许海旭
- 作品数：12 被引量：18H指数：3
- 供职机构：扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 表达红色荧光蛋白重组基因VIId亚型鸭源NDV强毒株的拯救与鉴定
- 引言新城疫病毒(NDV)是一种有囊膜,含有单股、负链、不分节段基因组的RNA病毒,是目前严重危害世界养禽业的重要病原之一。自1997年以来我国多个省份均有水禽感染NDV发病死亡的报道,分子流行病学研究结果显示,感染并导致...
- 段志强许海旭赵佳福阮涌嵇辛勤胡顺林刘秀梵
- M蛋白G275A和P276A突变抑制新城疫病毒的出芽和毒力
- 前言新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)是一类重要的禽病病原,能够在全世界范围内引起养禽业的损失。M蛋白是六种编码蛋白中分子量最小但含量最丰富的蛋白。其分子量约为40kDa,编码364个氨...
- 许海旭段志强刘佳佳程欣朱杰刘晶晶胡顺林王晓泉刘秀梵
- 文献传递
- 2011—2013年7株鸽源新城疫病毒的生物学特性鉴定及遗传进化分析被引量：5
- 2016年
- 为了解目前鸽群中新城疫病毒（NDV）的流行情况，本研究对2011-2013年分离到的7株鸽源NDV进行了部分生物学特性的测定和遗传进化分析。结果显示，7株NDV的F蛋白裂解位点均为^122RRQKRF^117，呈典型强毒特征，但7株病毒的MDT值范围较大，从50～114h不等；ICPI从0．98～1．51不等。遗传进化分析结果表明，分离到的7株鸽源NDV分离株之间的同源性较高，且均属于VIb亚型，但与目前广泛使用的疫苗株Lasota的遗传距离较远，因此有必要研制针对鸽源VIb亚型NDV的新型疫苗。
- 赵振振朱杰许海旭胡顺林刘秀梵
- 关键词：NDF蛋白
- Ⅰ类新城疫病毒新的基因分型系统的建立
- 刘晶晶朱杰许海旭程昊王晓泉胡顺林刘秀梵
- 新城疫病毒基质蛋白与禽细胞核磷蛋白B23.1在HEK-293T细胞中的相互作用被引量：4
- 2013年
- 【目的】探讨新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)基质(matrix,M)蛋白和禽细胞核磷蛋白B23.1在HEK-293T细胞中的相互作用。【方法】分别参照GenBank中NDV JS/5/05/Go株全基因序列(JN631747)和禽细胞核磷蛋白B23.1基因序列(NM_205267),设计、合成扩增M基因和B23.1基因的引物,利用RT-PCR扩增出M基因和DF1细胞的B23.1基因,分别克隆至真核表达载体获得重组表达质粒pEGFP-M、pCMV-HA-M和pDsRed-B23.1;将pEGFP-M和pDsRed-B23.1共转染HEK-293T细胞,利用荧光显微镜观察M蛋白与B23.1蛋白的共定位;利用免疫共沉淀(Co-IP)技术进一步验证两种蛋白的相互作用。【结果】Western blot结果表明构建的重组质粒在转染的HEK-293T细胞中正确表达;荧光显微镜观察显示M蛋白与B23.1蛋白在核仁具有共定位特征;Co-IP进一步证实两者能发生相互作用。【结论】NDV M蛋白与禽细胞核磷蛋白B23.1存在相互作用,M蛋白可能通过与B23.1蛋白的相互作用进入核仁。
- 段志强陈坚何亮许海旭李群辉胡顺林刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒基质蛋白蛋白相互作用
- 2010-2012年华东地区活禽市场新城疫病毒流行病学研究
- 引言新城疫(ND)是由新城疫病毒(NDV)引起的一种急性、高度传染性的疫病,给世界养禽业造成巨大的经济损失。NDV分为classⅠ和classⅡ两大谱系,其中classⅠ基因组长度为15198nt。王伟伟,刘晓文等均研究...
- 朱杰许海旭刘晶晶胡顺林王晓泉刘秀梵
- 关键词：新城疫活禽市场CLASS
- 核磷蛋白B23与新城疫病毒M蛋白相互作用促进病毒的复制
- M蛋白是新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)编码的病毒蛋白中含量最为丰富且高度保守的一种非糖基化膜相关蛋白,在NDV整个感染周期中扮演着重要的角色.M蛋白在病毒感染早期大量聚集在细胞核和核...
- 段志强陈坚许海旭何亮刘慧谋胡顺林王晓泉刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒M蛋白相互作用
- M蛋白R36Q突变致弱鸽副粘病毒1型病毒毒力并减少病毒复制
- 鸽副粘病毒1 型(PPMV-1)是一种能够特异性的感染宿主鸽子的病原体，通常被认为是禽副粘病毒1 型(APMV-1)在鸽子上的适应性变种。有研究报道PPMV-1 的这种适应性变化与病毒基因及蛋白的变化有关[1]，但是到目...
- 许海旭宋庆庆刘佳佳程欣刘晶晶朱杰胡顺林刘秀梵
- 关键词：M蛋白
- 2011-2013年华东地区基因Ⅶd亚型新城疫病毒分子流行病学研究
- 新城疫(ND)是由新城疫病毒(NDV)引起的一种急性、高度传染性的疫病,给世界养禽业造成巨大的经济损失。吴双等研究发现,2005-2008年间华东地区基因VIId亚型NDV占主要流行优势,同时,HN基因E347K变异株分...
- 朱杰许海旭刘晶晶胡顺林王晓泉刘秀梵
- KPNB1和Ran蛋白共同介导新城疫病毒基质蛋白的入核转运被引量：9
- 2017年
- 【目的】鉴定与新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)基质蛋白(matrix protein,M)入核相关的细胞蛋白,以阐明NDV M蛋白细胞核定位的分子机制。【方法】从鸡胚成纤维细胞中分别克隆核转运受体蛋白KPNA1–KPNA6和KPNB1基因,将其构建到真核表达载体,并与表达NDV M蛋白的重组真核表达载体分别共转染HEK-293T细胞,通过免疫共沉淀方法鉴定与NDV M蛋白相互作用的核转运受体蛋白。另外,将M蛋白与Ran蛋白突变体或与M蛋白互作的核转运受体蛋白缺失体分别共表达,通过荧光共定位确定M蛋白入核转运相关的细胞蛋白。【结果】构建的重组真核表达载体在HEK-293T细胞中能够正确表达;通过间接免疫荧光观察发现,重组蛋白中除Myc-KPNA2蛋白定位在细胞质外,其它核转运受体蛋白均与M蛋白表现出相同的细胞核定位。免疫共沉淀试验结果表明,M蛋白与KPNA1蛋白和KPNB1蛋白均存在相互作用。进一步通过荧光共定位观察发现,M蛋白与KPNA1蛋白缺失体(DN-KPNA1)共表达不改变M蛋白的细胞核定位,而与KPNB1蛋白缺失体(DN-KPNB1)共表达后导致M蛋白变为细胞质定位,说明M蛋白入核转运需要KPNB1蛋白的参与。另外,将M蛋白与Ran蛋白突变体Ran-Q69L共表达,荧光观察发现M蛋白同样由细胞核定位变为细胞质定位,说明M蛋白入核转运还需要Ran蛋白的辅助。【结论】KPNB1和Ran蛋白共同介导NDV M蛋白的入核转运,其过程是KPNB1蛋白首先和M蛋白发生相互作用并形成复合物,然后通过Ran蛋白的辅助作用完成入核转运。
- 段志强嵇辛勤许厚强赵佳福许海旭胡顺林刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒基质蛋白
