目的:探讨胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R)过表达对慢性阻塞性肺病(COPD)患者气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖及迁移的影响。方法 :分离培养来自15例COPD患者(观察组)和6例无COPD病史肺部良性肿瘤患者(对照组)的ASMCs。利用Pc DNA3.1(空载体组)和Pc DNA3.1-GLP-1R(过表达组)质粒转染ASMCs,同时设置空白对照组。分别采用q PCR和western blotting法检测GLP-1R表达水平,MTT法和Transwell实验检测ASMCs增殖和迁移能力,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-8水平。结果:观察组GLP-1R m RNA和蛋白表达水平明显低于对照组(P<0.05),过表达组GLP-1R m RNA及蛋白表达水平明显高于空载体组及空白对照组(P<0.05)。过表达组ASMCs增殖和迁移能力明显低于空载体组、空白对照组(P<0.05),GM-CSF、TNF-α、IL-6、IL-8水平明显亦低于空载体组和空白对照组(P<0.05)。空载体组与空白对照组上述各指标比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:GLP-1R过表达可明显抑制COPD气道平滑肌细胞增殖、迁移,抑制促炎因子释放。
目的观察呼吸机机械通气对黏蛋白(MUC5AC)表达的影响,并对其机制进行初步探讨。方法日本大耳兔随机分为对照组、机械通气1、3、6、12和24 h组以及2、5和10 cm H2O呼气末正压(PEEP)组。取支气管肺泡灌洗液(BALF),用ELISA和RT-PCR法检测BALF中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-8、MUC5AC蛋白和mRNA的水平,计数BALF中多型核粒细胞,底物检测法测定中性粒细胞弹力酶(NE)活性。结果机械通气能显著增强MUC5AC的分泌(P<0.05)。通气3 h TNF-α表达至峰值,随后逐渐下降(P<0.05)。通气6 h IL-8表达至峰值,随后逐渐下降(P<0.05)。通气12 h后多型核粒细胞数及中性粒细胞弹力酶活性显著升高,24 h后回降(P<0.05)。随着PEEP的增加,TNF-α、IL-8、MUC5AC mRNA的表达和蛋白含量、多型核粒细胞数和NE活性均随之升高(P<0.05)。结论机械通气能促进气道黏膜上皮细胞分泌MUC5AC,其机制可能与机械通气引发炎性反应有关。
