公共文化服务平台

顾小锋: 作品数：25 被引量：31H指数：4; 供职机构：复旦大学附属儿科医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金政府间科技合作项目上海市卫生局青年科研基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

合作作者

流式细胞术检测儿童急性白血病血小板活化功能: 本文利用流式细胞技术检测儿童急性白血病不同阶段血小板膜PAC-1、CD62P表达变化,探讨了儿童急性白血病血小板活化功能的变化.; 吴玥陈笑韵张广舫顾小锋; 关键词：急性白血病血小板活化功能流式细胞术; 文献传递

可随HeLa细胞传代而传递的反义RNA真核表达系统: 1999年; 为研究反义ＲＮＡ表达载体在细胞内的稳定性，构建了一个特异性针对β地中海贫血基因ＩＶＳ－２－６５４Ｃ→Ｔ（β６５４）突变ｍＲＮＡ前体异常剪接位点的反义ＲＮＡ表达载体ｐＣＭＶＡ．ｐＣＭＶＡ转染β６５４ＨｅＬａ细胞后，通过ＲＮＡ定量检测反义片段对β６５４ｍＲＮＡ异常剪接的纠正作用；再从转染后传代５次并冰冻保存１年的ＨｅＬａ细胞中回收反义表达载体，转染另外的β６５４ＨｅＬａ细胞，同样检测它对β６５４ｍＲＮＡ异常剪接的纠正作用．结果显示该载体在细胞传代前后均能阻断β６５４异常剪接，部分恢复其正常剪接途径：用回收的ｐＣＭＶＡ转染β６５４ＨｅＬａ细胞后，正常剪接的βｍＲＮＡ水平［β／（β＋β＊）］由０．０５上升到处理后１５ｄ的０．４８，而２种对照质粒处理后对这一比值影响不大．表明ｐＣＭＶＡ可在ＨｅＬａ细胞中随着细胞传代而传递下去。; 陈云弟顾小锋宫澜陈巍陈美珏黄淑帧曾溢滔; 关键词：Β地中海贫血反义RNA 剪接基因治疗

幼儿慢性粒细胞白血病加速期染色体异常1例: 1996年; 幼儿慢性粒细胞白血病加速期染色体异常１例上海医科大学儿科医院（２０００３２）顾小锋，吴玥，吴长根，沈伟敏，马伴吟儿童慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）非常少见。我们在一组７例儿童ＣＭＬ中发现１例除ｐｈ染色体外还伴有额外的１７ｑ＋，现报告如下。病例和方法患儿男...; 顾小锋吴玥吴长根沈伟敏马伴吟; 关键词：白血病粒细胞白血病加速期染色体异常

白血病微小残留病的检测: 1992年; 防治白血病复发是目前国内外白血病治疗的重点。估计白血病复发的根源是体内微小残留病(MRD)对维持化疗不敏感或化疗停止后再次大量增殖,然而其确切机制尚待进一步研究。因而检测 MRD,研究残留白血病细胞生物学特性,有助于揭开白血病复发之谜,为治愈白血病指出方向。研究 MRD,首先要建立十分敏感而可靠的检测方法。本文综述了目前应用的几种检测途径及其存在的问题,以及 MRD 在临床、生物学上的意义。; 顾小锋吴月; 关键词：白血病微小残留病

正常成人外周血红系细胞液体培养──细胞成熟分化与珠蛋白基因表达被引量：5: 1995年; 正常成人外周血细胞经二步法培养，可得到９０％以上纯度的红系细胞。并且红系细胞随培养时间延长，不断向成熟分化，红系细胞数目增多。以逆转录多聚酶链反应法检测该培养体系内珠蛋白链ｍＲＮＡ相对含量。结果表明：随着红系细胞成熟分化，细胞内β－ｍＲＮＡ表达升高，而γ－ｍＲＮＡ表达下降。表明二步法建立的红系细胞液体培养较好地模拟了红系细胞发育的生理状态，为体外研究珠蛋白基因转换提供了良好模型。; 黄淑帧顾小锋任兆瑞曾溢滔; 关键词：外周血红系细胞细胞培养珠蛋白

羟基脲对βIVS－Ⅱ－654C→T基因表达的影响被引量：7: 1996年; 为研究羟基脲（ＨＵ）对βＩＶＳ－Ⅱ－６５４Ｃ→Ｔ基因表达的影响，应用成人红系细胞体外液体培养模型，微量珠蛋白肽链生物合成速率测定和逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）介导的珠蛋白ｍＲＮＡ定量测定技术，研究了βＩＶＳ－Ⅱ－６５４Ｃ→Ｔ剪接缺陷型β＋地中海贫血（地贫）患者的培养红细胞在低浓度（５０μｍｏｌ／Ｌ）ＨＵ作用下珠蛋白基因表达的变化。结果表明，突变基因正常剪接的β珠蛋白ｍＲＮＡ含量升高，伴随红细胞内β珠蛋白肽链合成增加。这一结果不仅与ＨＵ治疗β地贫患者的临床结果一致，而且提示ＨＵ可能具有改善ＩＶＳ－Ⅱ－６５４Ｃ→Ｔ基因剪接加工的作用。; 黄淑帧顾小锋盛敏任兆瑞任兆瑞; 关键词：羟基脲珠蛋白基因表达

