刘艳华
- 作品数:29 被引量:58H指数:4
- 供职机构:解放军第309医院更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项国家自然科学基金艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 重症继发性肺结核患者外周血单个核细胞c-Jun水平降低被引量:4
- 2015年
- 目的研究重症与轻症继发性肺结核患者c-Jun表达的差异,探讨其在重症继发性肺结核炎症反应和免疫损伤中的意义。方法用Affymetrix基因表达谱芯片筛选重症、轻症肺结核患者和正常健康者差异表达基因,并对差异基因进行生物信息学分析;用实时定量PCR(qRT-PCR)测定重症、轻症肺结核患者和健康者c-Jun相对水平;ELISA测定c-Jun在重症、轻症肺结核患者和健康者外周血单个核细胞(PBMC)中的蛋白水平。结果芯片筛选发现重症与轻症继发性肺结核患者存在大量差异表达基因,参与较多免疫反应和炎症反应通路,其中c-Jun表达下调2.27倍,参与61个信号通路;qRT-PCR结果显示,相比轻症继发性肺结核患者,c-Jun在重症继发性肺结核患者水平显著下调;ELISA检测也证实c-Jun表达在重症继发性肺结核患者有下调趋势,与芯片结果相符。结论重症与轻症继发性肺结核患者相比,c-Jun表达下调,c-Jun参与广泛的免疫反应和炎症反应通路,其下调与重症患者的免疫损伤有相关性。
- 苏瑾文刘艳华杨秉芬王若安红娟程小星
- 关键词:重症肺结核C-JUN免疫病理免疫反应
- 结核分枝杆菌Rv3425蛋白的原核表达纯化及其血清学诊断价值被引量:1
- 2013年
- 目的:用原核系统表达结核分枝杆菌Rv3425蛋白并纯化,评价该重组蛋白在结核病血清学诊断方面的价值。方法:以结核分枝杆菌H37Rv株基因组为模板,PCR扩增得到Rv3425基因序列,克隆至表达载体pET-28a中,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导、表达后纯化,用Western印迹和ELISA法进行抗原性初步评价。结果:在原核系统内经IPTG诱导表达后,Rv3425蛋白主要以包涵体形式存在,经复性和镍柱层析纯化后,纯度达95%以上;Western印迹和ELISA结果证明重组Rv3425具有较强的抗原活性;用纯化的Rv3425蛋白做抗原,临床诊断结核病人血清,阳性率达50%。结论:高纯度的Rv3425蛋白在结核病诊断方面具有很高的应用价值,可作为结核病诊断的备选抗原。
- 孙卫国李邦印刘艳华张灵霞熊志红程小星
- 关键词:结核分枝杆菌原核表达血清学诊断
- 肺结核患者单核细胞趋化蛋白的检测分析
- 目的:研究肺结核患者血浆单核细胞趋化蛋白(MCP-1)的浓度特点及外周血单核细胞(PBMCs)经结核分枝杆菌特异性抗原肽刺激后MCP-1和IFN-γ的表达及相关性。方法:16例活动期肺结核患者和10位PPD阳性健康对照,...
- 王心静程小星曹志红蒋静杨秉芬刘艳华
- 关键词:肺结核单核细胞趋化蛋白-1
- 人表皮生长因子的原核优势表达与复性被引量:2
- 2015年
- 目的:在原核系统中获得具有活性和高表达量的重组人表皮生长因子(rh EGF)。方法:对h EGF编码全序列进行优化,构建原核表达载体p ET-24b-h EGF,在大肠杆菌中表达rh EGF;对rh EGF包涵体进行复性,获得具有较高生物活性的重组蛋白。结果:构建了携带159 bp h EGF基因的表达载体p ET-24b-h EGF,rh EGF在原核系统内得到高表达,重组蛋白相对分子质量为6×103,表达量可占细菌总蛋白的15%,包涵体复性率达90%。结论:对h EGF的编码序列进行了优化,实现了其在原核系统内的高表达,通过复性获得了具有良好生物活性的rh EGF。
- 孙卫国杨栗坤熊志红杨秉芬刘艳华张灵霞
- 关键词:人表皮生长因子包涵体生物活性
- 活动性结核病患者黏膜相关恒定T细胞的特征及PD-的调节作用被引量:2
- 2015年
- 黏膜相关恒定T细胞(mucosal-associatedinvariant Tcells,MAITcells)是一类新的天然免疫样T细胞。人MAIT细胞的T细胞受体由恒定的Vα7.2-Jα3链及有限的B链组成,可通过特异性Vα7.2单克隆抗体及CD161分子鉴别。以往研究证明,MAIT细胞在细菌及真菌感染中起了关键的免疫保护作用,但在活动性结核病患者中的作用尚不清楚。
- 蒋静王心静安红娟杨秉芬曹志红刘艳华苏瑾文翟斐王若张广宇程小星
- 关键词:T细胞受体结核病患者活动性免疫保护作用天然免疫
- 活动性结核病患者和潜伏感染者细胞免疫应答特点及规律的研究
- 长期的流行病学研究显示,虽然结核感染人数众多,但只有5%~10%感染者最终发展为结核病,提示免疫系统在结核病的发生和发展中起了关键作用。了解结核病发病机制对高效疫苗的研制及结核病的治疗至关重要。抗结核免疫主要依赖细胞免疫...
