韩华
- 作品数：12 被引量：23H指数：3
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- 神经母细胞瘤细胞摄取Beta淀粉样蛋白形态学观察
- 2009年
- 目的观察人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)对细胞外β-淀粉样蛋白(Aβ)摄取作用和在亚细胞结构定位。方法接种培养SH-SY5Y细胞,采用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)直接观察SH-SY5Y对细胞外Aβ1-42-fluo摄取的时程变化;用图像分析技术比较24h时SH-SY5Y对细胞外三种不同浓度Aβ1-42-fluo摄取的差异,同时采用免疫荧光多重染色分析SH-SY5Y摄入Aβ1-42-fluo的亚细胞结构定位。结果SH-SY5Y与200nmol/LAβ1-42-fluo共孵育1h后就开始摄取Aβ,Aβ被摄入的量随着时间的增加而增加;细胞外Aβ1-42-fluo浓度愈高,被摄入到细胞内Aβ1-42-fluo量也愈多,不同浓度各组间相比具有统计学差异(P<0.01或P<0.05);免疫荧光染色显示部分被内吞Aβ荧光颗粒与溶酶体标记物Lamp-1共定位。结论SH-SY5Y通过摄入Aβ机制以清除Aβ,呈时间和浓度依赖关系;被摄入的Aβ部分定位于溶酶体。
- 钱亦华胡晓丹韩华刘勇
- 关键词：SH-SY5Y细胞Β-淀粉样蛋白细胞摄取溶酶体
- 原代培养小鼠皮层神经细胞对淀粉样蛋白的内化作用被引量：2
- 2008年
- 目的:观察原代培养神经细胞对淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)内化,以及星形胶质细胞对这一过程的影响。方法:纯小鼠皮质神经细胞培养14d,分成对照组和Aβ组,各组再分为3个亚组,分别用3种不同浓度的荧光素或荧光素标记的淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42-fluo)与神经细胞共孵育24h,在激光扫描共聚焦显微镜下直接观察或进行免疫荧光多重染色后镜下观察,结合图像分析方法分析神经细胞内化Aβ情况及亚细胞结构定位;另取小鼠皮质神经细胞与星形胶质细胞共培养14d,分成对照组和Aβ组,各组分别与200nmol/L荧光素或200nmol/L Aβ1-42-fluo共孵育24h,采用上述方法分析比较星形胶质细胞对神经细胞内化Aβ的影响。结果:荧光素各组细胞内均未见荧光颗粒。培养的纯神经细胞24h内能将浓度为100和200nmol/L Aβ1-42-fluo内化入细胞内,荧光颗粒在神经细胞的胞体和突起均有分布。内化作用与Aβ浓度相关,经免疫荧光方法证明部分内化Aβ位于溶酶体内;在神经细胞与星形胶质细胞共培养组中,神经细胞内化Aβ较纯神经细胞培养组明显增加(P<0.05)。结论:神经细胞能内化一定浓度的Aβ,星形胶质细胞具有促进神经细胞内化Aβ的作用。
- 钱亦华史利利杨杰胡晓丹韩华刘勇
- 关键词：淀粉样蛋白阿茨海默病内化溶酶体
- 重组人BDNF对快速老化模型小鼠及神经元培养的影响被引量：1
- 2006年
- 目的探讨重组人BDNF(rhBDNF)对快速老化模型小鼠(SAM)及应激衰老神经元的抗凋亡作用。方法将SAM鼠分为正常组。实验对照组和hBDNF实验组,将培养的神经元分为正常组。衰老模型组和hBDNF实验组。对SAM鼠进行行为学测试,对培养的神经元进行了形态学观察。bcl-2免疫组织化学染色及MTT自动比色微量分析。结果rhBDNF实验组SAM鼠的学习记忆能力明显增强,与对照组相比有显著性差异。衰老模型组神经元存活率降至58.7%,与正常组比较有显著性差异(P<0.01)。rhBDNF实验组神经元存活率达到71.5%,显示实验组和衰老模型组之间有显著性差异(P<0.01),bcl-2阳性细胞数量和平均面积以及bcl-2免疫着色的灰度值较AD模型组显著增高。结论rhBDNF在培养的神经元和SAM鼠有营养作用,BDNF通过增加抗凋亡蛋白bcl-2的表达保护神经元抵抗凋亡,有助于衰老的防治。
- 王小亮马延兵韩华
- 关键词：衰老脑源性神经营养因子快速老化模型小鼠抗凋亡蛋白
- 陕西西安汉族成人Heath-Carter法体型研究
- 应用Heath-Carter人体测量法对429名(男206,女223名)年龄在20岁以上的陕西省西安市城市汉族进行体型评定。结果:(1)西安汉族男性的平均体型为5.6-4.2-1.8属于偏中胚层的内胚层型。各年龄组中以偏...
