迟妍妍
- 作品数:8 被引量:117H指数:4
- 供职机构:中国水产科学研究院珠江水产研究所更多>>
- 发文基金:广东省海洋渔业科技推广专项项目国家现代农业产业技术体系建设项目广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 罗非鱼无乳链球菌Sip基因的克隆、表达及免疫原性分析被引量:26
- 2012年
- 表面免疫原性蛋白(Surface Immunogenic Protein,Sip)是B群链球菌(Group B Streptococcus,GBS)的一种表面蛋白,在GBS多种血清型的菌株中均有表达。研究从实验室分离到的罗非鱼无乳链球菌广东株的基因组DNA中扩增出Sip基因,构建原核表达载体pColdII-Sip,转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)菌株。经诱导表达、SDS-PAGE电泳检测显示重组蛋白主要以可溶形式表达。重组蛋白用亲和层析的方法纯化,蛋白纯度达98%。纯化后的重组蛋白免疫罗非鱼(Oreochromis niloticus,GIFT strain)以分析其免疫原性。受免鱼免疫14d后进行人工攻毒试验,免疫组的相对保护率为70%—87%。酶联免疫吸附试验(Elisa)显示受免鱼对重组蛋白产生了较好的免疫应答,免疫剂量为3μg/g和5μg/g时受免鱼血清抗体滴度可达1:128000。研究结果显示重组蛋白Sip具有较强的免疫原性和保护作用,Sip基因可作为罗非鱼链球菌基因工程亚单位疫苗候选基因。
- 黎炯叶星可小丽卢迈新迟妍妍田园园
- 关键词:罗非鱼无乳链球菌原核表达免疫原性
- 一种草鱼呼肠孤病毒株的S7基因、编码的重组蛋白及其获取方法和应用
- 本发明公开了一种草鱼呼肠孤病毒株的S7基因、编码的重组蛋白及其获取方法和应用。本发明草鱼呼肠孤病毒株的S7基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,该核苷酸序列编码的重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。...
- 叶星田园园迟妍妍邓国成江小燕白岳强白俊杰
- 一种草鱼呼肠孤病毒株的S7基因、编码的重组蛋白及其获取方法和应用
- 本发明公开了一种草鱼呼肠孤病毒株的S7基因、编码的重组蛋白及其获取方法和应用。本发明草鱼呼肠孤病毒株的S7基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,该核苷酸序列编码的重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。...
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- 文献传递
- 南方养殖草鱼呼肠孤病毒分子特性的分析及VP4重组蛋白免疫效果初步研究
- 草鱼(Ctenopharyngodonidellus)是我国淡水养殖的重要品种,其产量约占淡水养殖总产量的20%,在我国农业经济中具有重要的意义。但是其养殖期间易发生出血病,导致高死亡率,常造成草鱼养殖业的巨大损失。本实...
- 迟妍妍
- 关键词:草鱼呼肠孤病毒免疫效果分子特性
- 南方养殖草鱼呼肠孤病毒的分子特性比较及双重PCR检测方法的建立被引量:18
- 2011年
- 本实验室2009年从广东省患典型出血病的养殖草鱼中分离到一株具强致病性的水生呼肠孤病毒GCRV-GD108株,该毒株具有11个节段双链RNA。全基因组序列分析显示与草鱼呼肠孤病毒GCRV及水生呼肠孤病毒属其它已知种存在较大的分子差异。本研究进一步检测了广东、福建、湖南等地草鱼出血病流行毒株的分子特性。根据已克隆到的GCRV-GD108株11个节段序列分别设计合成特异引物,从各地收集患出血病草鱼,提取组织总RNA,RT-PCR检测。结果表明各检测样品均可扩增到特异性条带,而GCRV标准株则无特异条带;同时根据GCRV标准株序列合成的特异引物进行扩增,GCRV标准株有特异性条带,而各检测样品则均无带。测序结果显示各样品间相应片段序列的同源性很高(95.2%~99.4%),与GCRV-GD108的相应序列也具高同源性(95.0%~99.8%),说明检测样品与GCRV-GD108株具有相似的分子特性,均与GCRV及水生呼肠孤病毒属的其它种存在较大差异。本研究结果提示我国养殖草鱼出血病病毒存在着不同的分子类型,GCRV-GD108株在南方具有一定的代表性,在病害防控上尤其是疫苗研制与使用上应予关注。此外,从上述引物中筛选出适合于双重PCR的引物对,建立了双重PCR检测方法,可在一次PCR反应中鉴别所感染的病毒属于GCRV或GCRV-GD108株。
- 迟妍妍田园园叶星邓国成黎炯王杭军
- 关键词:草鱼呼肠孤病毒组织特异性双重PCR
- 嗜水气单胞菌外膜蛋白W基因的表达及其免疫原性分析被引量:22
- 2011年
- 从患暴发性败血病的草鱼病灶处分离鉴定了嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)Wp3菌株。以其基因组DNA为模板扩增外膜蛋白W基因(OmpW),该基因全长为865 bp,开放式阅读框(ORF)为615 bp,与标准株ATCC7966的OmpW基因的同源性为99.8%。根据ORF序列设计引物扩增OmpW成熟肽编码序列并将其插入到表达载体pQE30中,转化大肠杆菌,经诱导可表达分子量为24.7 kD的带His标签的融合外膜蛋白His-W。用此融合蛋白免疫草鱼,所得草鱼血清经ELISA分析显示呈现阳性反应,说明重组蛋白能诱导产生抗体。采用实时荧光定量PCR分析草鱼头肾组织IgM基因表达水平的变化,结果显示免疫组IgM的表达量均明显高于空白组,其中低浓度免疫组(2μg/g)与空白对照组的差异显著(P<0.05),说明融合蛋白可使草鱼产生良好的免疫应答并上调抗体基因表达、产生高效抗体。保护性实验显示,不同免疫剂量均可使免疫组获得较高保护率(57%?86%)。结果显示,重组嗜水气单胞菌外膜蛋白W可作为草鱼嗜水气单胞菌基因工程亚单位疫苗。
- 刘明智叶星田园园马冬梅张莉莉迟妍妍邓国成
- 关键词:基因工程表达免疫原性IGM保护率
- 罗非鱼维氏气单胞菌的分离鉴定和药敏试验被引量:52
- 2011年
- 从患病罗非鱼(Oreochromis niloticus)鱼苗的病灶处分离到1株细菌GDZ1,人工感染试验显示,该分离株具有较强毒力。经ATB 32E细菌鉴定系统鉴定、补充生化鉴定和16SrRNA基因序列分析,确定该病原菌为维氏气单胞菌(Aeromonas veronii);药敏实验结果显示,29种药物中,米诺环素等15种化学试剂对该病原菌具有较强的抑菌作用。
- 黎炯叶星卢迈新邓国成迟妍妍黄樟翰
- 关键词:罗非鱼维氏气单胞菌药物敏感性
- 草鱼出血病新病原株确证及综合防控技术研究与示范
- 叶星彭华林邓国成田园园张志江小燕迟妍妍劳海华张莉莉曾庆雄白岳强黄志斌吴淑勤方伟于凌云
- 该项目属“农、林、牧、渔业”科学技术领域。主要内容:草鱼是中国重要养殖品种,养殖过程病毒性出血病的发病率与死亡率极高,养殖成活率仅30%左右。病毒性出血病一直都是制约草鱼养殖健康发展的最主要因素;尚无有效防治药物。针对该...
- 关键词:
- 关键词:草鱼出血病