高建军
- 作品数：54 被引量：221H指数：9
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- 雌激素水平对大豆苷原(DAI)促成大鼠骨细胞分化作用的影响
- 2015年
- 目的 观察基础雌激素（estrogen）水平对大豆苷原（daizein,DAI）促成骨细胞分化作用的影响。方法采用酶消化法分离培养新生SD大鼠头盖骨成骨细胞,通过培养液中添加17β-雌二醇改变培养微环境（包括空白对照）雌激素水平,应用MTT法和对硝基苯磷酸盐（p-nitropheny-phosate,PNPP）法检测细胞增殖率和碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性,应用real-time PCR法检测其雌激素受体α（ERa）、雌激素受体β（ERβ）和过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisome proliferator-activated receptor,PPAR）γ的mRNA水平变化,研究雌激素基础水平变化对DAI促成骨细胞分化作用的影响。结果 培养环境中雌二醇水平升高致DAI的促分化作用减弱。其中100nmol/L DAI组ALP比活性较对照组的增幅由雌激素补充前的23%分别降至8%（17β-雌二醇为100pmol/L）和-11%（17β-雌二醇为1 000pmol/L）,显示基础雌激素水平对DAI促分化的拮抗作用。为避免培养液中血清雌激素的可能影响,进一步采用去激素血清培养（含2%去激素胎牛血清）。此时补充17β-雌二醇至100pmol/L,DAI各剂量组细胞ALP比活性较对照组明显增加（16%~21%,P〈0.05）。继续补充雌激素至1 000和10 000pmol/L时,其作用反而减弱。该结果显示,DAI促成骨细胞分化作用与雌激素基础水平有关,低雌激素状态（≤100pmol/L）可增强其作用。为进一步探索其作用机制,我们初步观察了雌激素（100pmol/L）和DAI（100nmol/L）单独或联合作用下成骨细胞ERa、ERβ和PPARγ受体表达变化。结果显示,100pmol/L 17β-雌二醇明显上调ERβ表达,并部分抵抗DAI下调ERβ的作用。结论 DAI的促成骨分化作用与基础雌激素水平有关,低雌激素（≤100pmol/L）状态有利于DAI的促分化作用,而雌激素水平升高可减弱其促分化作用。
- 丁巧灵王金凤徐小雅周轶金慰芳王洪复高建军
- 关键词：雌激素
- 大鼠破骨细胞数量和功能的增龄性变化被引量：4
- 2004年
- 目的 探讨大鼠破骨细胞生物学功能的增龄变化规律。 方法 SD大鼠以月龄划分为 7组 :<2 4h及 1、3、7、12、16和 18月龄组 ,由大鼠腰椎椎体分离破骨细胞体外培养 ,采用抗酒石酸酸性磷酸酶染色、吸收陷窝定量分析技术和RT PCR等手段 ,比较各组大鼠破骨细胞的数量、骨吸收功能和功能酶转录水平的变化。 结果 多核破骨细胞数量呈双峰样改变 ,峰值分别为 3月龄的113～ 132个 /孔和 16月龄的 10 6～ 14 7个 /孔 ;细胞丰度于 3月龄后开始减低 ,16月龄有小幅反弹 ,由12月龄的 8%～ 9%升高至 12 %～ 35 % ;融合指数与月龄呈正相关 (r =0 73～ 0 85 ,P <0 0 5 ) ;吸收陷窝面积 3月龄后持续缩小 ;组织蛋白酶K、质子泵 116亚基mRNA水平由 3月龄峰值缓慢下调 ,基质金属蛋白酶 9转录水平维持恒定。 结论 破骨细胞数量和功能随增龄呈现阶段性特征 ,骨吸收存在 3、16月龄的 2次活跃 ,第 2次激活的特点和机制有待进一步研究。
- 高建军顾淑珠周轶金慰芳王洪复
- 关键词：破骨细胞细胞生物学骨质疏松细胞培养
- 氟中毒对体外培养破骨细胞数量及骨吸收功能的影响被引量：4
- 2011年