- 杨力涛席焕久王宁章建飞何欣李增宪刘翠韩华钱亦华温有峰
- 淀粉样蛋白联合L-型谷氨酸诱导类阿尔茨海默病模型被引量：2
- 2012年
- 目的采用淀粉样蛋白联合L-型谷氨酸诱导建立类阿尔茨海默病(AD)大鼠模型。方法将β-淀粉样蛋白25～35(Aβ25～35)注射到大鼠双侧CA3区,或联合L-谷氨酸(Glu)分别注射到大鼠双侧CA3区、侧脑室制备类AD模型,用Morris水迷宫和免疫组化方法分别检测大鼠学习记忆力和胆碱乙酰转移酶(ChAT)及NMDAR1脑内表达。结果 Aβ联合Glu诱导的类AD模型大鼠学习记忆力明显降低,与假手术组和单纯Aβ注射组相比,均有统计学差异(P<0.01或P<0.05),同时海马CA3区及顶叶皮质内ChAT及NMDR1表达也降低明显(P<0.01)。结论采用淀粉样蛋白联合L-型谷氨酸诱导建立类AD动物模型比单纯Aβ注射效果好,能模拟出AD学习记忆力减退和相关的主要病理学变化。
- 史利利冯建军杨维娜韩华杨蓬勃田苑刘勇钱亦华
- 关键词：淀粉样蛋白阿尔茨海默病胆碱乙酰转移酶
- β-淀粉样蛋白增加基底前脑神经元对谷氨酸的易感性被引量：2
- 2005年
- 目的探讨β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)与谷氨酸(Glu)联合应用,对原代培养的大鼠基底前脑神经元的作用。方法原代培养大鼠基底前脑神经元,应用形态学、MTT法结合ChAT免疫组织化学染色,分别观察Aβ25-35与Glu联合应用,对原代培养的基底前脑神经元存活率、形态学及ChAT免疫反应阳性神经元的影响。结果将100 nmol/L、1μmol/L Aβ分别和20μmol/L Glu联合用于培养的基底前脑神经元,在倒置显微镜下观察,细胞表面粗糙,立体感减弱,胞浆中出现深色颗粒,细胞肿胀或收缩;尼氏染色显示尼氏体减少;MTT检测显示神经元存活率明显下降,100nmol/L Aβ+20μmol/L Glu组与100 nmol/L Aβ组间,1μmol/L Aβ+20μmol/L Glu组与1μmol/L Aβ组间比较均具有统计学差异(P<0.05);ChAT免疫阳性神经元的灰度和截面积均减小。结论Aβ25-35可增加神经元对Glu神经毒性作用的敏感性,表明Glu在阿尔茨海默病发病中起着非常关键的作用。
- 钱亦华王晓玲朱淑娟史利利胡明刘勇胡晓丹韩华
- 关键词：Β-淀粉样蛋白谷氨酸基底前脑细胞培养
- 左位下腔静脉并双侧睾丸静脉变异1例被引量：4
- 2005年
- 韩华项燕杨蓬勃马兆龙段保国
- 关键词：下腔静脉睾丸静脉解剖学
- 制备类阿尔茨海默病模型大鼠研究
- 钱亦华冯建军史利利杨维娜胡晓丹韩华陈连吉
- 铜与疾病被引量：4
- 2006年
- 铜是某些疾病的病因。新的进展包括降铜疗法用于抗血管生成、抗纤维化和抗炎症,铜在阿尔茨海默病淀粉样斑形成中的作用,铜螯合作用成功治疗啮齿动物阿尔茨海默病模型,遗传性和非遗传性铜异常。
- 刘璐严玉仙韩华
- 关键词：铜肝豆状核变性铜中毒阿尔茨海默病
- 重组基因c-Aβ-c的构建及其表达蛋白的免疫原性分析被引量：8
- 2005年
- 目的: 构建原核表达质粒pHGhis/c-Aβ-c,并在大肠杆菌中表达,观察融合蛋白c-Aβ-c的免疫原性,为阿尔茨海默病(AD)基因工程疫苗的研究打下基础.方法: 采用PCR法,分别扩增编码HBcAg的1～71、88～144氨基酸的基因片断(HBc1～71和HBc88～144),以及编码淀粉样肽Aβ1-42的基因.将后者连接于HBc1～71和HBc88～144之间,构建重组质粒pGEMEX/c-Aβ-c,并将重组基因亚克隆于原核表达载体pHGhis中,构建表达质粒pHGhis/c-Aβ-c,通过温度诱导表达.用SDS-PAGE(考马斯亮蓝染色)检测融合基因的表达.以融合蛋白经腹腔注射免疫BALB/c小鼠,用间接ELISA法检测小鼠血清中抗-Aβ抗体的滴度.结果: 经酶切鉴定、DNA序列测定证实,融合基因重组于表达质粒之中,表达质粒与理论设计相符.诱导表达后,表达蛋白约占细菌沉淀的16%.BALB/c小鼠经3次免疫后,其血清中抗-Aβ抗体的滴度可达1∶16 000,且检测不到抗-HBcAg抗体.结论: c-Aβ-c融合基因在大肠杆菌中可高效表达,表达的融合蛋白具有较强的免疫原性.
- 冯改丰胡海涛李月英韩华王全颖杨广笑
- 关键词：基因工程疫苗免疫原性
