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付愚

作品数:3 被引量:0H指数:0
供职机构:重庆医科大学附属第一医院更多>>
发文基金:国家自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 2篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 3篇医药卫生

主题

  • 2篇蛋白
  • 2篇启动子
  • 2篇人工转录因子
  • 2篇转录
  • 2篇转录因子
  • 2篇锌指
  • 2篇锌指蛋白
  • 2篇病毒
  • 1篇乙肝
  • 1篇乙肝病毒
  • 1篇乙型
  • 1篇乙型肝炎
  • 1篇乙型肝炎病毒
  • 1篇乙型肝炎病毒...
  • 1篇抑制HBV
  • 1篇增强子
  • 1篇细胞
  • 1篇基因
  • 1篇基因启动子
  • 1篇核心启动子

机构

  • 2篇重庆医科大学...
  • 1篇重庆医科大学

作者

  • 3篇付愚
  • 2篇吴忠均
  • 2篇李中堂
  • 1篇刘济铭
  • 1篇魏续福
  • 1篇刘锐
  • 1篇罗伟

传媒

  • 1篇细胞与分子免...
  • 1篇重庆医科大学...

年份

  • 1篇2015
  • 2篇2014
3 条 记 录,以下是 1-3
排序方式:
应用人工转录因子技术抑制乙型肝炎病毒复制
2015年
目的设计与构建特异性结合乙型肝炎病毒增强子1(HBV Enh1)的锌指蛋白人工转录因子(ZFP-ATF),检测在Hep G2.2.15细胞内的表达、对细胞生长影响及观察其抑制HBV DNA复制与表达的作用。方法构建含结合结构域ZFP与抑制性效应结构域Krüppel相关盒(KRAB)的人工转录因子(ATF),进行相关修饰、优化后,将人工合成ATF核酸序列插入真核表达质粒载体pc DNA3.1(^+),测序鉴定其正确性,X-treme GENE HP转染Hep G2.2.15细胞,共聚焦显微镜下观察ATF蛋白表达情况,CCK-8法检测ATF对细胞生长的影响,ATF转染24、48、72 h后,采用实时定量PCR、ELISA、Western blot法检测对HBV DNA复制与表达的抑制作用。结果成功构建pc DNA3.1-ATF(nls-ZFP-KRAB-FLAG)真核表达载体,ATF在Hep G2.2.15细胞中能正常表达,且对细胞生长无明显的影响,ATF具有抑制HBV DNA复制与表达的作用,在转染72 h后抑制作用达最高,抑制率达68.0%。结论构建的ATF在Hep G2.2.15细胞中能够正常表达且无毒性作用,可特异性结合HBV Enh1靶序列并具有抑制HBV DNA复制与表达的作用。
李中堂罗伟付愚蒋清虎刘济铭吴忠均
关键词:锌指蛋白人工转录因子乙型肝炎病毒增强子
特异性识别Cp的ATF在体外抑制HBV的实验研究
目的:设计可特异性识别并结合于HBV核心启动子(Cp)的人工转录因子(ATF),并观察其对HBV表达的抑制作用。  方法:(1)分析及比对HBV Cp序列后确定最佳靶序列,再设计可识别该靶序列的锌指蛋白(ZFP)氨基酸序...
付愚
关键词:乙肝病毒人工转录因子核心启动子
设计特异性结合HBVX基因启动子的人工锌指蛋白以抑制HepG2.2.15细胞中HBV的转录
2014年
目的:设计人工锌指蛋白(zinc finger protein,ZFP)特异性结合于乙型肝炎病毒x蛋白(hepatitis B virus X protein,HBX)基因启动子,观察zFP在体外对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)转录的抑制。方法:将pcDNA3.1-ZFP转染入HepG2.2.15细胞24h后,用Western blot检测HBX蛋白的含量:用ELISA和real—time PCR检测上清液中乙型肝炎核心相关抗原(hepatitis B eantigen,HBeAg)和HBV DNA含量,用RT—PCR检测胞内HBV mRNA水平。结果:ZFP可抑制HepG2.2.15细胞中HBX的表达;相比空质粒组,ZFP组细胞培养上清液中HBV DNA拷贝量和HBeAg含量分别下降了51.7%(t=23.079,P=0.000,95%CI=44.98%-58.52%)、33.8%(t=3.887,P=-0.003,95%CI=12.12%~55.48%);细胞内HBVmRNA也明显减少(t=3.616,P=0.022)。结论:人工设计的可特异性结合于HBX的ZFP可于HepG2.2.15细胞中有效抑制HBV转录。
祝艺耘付愚李中堂刘锐魏续福吴忠均
关键词:锌指蛋白HEPG2
共1页<1>
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