刘有旺
- 作品数：30 被引量：113H指数：6
- 供职机构：泰山医学院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金山东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学文化科学更多>>
- pRluc-hKOR-pcDNA3.1真核重组质粒的构建及在HEK293细胞中的表达被引量：5
- 2009年
- 目的:构建与海肾荧光素酶(renilla luciferase,Rluc)融合的人κ型阿片受体(kappa opioid receptor,KOR)的真核表达载体,用于生物发光共振能量转移法检测人KOR与其它受体间的相互作用。方法:以质粒pcD-NA3.1-hKOR为模板,PCR方法扩增人KOR。扩增的人KOR用NotⅠ和XhoⅠ双酶切,同时用这2种酶双酶切质粒pRluc-pcDNA3.1。然后将这2种酶切产物按常规方法连接、转化大肠杆菌Top10。挑取菌落培养,提取质粒,然后进行酶切鉴定,最后进行测序。将测序正确的重组载体用脂质体法转染人胚胎肾(human embryonic kidney293,HEK293)细胞,免疫荧光染色,共聚焦显微镜观察。结果:扩增出了1条约1.2kb的片段,与预期的人KOR大小相符,质粒酶切结果显示重组质粒pRluc-hKOR-pcDNA3.1被切成2条片段,其中1条为pRluc-pcDNA3.1载体大小,另1条为目的片段大小。经测序鉴定,序列与GenBank(NM_000912)中的序列高度同源。共聚焦显微镜观察显示,阿片受体主要表达在细胞膜上。结论:构建成功了pRluc-hKOR-pcDNA3.1重组真核表达载体,此表达载体可用于检测人KOR与其它受体之间的相互作用。
- 李雅林白波陈京刘有旺刘海青路海
- 关键词：HEK293细胞
- 苦瓜降血糖作用的研究进展被引量：4
- 2011年
- 苦瓜,别名凉瓜。属于葫芦科苦瓜属的一年生攀缘性草本植物。苦瓜果实中含有各种营养物质,是瓜类蔬菜中含维生素C最高的一种,具有清热解毒、清心明目、清热解暑、治胃通气的功效。现代研究表明,苦瓜还有降血糖、降血脂、提高免疫力、调节内分泌、抗氧化、抗肿瘤等作用。其中苦瓜的降血糖作用越来越受到人们的关注。
- 包万员丁超刘有旺
- 关键词：苦瓜降血糖皂甙
- 树突状细胞表达的TGF-β1在制备抗动脉粥样硬化药物中的应用
- 本发明公开了一种树突状细胞表达的TGF-β1在制备抗动脉粥样硬化药物中的应用。本发明首先通过cre-lox技术，成功杂交出树突状细胞(DC)不表达TGF-β1的小鼠，通过骨髓移植将这种小鼠的骨髓嵌合进动脉粥样硬化的易感小...
- 李雅林唐华宋文刚刘有旺
- 文献传递
- 一种自调节切入式高效复合除尘装置
- 本实用新型公开了一种自调节切入入风式高效复合除尘装置，包括装置本体，旋风沉降区内设置有多个分离锥，重力沉降区底部设置有细孔，重力沉降区内顶部设置有开口，开口表面抵接有磁板，磁板正下方位于重力沉降区底部设置有电磁铁，静电吸...
- 刘有旺李腾宋明晶郭沙沙
- 文献传递
- pRluc-KOR真核表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达
- 2009年
- 目的:构建与海肾萤光素酶(Rluc)融合的κ型阿片受体(KOR)真核表达载体,用于生物发光共振能量转移法(BRET)检测apelin受体和KOR之间的相互作用.方法:以质粒pcDNA3.1-KOR为模板,PCR方法扩增KOR.扩增的KOR用NotⅠ和XhoⅠ双酶切,同时用这两种酶双酶切质粒pRluc.将这两种酶切产物按常规方法连接、转化大肠杆菌Top10.挑取菌落培养,提取质粒,行酶切鉴定及测序.将测序正确的重组载体用脂质体法转染人胚胎肾(HEK293)细胞,免疫荧光染色,共聚焦显微镜观察.结果:扩增出了1条1143 bp的片段,与预期的KOR大小相符,质粒酶切结果显示pRluc-KOR被切成2条片段,其中一条为pRluc载体大小,另一条为目的片段大小.经测序鉴定,序列与GenBank(NM_000912)中的序列高度同源.共聚焦显微镜观察显示,阿片受体主要表达在细胞膜上.结论:构建成功了pRluc-KOR重组表达载体,此表达载体可用于检测KOR与apelin受体或与其他受体之间的相互作用.
