目的观察近端肾小管上皮细胞对成骨细胞骨代谢相关基因表达的直接调节作用。方法体外分离培养大鼠近端肾小管上皮细胞与头盖骨成骨细胞;用甲状旁腺激素(PTH)、137Cs-γ射线及25(OH)D3预作用前者,再与后者分为4组共培养:①单培养组(成骨细胞单培养)、②共培养组(肾小管上皮细胞与成骨细胞共培养)、③刺激共培养组(肾小管上皮细胞经PTH+25(OH)D3处理,再与成骨细胞共培养)、④抑制共培养组(肾小管上皮细胞经137Cs-γ射线照射+25(OH)D3处理,再与成骨细胞共培养);并用RT-PCR方法检测共培养体系中成骨细胞的BGP、ALP、ColI、RANKL与OPG mRNA表达。结果共培养组成骨细胞的骨形成相关基因BGP、ALP、Col I mRNA表达较单培养组显著降低(P<0．001);刺激共培养组各基因表达较共培养组显著上升(P<0．05-P<0．001);抑制共培养组ALP表达水平较共培养组显著降低(P<0．001),BGP与Col I mRNA表达无显著变化。共培养组与单培养组比较,RANKL与OPC;mRNA表达显著降低(P<0．001),但RANKL／OPG比值显著高于后者(P<0．01);刺激共培养组与共培养组比较,OPG mRNA表达明显上调(P<0．01), RANKL mRNA表达变化无显著意义。RANKL／OPG比值显著降低(P<0．05);抑制共培养组与共培养组比较, OPG表达显著下降(P<0．01),RANKL/OPG比值则显著增高(P<0．01)。结论培养的近端肾小管上皮细胞对成骨细胞骨代谢相关基因表达具有直接的调节作用。建立的共培养体系可用于骨代谢相关药物筛选及作用机制研究。
