陶春爱
- 作品数：10 被引量：20H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家公益性行业科研专项国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 纳米金标记核酸探针检测小反刍兽疫病毒核酸的研究
- 试验旨在探讨利用纳米金标记寡核苷酸探针快速检测小反刍兽疫病毒核酸的方法。针对小反刍兽疫病毒N基因的高度保守区设计两条特异寡核苷酸探针，一条探针5`端修饰生物素，另一条探针3`端修饰巯基。巯基化的探针通过Au-S键连接到纳...
- 陶春爱邱文英李刚田康乐
- 关键词：小反刍兽疫病毒核酸探针银染
- 文献传递
- 纳米金技术检测PPRV核酸的新方法研究
- 纳米金（Gold nanoparticles，AuNP）是一种直径在1~100nm的金颗粒，在分子生物学领域得到广泛应用，显示了其作为新兴材料的优越性。本研究为了探讨纳米金技术用于小反刍兽疫病毒（Peste des pe...
- 陶春爱
- 关键词：纳米金磁珠辣根过氧化物酶银染小反刍兽疫病毒
- 文献传递
- GnRH在广西摩拉杂交水牛乳腺中的免疫组化定位及其受体基因表达的研究
- 2012年
- 采用免疫组化及RT-PCR技术检测广西摩拉杂交水牛乳腺组织中的促性腺激素释放激素(GnRH)及其受体。结果表明,15份正常乳腺组织中有13份呈GnRH免疫阳性反应,免疫阳性产物主要集中在腺泡细胞的胞质和胞膜,胞核无特异性染色;同时扩增的目的条带大小为1 008 bp,与促性腺激素释放激素受体(GnRHR)基因片段大小一致。
- 王秋华陶春爱李瑞明谢莹雪秦津凌泽继宋小白
- 关键词：乳腺
- 小反刍兽疫病毒M基因截短表达及鉴定
- 2012年
- 目的将小反刍兽疫病毒M蛋白基因截短表达后用于特异性单抗制备及临床抗体水平检测。方法:用在线分析软件BepiPred分析小反刍兽疫病毒M蛋白潜在的B细胞线性表位,以本实验室构建的pCR2.1T-PPRV M质粒为模板,扩增三段截短的M基因,纯化后的PCR产物分别与克隆载体pCR2.1T连接,筛选出的阳性重组质粒经双酶切后,分别与表达载体pET-32a(+)及pGEX-6p-1连接,再将鉴定为阳性的重组质粒转化入E.coli BL21(DE3)菌株诱导表达,并用SDS-PAGE及Western blot验证。结果 PCR产物电泳,得到与预期大小相符的特异性片段。对连接克隆载体及表达载体的重组质粒双酶切后,均出现与预期一致的片段,DNA测序表明,插入片段序列与小反刍兽疫Nigeria75/1株M蛋白基因完全一致。重组蛋白经SDS-PAGE及Western blot鉴定,证明所构建的重组蛋白均获得高效表达,并均具有良好的反应原性。结论成功表达了小反刍兽疫截短M基因的蛋白,为制备特异性单抗及小反刍兽疫抗体检测奠定了一定基础。
- 黄华欣李刚王勇金红岩陶春爱程朝飞隋修锟
- 关键词：小反刍兽疫病毒M基因
- 四株鸽Ⅰ型副黏病毒的分离鉴定及基因型分析被引量：3
- 2013年
- 为掌握安徽省鸽Ⅰ型副黏病毒病的流行特点及其与鸡新城疫各分离株的相互关系,对从安徽省不同鸽场鸽病料中分离的4株病毒(AH-2012、AH-2012-1、AH-2012-2、AH-2012-3),采用RT-PCR、血清学试验及基因序列测定等方法进行鉴定。结果显示,这些分离株均具有血凝性,并能使NDV标准阳性血清特异性抑制;PCR扩增出F基因特异性目的片段,其核苷酸序列与GenBank上登录的鸽Ⅰ型副黏病毒的同源性较高,相似性达94.8%;与传统的鸡源新城疫病毒标准株LaSota、F48E9的同源性较低,相似性约为80%;F基因编码蛋白的第112～117位氨基酸序列为R-R-Q-K-R-F。结果表明,这些毒株为鸽Ⅰ型副黏病毒,属于基因Ⅵ型。
- 隋修锟李刚李铁吴迪程朝飞陶春爱黄华欣
- 关键词：F基因
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒GX1001株和GX1002株全基因组分子特征分析
- 2013年