反义RNA对β-地中海贫血IVS-2-654C→T突变基因异常剪接的恢复作用被引量：1: 1998年; 构建了一个特异性针对β－地中海贫血基因（IVS－2－654C→T，β654）mRNA前体的异常剪接位点的反义RNA表达载体，它能在体外非细胞转录和剪接系统、HeLaβ654细胞和培养的β654红系细胞中，有效地降低β654突变mRNA异常剪接产物．在体外转录和剪接系统中，正常剪接的mRNA水平[β／（β＋β*）]由0．25上升到0．60；在HeLaβ654细胞中，β／（β＋β*）水平由0．07上升到转染后15d的0．43；在β654红系细胞中，β654／β654细胞的β／（β＋β）水平由0．19上升到转染后8d的0．58，β654／β41～42细胞由0．02上升到0．38，β654／βA细胞则由0．45上升到0．83．相应的，β654／β654红系细胞的珠蛋白肽链生物合成比例（β／α）由0．16上升到转染后8d的0．52；β654／β41～42细胞由0．05上升到0．36；β654／βA细胞由0．42上升到0．81．用或不用反义RNA处理对βA／βA红系细胞影响不大，对照的非特异性反义RNA片段无论在细胞内外都对β654mRNA前体剪接无显著影响．结果表明该反义RNA能有效地在非细胞系统和培养细胞内抑制β654mRNA前体的异常剪接，部分恢复其正常剪接途径，从而改善地中海贫血细胞珠蛋白肽链合成的不平衡状况．这为β－地中海贫血的基因治疗提供了一种可能途径．; 曾溢滔顾小锋陈云弟宫澜任兆瑞黄淑帧; 关键词：Β-地中海贫血剪接基因治疗反义RNA 突变基因

反义RNA对地中海贫血红系细胞β-珠蛋白mRNA异常剪接的纠正作用被引量：2: 1999年; 目的研究反义ＲＮＡ对β地中海贫血红系细胞ＩＶＳ２６５４Ｃ→Ｔ（β６５４）突变ｍＲＮＡ异常剪接的纠正作用。方法构建特异性针对β６５４ｍＲＮＡ前体异常剪接位点的反义ＲＮＡ表达载体，和不针对上述位点的反义对照载体，转染培养的β６５４红系细胞后，抽提总ＲＮＡ；以ＲＴＰＣＲ法作ｍＲＮＡ定量，检测正常和异常剪接的β珠蛋白ｍＲＮＡ产物的比例［β／（β＋β）］；以珠蛋白肽链体外生物合成分析红系细胞中β和α珠蛋白肽链合成的比例（β／α）。结果在ＲＮＡ水平，β６５４／β６５４纯合子的β／（β＋β）值由０．１９（转染后第０天）上升到０．５８（第８天），β６５４／βＡ杂合子由０．４５（０天）上升到０．８３（第８天）；在珠蛋白肽链水平，β６５４／β６５４细胞的β／α值由０．１６（０天）上升到０．５２（第８天），β６５４／βＡ细胞由０．３９（０天）上升到０．８４（第８天）。反义ＲＮＡ处理βＡ／βＡ红系细胞以及对照ＲＮＡ处理这３类红系细胞，对其ｍＲＮＡ剪接和珠蛋白肽链合成均影响不大。结论特异性反义ＲＮＡ能抑制红系细胞β６５４ｍＲＮＡ前体的异常剪接，部分恢复其正常剪接途径。; 陈云弟顾小锋宫澜宫澜黄淑帧任兆瑞; 关键词：Β-地中海贫血反义RNA 贫血 MRNA Β-珠蛋白

强烈化疗动员造血干细胞出髓机制探讨: 顾小锋

构建反义RNA表达载体对β地中海贫血进行基因治疗的研究: 黄淑帧任兆瑞曾溢滔顾小锋宫澜陈云弟盛敏陈美珏; 1991年1月～2001年8月31日，由国家“863”项目及国家自然科学基金项目资助，进行了研究。以中国人最常见的β654剪接缺陷型β地中海贫血(β地贫)突变基因为材料，进行了反义核糖核酸(RNA)基因治疗β地贫的研究。...; 关键词：; 关键词：地中海贫血基因治疗 RRNA 基因表达遗传学

顾小锋

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

顾小锋

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