- 程小星王心静蒋静刘艳华杨秉芬曹志红翟斐曹彦安红娟王若
- 关键词:结核细胞免疫
- 文献传递
- MS4A3蛋白作为标志物在诊断活动性结核病中的应用
- 本发明公开了MS4A3蛋白作为标志物在诊断活动性结核病中的应用。与健康人和结核潜伏感染者相比,活动性结核病患者的PBMCs中MS4A3基因的表达量显著增加;MS4A3基因的表达量可以用于区分活动性结核病患者和结核潜伏感染...
- 程小星杨秉芬翟斐安红娟曹志红刘艳华王若
- 文献传递
- 活动性结核病患者和潜伏感染者细胞免疫应答特点及规律的研究
- 程小星王若王心静蒋静刘艳华杨秉芬曹志红翟斐曹彦安红娟
- 关键词:结核细胞免疫
- 结核病患者外周血中iNKT细胞的数量显著降低被引量:4
- 2010年
- 目的:比较结核病患者和健康对照外周血iNKT细胞数量的差异,分析结核病患者伴发糖尿病对外周血iNKT细胞数量的影响。方法:采集37例结核病患者和12例健康志愿者的静脉血,用特异性抗体anti-Vα24-PE/anti-Vβ11-FITC标记iNKT细胞,流式细胞术(FCM)检测外周血中iNKT细胞的含量。结果:结核病患者和健康对照外周血iNKT细胞的百分含量分别为0.01%(0.24%/0.00%)和0.08%(0.19%/0.00%),差异显著(P<0.01)。伴发糖尿病的结核病患者和非糖尿病的结核病患者iNKT细胞的百分含量分别为0.015%(0.09%/0.00%)和0.01%(0.24%/0.00%),差异无统计学意义(P>0.05)。结论:结核病患者外周血中iNKT细胞数量明显减少,伴发糖尿病对结核病患者外周血iNKT细胞数量没有显著影响。
- 刘艳华王心静曹志红董梅佟爱华程小星
- 关键词:INKT细胞结核病外周血糖尿病流式细胞术
- 人血小板衍生生长因子BB亚型包涵体复性与纯化被引量:2
- 2018年
- 目的:优化人血小板衍生生长因子BB亚型(PGDF-BB)包涵体复性方法与纯化条件,获得具有较好生物活性的重组PGDF-BB蛋白。方法:对PGDF-BB包涵体以梯度尿素进行变性,选择最佳包涵体变性浓度;比较不同复性条件下的复性率,稳定PGDF-BB包涵体复性方法;参照该蛋白的理化性质,选择适合PGDF-BB重组蛋白的纯化方法。结果:原核系统内实现了PGDF-BB的高表达;通过优化包涵体复性方法,重组蛋白的包涵体复性率可达40%以上;经过多个纯化方法相结合,PGDF-BB的纯度达到95%。结论:通过实验条件的优化,提高了PGDF-BB包涵体复性率,获得高纯度、高生物活性的重组PGDF-BB蛋白。
- 孙卫国郑本献熊志红杨秉芬刘艳华张灵霞
- 关键词:包涵体复性纯化