日本血吸虫rGST-Sj32蛋白免疫小鼠感染前后细胞因子水平的变化被引量：6
- 2003年
- 目的 :为进一步探讨rGST Sj32保护性免疫机制。 方法 :用rGST Sj32加弗氏完全佐剂 (FCA)皮下免疫BALB/c小鼠。于免疫前 ,攻击感染前 (第 3次免疫后 2wk)以及攻击感染后10d、30d及 4 5d ,各剖杀免疫组与对照组小鼠 5只 ,取脾细胞培养 ,对体外培养的脾细胞诱生的细胞因子进行分析。结果 :用rSj32刺激体外培养的小鼠脾细胞时 ,第 3次免疫后2wk(即攻击感染前 )剖杀小鼠的脾细胞分泌IL 4、IL 5和IFN γ的水平与佐剂对照组相比较 ,均有不同程度的升高 ,分别为 ( 10 .2 1± 3.6 5 )ng/L (P >0 .0 5 )、( 19.89± 9.5 7)ng/L (P >0 .0 5 )、( 5 .0 9± 2 .5 1) μg/L (P <0 .0 1)。攻击感染后10d、30d及 4 5d ,对照组与免疫组IFN γ的水平未见升高 ;对照组IL 4和IL 5的水平随着感染时间的延长明显升高 ,免疫组升高不如对照组明显。结论 :rGST Sj32疫苗免疫BALB/c小鼠后 ,可诱导以Th1类细胞因子为主的免疫应答 ;
- 蔡春易新元王庆林周金春曾宪芳Larry McReynolds
- 关键词：日本血吸虫重组蛋白免疫细胞因子
- 日本血吸虫疫苗的研究进展
- 人畜共患的血吸虫病的危害是人所共知的。长期以来,人们一直在寻找能够控制与消灭血吸虫病的有效途径。血吸虫疫苗的研究,给血吸虫病防治带来了新的希望。我室,40多个新基因的发现,及对部分新基因的保护性研究,取得了大量的科学依据...
- 易新元曾宪芳蔡春
- 文献传递
- 日本血吸虫Rho GTPase DNA疫苗及重组蛋白疫苗免疫保护机制初探被引量：5
- 2004年
- 目的 初步探讨日本血吸虫中国大陆株pcDNA3 .1 SjRhoGTPaseDNA疫苗、重组蛋白疫苗以及联合疫苗免疫的保护机制。 方法 将 pcDNA3 .1 SjRhoGTPaseDNA疫苗、重组蛋白疫苗分别及联合疫苗免疫昆明鼠后 ,分不同时间采集血清 ,以ELISA法测定总抗体及IgG亚类。 结果 重组蛋白疫苗及联合疫苗诱导产生的抗体效价较高 ,DNA疫苗及联合疫苗诱导产生的抗体以IgG2a为主 ,重组蛋白疫苗诱导产生的抗体以IgG1为主。 结论 Sj RhoGTPase基因DNA疫苗及联合疫苗主要诱生Th1型细胞免疫应答 。
- 张冉易新元曾宪芳张顺科蔡春Larry McReynolds
- 关键词：GTPASEDNA疫苗重组蛋白疫苗联合免疫
- ELISA检测华支睾吸虫病患者血清特异性IgG_4的诊断价值被引量：7
- 2002年
- 目的 探讨用ELISA检测华支睾吸虫病患者血清中特异性IgG4 的诊断价值。 方法 用华支睾吸虫成虫可溶性抗原进行ELISA分别检测华支睾吸虫病患者 (76例 )血清中的特异性IgG和IgG4 抗体及日本血吸虫病、并殖吸虫病、囊尾蚴病患者 (分别为 63、3 5、41例 )和健康者 (65人 )血清中的交叉抗体。 结果 检测 76例华支睾吸虫病患者血清中IgG4 的检出率为 93 .42 % ,检测 65例健康者血清中的IgG4 均为阴性 ,分别与检测IgG结果比较差异均无显著性意义 (P均 >0 .0 5 ) ;与其它寄生虫病的交叉反应率 ,IgG4 显著低于IgG ;诊断效率及阳性、阴性预告值分别为 96.45 %、10 0 %和 92 .85 %。 结论 用ELISA检测华支睾吸虫病患者血清中特异性IgG4 具有较高的诊断应用价值。
- 张顺科曾宪芳易新元李忠杰蔡春田明礼张祖萍沈杰
- 关键词：华支睾吸虫病血清学诊断IGG4抗体检测
- 日本血吸虫新抗原基因的筛选、克隆、表达和免疫效果研究被引量：8
- 2005年
- 为了寻找日本血吸虫(Schistosomajaponicum,Sj) 新的疫苗候选基因并进行免疫效果研究,用Sj雌虫抗原免疫家兔制备血清,对Sj成虫cDNA文库进行免疫筛选,将获得的新基因(命名为Sj-F1,GenBank登录号为AY261995) 克隆入原核表达载体pTWIN1和真核表达载体pcDNA3,经PCR、限制性酶切筛选和鉴定阳性重组子. 将pTWIN1/Sj-F1质粒转化大肠杆菌ER2566,在低温和低IPTG浓度下诱导表达可溶性重组融合蛋白(rSj-F1/intein2),并经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blot)分析鉴定. 将pcDNA3/Sj-F1质粒转化大肠杆菌ER2502,大量制备DNA疫苗. 用重组融合蛋白和DNA疫苗免疫小鼠,末次免疫后2周用Sj尾蚴进行攻击感染. 感染后42天剖杀冲虫,计算减虫率和减卵率. 感染前采血用ELISA法检测抗体. 免疫保护效果测定显示:重组蛋白疫苗以FCA作佐剂经皮下免疫和以壳聚糖作佐剂经粘膜免疫分别获得了28.07%、24.69%的减虫率和48.30%、46.38%的减卵率;DNA疫苗(pcDNA3/Sj-F1)单独免疫获得了18.47%的减虫率和35.06%的减卵率;用DNA疫苗启动免疫后用重组蛋白疫苗经皮下加强免疫,减虫率和减卵率分别提高到了40.42%和56.17%;用DNA疫苗启动免疫后用重组蛋白疫苗经黏膜加强免疫,减虫率和减卵率增高更明显,分别提高到了42.38%和62.
- 陈利玉易新元曾宪芳蔡春L.McREYNOLDS
- 关键词：日本血吸虫免疫筛选雌虫免疫
- 日本血吸虫铁蛋白基因的筛选、克隆与表达被引量：21
- 1998年
- 采用Ｓｊ未成熟虫卵抗原超免疫兔血清（ＲＡＳｊＩＥＡ）对Ｓｊ成虫ｃＤＮＡ文库进行筛选，并对可能具有抗日本血吸虫生殖／卵胚发育潜能的抗原分子进行克隆、表达。常规法免疫筛选Ｓｊ成虫文库，获得单个阳性克隆，ＰＣＲ扩增后琼脂糖电泳测定基因大小，ＤＮＡ测序，基因库搜索，找出同源基因。共鉴定出６个不同的基因克隆。选择其中的铁蛋白（ＳｊＦｅｒ）基因亚克隆于ｐＧＭＣ载体。重组蛋白以ＧＭＣＳＦ（粒细胞巨噬细胞集落刺激因子）－ＳｊＦｅｒ融合蛋白的形式在细菌中高效表达。表达产物仅溶于８Ｍ尿素溶液中，分子量为４０ｋＤ。
- 易新元曾宪芳周金春蔡春舒新华
- 关键词：日本血吸虫铁蛋白基因克隆基因表达