- 李雅林白波陈京刘有旺刘海青于鹏丽
- 关键词：真核表达载体
- 响应面法优化丹参药渣多糖提取工艺及其抗氧化活性研究被引量：17
- 2017年
- 目的对丹参药渣中的多糖进行提取工艺优化,并研究其抗氧化活性。方法采用超声法提取丹参药渣中多糖;采用苯酚-硫酸法测定丹参药渣中多糖含量;在单因素试验基础上,采用Box-Behnken试验设计,以多糖提取率为响应值,优选丹参药渣多糖的提取工艺;采用DPPH自由基清除法测定其抗氧化能力。结果丹参药渣多糖的最佳提取工艺条件为超声波功率300W,提取时间82.27min,乙醇浓度75.46%,温度72.49℃。在此最佳提取条件下丹参药渣中多糖提取率为17.25%,理论值为17.36%,与理论值相对误差小于5%。在体外抗氧化活性研究中,当丹参残渣多糖的浓度达到2.0 mg/m L时,其对DPPH的清除率为90.82%,具有较强的体外抗氧化活性。结论采用超声提取法可以充分提取出丹参药渣中的多糖,为中药废弃物的再次利用提供了一条新途径。
- 刘佳妮王硕白米雪张公安张芮王宁高圆圆常正尧刘有旺李艳玲
- 关键词：药渣多糖响应面法抗氧化性
- 泰山山慈菇对小鼠肝癌的治疗作用及相关免疫机制研究被引量：7
- 2018年
- 目的探讨泰山山慈菇对小鼠肝癌的免疫治疗作用。方法本课题首先制备泰山山慈菇提取液,体外用山慈菇提取液对H22肝癌细胞进行干预,分为空白组、山慈菇提取液低、中、高剂量组和5-氟尿嘧啶阳性对照组,干预12h后,Annexin V和7-AAD染色,流式细胞术检测细胞凋亡。体内制备小鼠H22实体瘤肝癌模型,将50只小鼠分为山慈菇低、中、高剂量组、5-Fu阳性对照组、模型对照组,每组10只。山慈菇各剂量组均进行灌胃治疗,模型组灌胃等体积生理盐水,5-Fu阳性对照组进行等体积腹腔注射。连续10d,停药后次日摘取小鼠眼球取血后颈椎脱臼处死小鼠,检测小鼠肿瘤大小分析对肿瘤的抑制作用。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)和γ-干扰素(IFN-γ)的含量。结果泰山山慈菇提取液体外促进H22肿瘤细胞凋亡且具有剂量依赖性。体内抑制H22肿瘤的生长,增加血清中TNF-α、IL-2和IFN-γ的含量且呈现剂量依赖性。结论泰山山慈菇通过增加抗肿瘤细胞因子产生发挥抗肿瘤作用。
- 修朋程李腾李雅林刘纪豪李栋刘有旺
- 关键词：肝癌肿瘤坏死因子-Α白细胞介素-2Γ-干扰素
- Apelin/APJ系统研究进展被引量：5
- 2009年
- Apelin肽家族是由单个基因编码并能够激活7次跨膜G蛋白偶联受体APJ的一组内源性活性肽.Apelin/APJ系统在心血管调节中具有降低血压、强的心脏收缩作用;在中枢神经系统中具有调节垂体激素释放、调节摄食、摄水、体液平衡等作用;作为脂肪细胞分泌的一个新的脂肪因子(adipo-kine),可调节胰岛素的分泌;而且,最新的研究表明,apelin能够促进血管的生成.Apelin/APJ系统有望成为心衰、高血压等心血管疾病以及肥胖相关疾病的治疗靶点.这篇综述的目的是总结apelin/APJ系统的特点及功能,为进一步研究该系统提供理论依据和线索,为开发新的治疗性的药物提供有吸引力的靶点.
- 李雅林白波陈京刘有旺
- 关键词：APELIN脂肪因子血管生成心血管系统中枢神经系统
- 关于高校实验教学中安全问题的思考被引量：2
- 2009年
- 刘有旺方茜李雅林
- 关键词：教学学生保健服务
- 开展医学免疫学设计性实验的探索与实践被引量：2
- 2009年
- 为了培养学生的创新能力,泰山医学院免疫学教研室将设计性实验纳入实验教学大纲,并在实验教学中实施.通过实验设计,提高了学生的创新能力,培养了学生的团结协作精神,提高了学生的查阅文献能力,锻炼了学生的演讲能力等.同时,针对实验设计中存在的问题,提出了改进的措施.
- 李雅林刘有旺徐英萍宋文刚
- 关键词：免疫学设计性实验