- 为了解广西地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的变异情况及分子遗传特征,采用RT-PCR分段扩增2010年PRRSV广西地方分离株GX1001株和GX1002株基因片段,经克隆、测序、拼接,获得2个分离株的全基因序列。结果显示,不包括Poly(A)尾,GX1001株、GX1002株基因组全长分别为15329和15318bp。同源性分析结果表明,2个分离株间全基因组核苷酸序列同源性为99.3%,与国内外北美洲型代表毒株间的全基因组核苷酸序列同源性为84.9%～99.5%,与欧洲型代表毒株间的同源性为61.5%～61.9%。序列分析结果表明,2个分离株的NSP2编码区均存在第481和533-561位,共30个氨基酸的不连续缺失,具有PRRSV高致病性变异毒株(HP-PRRSV)的遗传特征,但分别在不同区域出现新的突变、缺失及插入等变异现象。遗传进化分析结果表明,所有美洲型毒株可分为4个亚群,GX1001株和GX1002株均属于以高致病性JXA1株为代表的第4亚群。上述结果表明,本研究获得的PRRSV广西地方分离株GX1001株和GX1002株均属于HP-PRRSV,但其基因组在不同区域发生了新的遗传变异现象。
- 林昌华施开创陶春爱钟诚莫胜兰李刚
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 小反刍兽疫病毒M蛋白主要抗原表位区的原核表达及鉴定被引量：8
- 2013年
- 为了制备小反刍兽疫病毒(PPRV)特异性单抗及临床抗体水平监测,通过在线软件分析PPRVNigeria75/1株M蛋白可能包含的B细胞线性表位位点,结合可溶性预测,设计1对引物,扩增303bp目的基因。将目的基因克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,用IPTG诱导表达,纯化,SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定结果显示,所构建的重组蛋白以可溶性形式高效表达并具有良好的反应原性,为制备特异性单抗及包被抗原用于PPRV抗体水平监测奠定了一定基础。
- 黄华欣李刚史利军赵占中王勇金红岩李文超陶春爱隋修锟
- 关键词：小反刍兽疫M蛋白抗原表位原核表达
- GnRH在广西摩拉杂交水牛乳腺的免疫组化定位及其受体基因表达的研究
- 为了探索促性腺激素释放激素(GnRH)在广西摩拉杂交水牛乳腺的分布特点,本研究采用免疫组化及RT-PCR技术检测广西摩拉杂交水牛乳腺组织中的促性腺激素释放激素(GnRH)及其受体。结果表明,15份正常乳腺组织中有13份呈...
- 王秋华陶春爱李瑞明谢莹雪秦津凌泽继宋小白
- 关键词：促性腺激素释放激素促性腺激素释放激素受体乳腺
- 文献传递
- 纳米金标记核酸探针检测小反刍兽疫病毒核酸的研究被引量：9
- 2012年
- 试验旨在探讨利用纳米金标记寡核苷酸探针快速检测小反刍兽疫病毒核酸的方法。针对小反刍兽疫病毒N基因的高度保守区设计两条特异寡核苷酸探针,一条探针5'端修饰生物素,另一条探针3'端修饰巯基。巯基化的探针通过Au-S键连接到纳米金颗粒上。靶核酸两端分别与两条探针结合,形成"生物素化探针-靶核酸-纳米金探针"复合物,该复合物通过生物素-亲和素系统,固定在固相载体上,最后银染放大信号。通过肉眼观察法、光镜观察法、分光光度法分析银染灰度,从而间接测定靶核酸的量。初步检测PPRV核酸最低浓度达10fmol/L,所需时间约为1.5h。该方法灵敏度高、操作简单,为临床检测小反刍兽疫病毒核酸提供实验数据和技术支持。
- 陶春爱邱文英李刚田康乐
- 关键词：PPRV核酸探针银染
- 检测小反刍兽疫病毒的纳米金标记探针及检测试剂盒
- 本发明提供了一种检测小反刍兽疫病毒(PPRV)的纳米金标记探针及检测试剂盒。针对PPRV N基因的高度保守区设计两条特异寡核苷酸探针，一条探针5′端修饰生物素，另一条探针3′端修饰巯基，其核苷酸序列分别如SEQ ID N...
- 李刚陶春爱邱文英史利军
- 文献传递
