黄嘉凌
- 作品数：35 被引量：109H指数：7
- 供职机构：中山大学肿瘤防治中心更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠T-bet基因真核表达载体的构建被引量：4
- 2005年
- 目的构建小鼠T—bet基因重组真核表达载体pcDNA3一T—bet,为T—bet基因治疗研究提供有效的生物表达系统。方法采用内切酶切从质粒T—bet/GFP—RV中获得约1.7 kb的小鼠T—betcDNA片段,以单酶切非定向克隆方式与真核表达质粒pcDNA3连接,构建真核表达载体pcDNA3-T-bet。结果经PCR筛选阳性重组子,双酶切鉴定T—bet基因重组方向,并测序鉴定无错配及插入移位等DNA顺序改变。结论本实验成功构建了小鼠T—bet基因真核表达载体pcDNA3-T-bet。
- 檀卫平麦友刚黄嘉凌刘然义麦贤弟黄绍良黄文林
- 关键词：T-BET基因基因真核表达载体CDNA片段真核表达质粒酶切鉴定PCDNA3
- B7-1和IL-12基因转染对肝癌细胞免疫原性的影响被引量：5
- 2000年
- 目的 观察B7 1和IL 12基因表达对人肝癌细胞免疫原性的影响。方法 分别将B7 1和IL 12基因以逆转录病毒介导转染HepG2细胞。阳性克隆细胞与健康人外周血淋巴细胞 (PBL)混合培养后 ,用流式细胞仪检测PBL表面Ⅰ类人白细胞抗原 (HLA Ⅰ )分子表达 ,以MTT法检测PBL的特异性杀伤活性及杀伤K5 6 2细胞的活性。结果 混合培养后HepG2 /B7 1和HepG2 /IL 12细胞组PBL表面的HLA Ⅰ分子表达分别较HepG2 /neo细胞组增加16 .95 %和 14 .71% (P <0 .0 5 ) ;与HepG2 /neo组比较 ,HepG2 /B7 1组PBL特异性杀伤活性增高 12 .5 % (P <0 .0 5 ) ,HepG2 /IL 12组PBL的特异性杀伤活性无明显增高 (P >0 .0 5 )。HepG2 /B7 1、HepG2 /IL 12细胞活化的PBL对K5 6 2细胞的杀伤活性较HepG2 /neo组分别增高 19.38%和 14 .78% (P <0 .0 5 )。 结论 B7 1和IL 12分子均能增强免疫细胞对肝癌细胞的识别和杀伤 。
- 吕明德郑云黄嘉凌萧定璋李树浓
- 关键词：B7-1基因免疫疗法基因转染IL-12
- 重组人血管内皮抑素腺病毒对人癌裸小鼠移植瘤的抑制作用被引量：3
- 2003年
- 目的 观察重组人血管内皮抑素腺病毒 (Ad/hEndo)在体内、体外的表达效率 ,以及对裸鼠移植瘤肿瘤血管生成的影响。方法 携带人血管内皮抑素基因的新型重组腺病毒 (Ad/hEndo)及携带β 半乳糖苷酶基因 (LacZ基因 )的重组腺病毒 (Ad/LacZ)为自行构建。Ad/hEndo组 (7只 )瘤内注射 1× 10 9空斑形成单位 (pfu)的Ad/hEndo 10 0 μl,Ad/LacZ注射组 (6只 )瘤内注射 1× 10 9pfu的Ad/LacZ注射 10 0 μl,DMEM液注射组 (5只 )瘤内注射DMEM液 10 0 μl,共注射 5次。人鼻咽癌 (CNE 2 )和人脐静脉内皮细胞 (ECV30 4细胞 )被Ad/hEndo感染后 ,Western印迹和免疫酶联吸附法 (ELISA)检测人血管内皮抑素蛋白的表达。CNE 2细胞株移植到裸鼠背脊部后 ,检测Ad/hEndo对鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用 ,微血管密度计数 (microvesseldensity ,MVD)分析Ad/hEndo对肿瘤血管生成的影响。结果 Western印迹和ELISA法检测到人血管内皮抑素基因在CNE 2和ECV30 4细胞高效表达。当感染复数 (MOI)为 2 0pfu/细胞时 ,感染 72h后细胞培养上清中人血管内皮抑素蛋白浓度达 5 88 34ng/ml。Ad/hEndo可明显抑制鼻咽癌CNE 2裸鼠移植瘤生长 ,抑瘤率为 4 6 4 3% (Ad/hEndo治疗组对腺病毒携带基因LacZ注射组 ,t=2 2 2 6 ,P <0 0 5 )和 4 9 70 % (
- 李立吴沛宏陈宇丁学强黄嘉凌刘然义曾益新黄文林
- 关键词：裸小鼠移植瘤肿瘤血管生成鼻咽癌
- B7-1分子诱导体外抗肝癌免疫反应被引量：9
- 2000年
- 目的：了解Ｂ７分子在体外抗肝癌免疫中的作用。方法：健康人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）与ＨｅｐＧ２／ｈＢ７－１。ＨｅｐＧ２／ｎｅｏ及亲代ＨｅｐＧ２瘤苗混合培养（ＭＬＴＣ），检测淋巴细胞活化增殖能力，淋巴细胞ＨＬＡ－１类抗原的表达，培养上清ＩＦＮ－γ水平、ＴＮＦ活性及ＬＡＫ、ＣＴＬ细胞活性。结果：ＨｅｐＧ２／ｈＢ７－１瘤苗促淋巴细胞增殖最高达１４．６倍，明显高于ＨｅｐＧ２／ｎｅｏ和ＨｅｐＧ２瘤苗的作用（Ｐ＜０．０５）。ＨｅｐＧ２／ｈＢ７－１瘤苗刺激后淋巴细胞ＨＬＡ－Ｉ类抗原表达、ＩＦＮ－γ及ＴＮＦ分泌均高于ＨｅｐＧ２／ｎｅｏ、ＨｅｐＧ２瘤苗刺激组。Ｅ／Ｔ＝４０：１时ＬＡＫ细胞对ＨｅｐＧ２／ｈＢ７－１细胞的杀伤率为杀伤ＨｅｐＧ２／ｎｅｏ和ＨｅｏｐＧ２胞的２．０，２．４倍；ＣＴＬ细胞对ＨｅｐＧ２／ｈＢ７－１细胞杀伤为对ＨｅｐＧ２／ｎｅｏ及ＨｅｐＧ２杀伤的２．７倍，具有明显差异（Ｐ＜０．００１）。结论：抗肝癌免疫中Ｔ细胞活化也需双信号共刺激。Ｂ７－１分子能诱导体外抗肝癌免疫反应。
- 黄嘉凌吕明德肖定璋
- 关键词：肝细胞癌基因治疗B7-1
- 腺病毒载体SARS疫苗及其制备方法，冠状病毒S基因的应用
- 本发明属于生物基因工程领域，具体涉及腺病毒载体SARS疫苗，其制备方法以及相关冠状病毒S基因在制备预防非典型肺炎(SARS)疫苗方面的应用。通过生物工程手段，将相关冠状病毒S基因与缺陷型腺病毒重组结合，使保护性免疫原蛋白...