- 目的 观察氟中毒对体外培养破骨细胞数量及骨吸收功能的影响,探讨其作用机制.方法 机械分离法作用于新生SD大鼠四肢长骨,于TC199培养液（含10%胎牛血清）中获得破骨细胞和骨髓基质细胞.将破骨细胞接种于96孔培养板和象牙片培养,而骨髓基质细胞接种于6孔培养板培养,分别于2 h后换液并染氟（氟化钠）,对照组、低氟组、中氟组、高氟组染氟剂量分别为0、2.5×10-5、5.0×10-5、10.0×10-5mol/L.培养2、5d后对培养板中破骨细胞进行抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色,光镜下计数破骨细胞数量;培养5 d后象牙片经1%甲苯胺蓝染色,光镜下分析破骨细胞骨吸收陷窝面积.骨髓基质细胞染氟作用8 h后提取总RNA,实时荧光定量PCR法检测细胞核因子κβ受体活化因子配体（RANKL）和骨保护素（0PG）mRNA表达水平.结果 ①体外培养2 d时,对照组、低氟组、中氟组、高氟组破骨细胞数量分别为（337.5 4-70.5）、（447.5 ±43.4）、（472.9±34.8）、（475.3±24-3）个/孔,各染氟组明显高于对照组（P均〈0.05）;体外培养5 d时,对照组、低氟组、中氟组、高氟组破骨细胞数量分别为（92.5±22.1）、（123.0±26.4）、（135.5 ±22.2）、（136.9 ±23.0）个/孔,各染氟组明显高于对照组（P均〈0.05）.②体外培养5 d时,对照组、低氟组、中氟组、高氟组破骨细胞骨吸收陷窝面积分别为（0.088±0.030）、（0.100 ±0.018）、（0.152±0.015）、（0.242±0.031）mm2/片,中氟组和高氟组明显高于对照组（P均〈0.05）.③对照组、低氟组、中氟组、高氟组骨髓基质细胞RANKL/OPG mRNA表达比值分别为100.00±56.02、144.95±97.21、223.25 ±184.48、193.98 ±137.93,中氟组和高氟组明显高于对照组（P均〈0.05）.结论 氟中毒可引起体外培养破骨细胞数量增多,促进其细胞分化及骨吸收活性,该作用可能与其上调 RANKL/OPC,mRNA表达比值有关.
- 杜光喻茂娟徐小雅金慰芳高建军
- 关键词：氟化物中毒细胞培养技术骨保护素
- γ射线对体外培养骨细胞的作用观察被引量：8
- 2002年
- 采用137Csγ射线 (剂量率为 1Gy/min)单次照射的方法 ,研究了电离辐射对体外培养成骨细胞形态、增殖能力、ALP活性、矿化能力和骨钙素mRNA水平以及破骨细胞形态和凋亡率的影响。结果表明 ,低剂量电离辐射可影响成骨细胞功能 ,促进破骨细胞凋亡发生 ,表现为成骨细胞增殖率、ALP活性和骨钙素mRNA水平不同程度下降和矿化结节形成能力的双相变化 (0 .5— 1Gy的促进作用和 6Gy的抑制作用 ) ;
- 高建军高林峰金慰芳王洪复魏道林李凌波高艳虹周轶
- 关键词：破骨细胞Γ射线骨损伤体外培养脆性骨折
- 氟对大鼠成骨细胞胰岛素样生长因子－1和其受体表达的影响被引量：3
- 2013年
- 目的探讨氟对大鼠成骨细胞胰岛素样生长因子-1（IGF-1）和受体mRNA、蛋白表达的影响。方法应用酶消化法分离SD大鼠成骨细胞，取第2代成骨细胞，加入不同浓度[0（对照）、10-7、10-6、10-5、10-4、10-3mol／L]的氟（FL），在培养24、48h时采用免疫放射法检测成骨细胞培养液中IGF-1含量：荧光定量PCR法检测成骨细胞IGF-1受体mRNA表达；Westernblot法检测成骨细胞IGF-1受体蛋白表达。结果①随染氟剂量增加，培养24、48h的成骨细胞培养液中IGF-1含量有先升后降的趋势，24h时10μmol／L组IGF-1含量[（65．45±4．84）ng／L]最高，与对照组[（38．83±3．48）ng／L]比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；48h时10-5mol／L组IGF-1含量[（59．14±1．53）ng／L]最高，与对照组[（33．79±1．84）ng／L]比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。