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李中堂

作品数:5 被引量:4H指数:1
供职机构:重庆医科大学附属第一医院更多>>
发文基金:国家自然科学基金重庆市医学科研计划项目更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 3篇期刊文章
  • 2篇会议论文

领域

  • 4篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 2篇蛋白
  • 2篇转录
  • 2篇转录因子
  • 2篇细胞
  • 2篇锌指
  • 2篇锌指蛋白
  • 2篇肝移植
  • 2篇大鼠肝移植
  • 1篇凋亡
  • 1篇乙型
  • 1篇乙型肝炎
  • 1篇乙型肝炎病毒
  • 1篇乙型肝炎病毒...
  • 1篇预处理
  • 1篇增强子
  • 1篇增殖
  • 1篇术前
  • 1篇启动子
  • 1篇迁移
  • 1篇人工转录因子

机构

  • 5篇重庆医科大学...

作者

  • 5篇吴忠均
  • 5篇李中堂
  • 3篇刘锐
  • 3篇张国庆
  • 2篇付愚
  • 2篇周密
  • 1篇刘济铭
  • 1篇魏续福
  • 1篇罗伟
  • 1篇许志华

传媒

  • 2篇细胞与分子免...
  • 2篇2014中国...
  • 1篇重庆医科大学...

年份

  • 2篇2015
  • 3篇2014
5 条 记 录,以下是 1-5
排序方式:
过表达转录因子21抑制SMMC-7721肝癌细胞的增殖和迁移并促进其凋亡被引量:4
2015年
目的探讨转录因子21(TCF21)基因对SMMC-7721肝癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响及机制。方法采用脂质体将pc DNA3.1(+)TCF21及pc DNA3.1(+)质粒稳定转染入SMMC-7721细胞,分别为TCF21过表达组、空载体组、未处理组。采用反转录PCR检测转染前后TCF21 mRNA水平、Western blot法检测TCF21蛋白水平;MTT法检测细胞的增殖能力,划痕实验检测转染后细胞的迁移能力;异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测转染后KISS1、P53和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的蛋白水平。结果 TCF21基因转染SMMC-7721细胞后,细胞内TCF21 mRNA和蛋白水平均明显增加。与对照细胞相比,过表达TCF21的肝癌细胞增殖能力减弱、癌细胞迁移能力降低、细胞凋亡增加。Western blot结果显示上调TCF21表达,可增加KISS1、P53水平并降低MMP-9的水平。结论过表达TCF21可抑制SMMC-7721肝癌细胞的增殖、迁移并促进其凋亡。
谭婧宇张国庆刘锐周密李中堂吴忠均
关键词:肝细胞肝癌增殖迁移凋亡
应用人工转录因子技术抑制乙型肝炎病毒复制
2015年
目的设计与构建特异性结合乙型肝炎病毒增强子1(HBV Enh1)的锌指蛋白人工转录因子(ZFP-ATF),检测在Hep G2.2.15细胞内的表达、对细胞生长影响及观察其抑制HBV DNA复制与表达的作用。方法构建含结合结构域ZFP与抑制性效应结构域Krüppel相关盒(KRAB)的人工转录因子(ATF),进行相关修饰、优化后,将人工合成ATF核酸序列插入真核表达质粒载体pc DNA3.1(^+),测序鉴定其正确性,X-treme GENE HP转染Hep G2.2.15细胞,共聚焦显微镜下观察ATF蛋白表达情况,CCK-8法检测ATF对细胞生长的影响,ATF转染24、48、72 h后,采用实时定量PCR、ELISA、Western blot法检测对HBV DNA复制与表达的抑制作用。结果成功构建pc DNA3.1-ATF(nls-ZFP-KRAB-FLAG)真核表达载体,ATF在Hep G2.2.15细胞中能正常表达,且对细胞生长无明显的影响,ATF具有抑制HBV DNA复制与表达的作用,在转染72 h后抑制作用达最高,抑制率达68.0%。结论构建的ATF在Hep G2.2.15细胞中能够正常表达且无毒性作用,可特异性结合HBV Enh1靶序列并具有抑制HBV DNA复制与表达的作用。
李中堂罗伟付愚蒋清虎刘济铭吴忠均
关键词:锌指蛋白人工转录因子乙型肝炎病毒增强子
大鼠肝移植术前预先吸入NO对其急性肺损伤的影响
李中堂周密张国庆许志华吴忠均
IL-37预处理对大鼠肝移植免疫耐受的研究
目的:观察抗炎性因子IL-37预处理对大鼠肝移植术后移植肝和外周血中细胞因子的影响,并分析其与急性排斥反应和耐受诱导的关系.方法:Kamada法建立大鼠肝移植模型,随机法分为三组(n=8):A组:同品系组;B组:免疫排斥...
刘锐李中堂张国庆谭婧宇吴忠均
设计特异性结合HBVX基因启动子的人工锌指蛋白以抑制HepG2.2.15细胞中HBV的转录
2014年
目的:设计人工锌指蛋白(zinc finger protein,ZFP)特异性结合于乙型肝炎病毒x蛋白(hepatitis B virus X protein,HBX)基因启动子,观察zFP在体外对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)转录的抑制。方法:将pcDNA3.1-ZFP转染入HepG2.2.15细胞24h后,用Western blot检测HBX蛋白的含量:用ELISA和real—time PCR检测上清液中乙型肝炎核心相关抗原(hepatitis B eantigen,HBeAg)和HBV DNA含量,用RT—PCR检测胞内HBV mRNA水平。结果:ZFP可抑制HepG2.2.15细胞中HBX的表达;相比空质粒组,ZFP组细胞培养上清液中HBV DNA拷贝量和HBeAg含量分别下降了51.7%(t=23.079,P=0.000,95%CI=44.98%-58.52%)、33.8%(t=3.887,P=-0.003,95%CI=12.12%~55.48%);细胞内HBVmRNA也明显减少(t=3.616,P=0.022)。结论:人工设计的可特异性结合于HBX的ZFP可于HepG2.2.15细胞中有效抑制HBV转录。
祝艺耘付愚李中堂刘锐魏续福吴忠均
关键词:锌指蛋白HEPG2
共1页<1>
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