- 黄文林曾益新汪健刘然义黄嘉凌黄必军赖坤吴立志梁志慧柯妙拉吴秀菊
- 文献传递
- SARS患者免疫功能分析及SARS疫苗研制
- 严重急性呼吸综合征(severeacuterespiratorysyndrome，SARS)是由SARS相关冠状病毒(SARS-associatedcoronavirus，SARS-CoV)引起的多器官、多组织损伤的急性...
- 黄嘉凌
- 关键词：严重急性呼吸综合征免疫病理机制
- 文献传递
- 腺病毒携带人Endostatin在Tca8113细胞和ECV细胞中的表达和作用
- Objective: To study the expression of endostatin in TCA8113 and ECV cell line infected by Ad/hEnd and to evalu...
- 陈宇丁学强黄嘉凌李立刘然义冼励坚曾益新黄文林赖坤吴秀菊柯妙拉
- 文献传递
- 严重急性呼吸综合征患者血清病毒抗体消长规律的研究被引量：4
- 2004年
- 段朝晖罗晓红黄嘉凌王惠英何春生江从海刘香梅曾桦郑治修朱振宇黄文林
- 关键词：严重急性呼吸综合征传染性非典型肺炎病情变化SARS病毒抗体
- 腹腔注射人淋巴细胞建立人肝癌PBL-SCID嵌合模型被引量：8
- 2005年
- 目的探索建立人肝癌PBL-SCID嵌合模型的方法.方法 C57/BL SCID小鼠腹腔注射健康志愿者外周血淋巴细胞(huPBL)2×107(1.0 ml),同时右腋部皮下注射5×105(0.2 ml)HepG2细胞.第2、4周鼠尾取血ELISA法测定人IgG含量,用流式细胞仪分析小鼠外周血单个核细胞中人淋巴细胞比例.4周MTT法测定小鼠脾细胞对HepG2细胞的杀伤能力,免疫组化检测小鼠脾脏中人淋巴细胞的存在.结果模型成瘤率为100%,成瘤潜伏期12～18 d.2、4周时小鼠血中人IgG 分别达69.8 μg/ml、125.9 μg/ml,人淋巴细胞占单核细胞的比例分别为10.5%和3.5%.4周时免疫组化检测出人淋巴细胞分布于小鼠脾脏中,小鼠脾细胞对HepG2细胞的杀伤力为20.3%.处死动物,常规病理切片见肿瘤生长.结论 SCID小鼠腹腔注射人淋巴细胞、皮下注射肝癌细胞可建立人肝癌PBL-SCID嵌合模型.
- 黄嘉凌刘燕艳刘然义方壮伟申权吕明德
- 关键词：人淋巴细胞SCID人肝癌腹腔注射BL脾细胞
- 重组人内皮抑素腺病毒抑制肝癌裸鼠移植瘤生长被引量：12
- 2003年
- 目的 观察重组人内皮抑素腺病毒(Ad/hEndo)对人肝癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法 人脐静脉内皮细胞ECV-304经Ad/hEndo感染后,western印迹检测人内皮抑素的表达。人肝癌BEL-7402细胞移植到裸鼠背脊部后,检测Ad/hEndo对肝癌移植瘤生长的抑制作用。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肿瘤组织中内皮抑素mRNA的表达。分析人内皮抑素在裸鼠体内的表达分布。结果 Western印迹检测到人内皮抑素基因在ECV-304细胞内高效表达。Ad/hEndo明显抑制人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤生长(F=4.061,P<0.05)。Ad/hEndo组血管密度计数为6.88±1.08,DMEM组为13.60±1.71(t=9.216,P<0.01)。瘤内注射Ad/hEndo后3d,RT-PCR在肿瘤组织检测到内皮抑素mRNA的表达,7d后表达不明显。人内皮抑素蛋白主要分布在肿瘤组织。结论 腺病毒介导的人内皮抑素基因在体内、体外获得高效表达,并明显抑制肝癌裸鼠移植瘤的生长与血管生成。
- 李立吴沛宏黄嘉凌刘然义曾益新黄文林
- 关键词：肝癌裸鼠移植瘤抗血管生成