②24、48h10-5mol／L组成骨细胞IGF-1受体mRNA表达（0．0055±0．0004、0．0262．±0：0040）明显高于相应对照组（0．0022士0．0001、0．0073±0．0008，P均〈0．05）。③随染氟剂量增加，培养24、48h的成骨细胞IGF-1受体蛋白表达有先升后降的趋势，其中24h10-5 mol／L组（1．39±0．16）与对照组（0．86±0．12）比较，差异有统计学意义（P〈0．05），48h各染氟组与对照组比较，差异无统计学意义（P均〉0．05）。结论氟可影响大鼠成骨细胞IGF—l和受体mRNA、蛋白表达，提示IGFs信号传导通路系统对氟调控骨代谢有重要作用。
- 喻茂娟王丽华秦祥慧金慰芳高建军
- 关键词：氟成骨细胞胰岛素样生长因子-1
- 卵巢照射及卵巢切除对大鼠骨组织COLI与TGF-β_1 mRNA表达的影响被引量：1
- 2003年
- 探讨卵巢辐射损伤与卵巢切除对大鼠骨组织转移生长因子β1(TGF-β1)与主要的基质蛋白I型胶原(COLI)基因表达的影响。50Gγ剂量γ射线局部照射大鼠卵巢和双侧卵巢切除后应用逆转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)法检测大鼠骨组织中TGF-β1与COLI的mRNA表达水平。结果表明,骨组织COLI的mRNA表达水平上升,而TGF-β1mRNA表达减少,卵巢辐射损伤大鼠与卵巢切除大鼠两者结果相似。
- 高艳虹高建军金慰芳王洪复
- 关键词：卵巢切除大鼠骨组织聚合酶链式反应
- 破骨细胞骨吸收功能检测与其在骨质疏松症防治药物药效研究中应用
- 为检测体外培养破骨细胞(OC)骨吸收功能,应用改良的Fenton<'[1,2]>等人的方法,接种大鼠OC于骨片上培养,不同时间取骨片超声去除细胞后甲苯胺蓝染色,光学显微镜下可见骨吸收陷窝呈多种形态蓝紫色异染,并根据骨片上...
- 高建军
- 关键词：破骨细胞益钙宁双磷酸盐
- CBP-P300抑制剂在肠道损伤疾病中的应用
- 本发明公开了CBP‑P300抑制剂在预防和/或治疗放射引起的肠道疾病中的应用，其应用包括CBP‑P300抑制剂在制备预防和/或治疗肠道损伤疾病的药物的用途，还公开了一种用于预防和/或治疗放射引起的肠道损伤的药物和一种用于...
- 华国强饶欣欣高建军徐小雅周轶
- SIRT1抑制剂用于预防和治疗放射引起的口腔损伤
- 本发明属于生物医药技术领域，具体而言，涉及SIRT1抑制剂在预防和治疗放射引起的口腔损伤中的应用。本发明提供了SIRT1抑制剂在制备药物中的用途，所述药物用于预防或治疗放射引起的口腔损伤。并由此提供了用于预防或治疗放射引...
- 华国强郭强徐小雅高建军周轶
- 文献传递
- rhPTH_(1-34)治疗糖皮质激素诱发大鼠骨质疏松症的实验研究被引量：7
- 2004年
- 目的 观察重组人甲状旁腺激素(1-34)[recombinant human parathyroid hormone(1-34),rh-PTH(1-34)]对糖皮质激素引起的大鼠继发性骨质疏松症(OP)的治疗作用。方法 应用肌肉注射地塞米松(dexamethasone.DEX)方法,建立模拟糖皮质激素引起的继发性OP大鼠模型。给予皮下注射5、10、20和40μg·kg-1·d-1rhVTH(1-34)治疗8周。观察骨量、骨生物力学、骨形态计量及骨代谢相关血尿生化指标,综合评价PTH对糖皮质激素诱发OP的治疗效果。结果显示肌注地塞米松大鼠的骨量、骨生物力学较对照组显著性下降,表明诱导大鼠骨质疏松模型成立。不同剂量咖治疗均能显著增加模型大鼠的腰椎与股骨骨密度、股骨干重与灰重,提高股骨三点弯曲最大载荷、提高腰椎骨小梁面积百分比及矿化沉积率(P<0.05-0.001),并呈一定剂量效应关系。血钙、磷无明显变化。结论外源性PTH对糖皮质激素诱发的大鼠OP具有显著治疗作用。
- 金慰芳王洪复顾淑珠周轶高建军徐培康徐爱红王漪周永春
- 关键词：PTH骨生物力学骨质疏松症
