单志新
- 作品数：343 被引量：572H指数：13
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学水利工程天文地球更多>>
- 氧化型低密度脂蛋白诱导巨噬细胞炎症因子表达被引量：1
- 2005年
- 目的:探讨氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)对培养的人巨噬细胞表达巨噬细胞移动抑制因子(macrophagemigrationinhibitory factor,MIF)、肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor,TNF-α)和单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)mRNA水平的影响.
- 林秋雄单志新余细勇杨敏林曙光Huiyao Lan
- 关键词：细胞炎症因子蛋白诱导单核细胞趋化蛋白MRNA水平
- 恶性疟原虫Pf332基因片段的分泌型、非分泌型真核表达重组质粒的构建被引量：1
- 2001年
- 目的 构建包含恶性疟原虫Pf332基因片段的分泌型、非分泌型真核表达重组质粒。方法 从FCC1/HN株基因组DNA中PCR扩增Pf332基因片段 ,P332 -RO、P332 -R1和P332 -R2 ;用PCR扩增法合成鼠IgG轻链隹号肽的编码序列。用定向克隆法分别构建分泌型重组质粒pcDNA3 -s -P332 -R0、pcDNA3 -s -P332 -R1、pcDNA3 -s -P332 -R2和非分泌型重组质粒pcDNA3 -s -P332 -R0、pcDNA3 -s -P332 -R1、pcDNA3 -s -P332 -R2。阳性克隆的重组质粒DNA经酶切、PCR扩增及测序鉴定。结果 PCR扩增得到特异的FCC1/HN株Pf332基因片段 ,P332 -R0、P332 -R1、P332 -R1,大小分别为 489、42 9和 393bp。用PCR扩增法合成 6 3bp的Balb/c小鼠IgG轻链信号肽的编码序列。酶切、PCR及测序鉴定表明获得了正确的含Pf332基因片段的分泌型、非分泌型重组质粒。结论 成功构建分别包含恶性疟原虫Pf332基因片段—P332 -R0、P332 -R1和P332 -R2的分泌型、非分泌型真核表达重组质粒。
- 单志新余新炳卞国武马长玲陈守义周永安
- 关键词：恶性疟原虫基因片段分泌型非分泌型真核表达重组质粒
- 雷诺嗪对犬肾内动脉收缩反应性的影响
- 2011年
- 目的雷诺嗪为pFOX(部分脂肪酸氧化酶)抑制剂,通过改变心脏代谢方式减少心脏需氧量,目前用来治疗慢性心绞痛的新型抗缺血药物,但是,其对血管的影响还不清楚,本研究探讨雷诺嗪对正常犬肾内血管张力反应的影响及其意义。方法将Beagle犬麻醉后,取下肾脏,显微操作分离肾内动脉制作离体动脉环,将动脉环固定于微血管张力测定仪的浴槽内,置于37℃通有混合气体(95%O_2+5%CO_2)的生理盐溶液中,平衡1小时后进行实验。分别测定雷诺嗪对离体血管在非受体依赖血管收缩剂(高K+)和受体依赖性药物(phe,U46619)诱导收缩反应下的张力影响。结果雷诺嗪可明显舒张大鼠在phe诱导下的肾血管收缩反应,无明显内皮依赖性,轻度降低高K^+诱导的收缩反应,但对U46619和Serotonin诱导的收缩反应无舒张作用。结论雷诺嗪能明显舒张血管作用,其机制与阻断α受体有关。
- 邓春玉邝素娟单志新李晓红林秋雄杨敏余细勇
- 关键词：雷诺嗪肾内动脉肾血管受体脂肪酸氧化
- miR-1/miR-206通过调控Hsp 60表达促进高糖诱导的心肌细胞凋亡
- 目的 miRNA是一种长度约为18～25 nt的非编码小RNA,存在于多种生物体中,每个miRNA都可能靶向单个或多个mRNA。miRNA可以与mRNA的3’非翻译区（UTR）结合并引发相应靶mRNA的降解或抑制靶蛋白的...
- 单志新林秋雄邓春玉朱杰宁麦丽萍符永恒谭虹虹林曙光余细勇
- 文献传递
- 建立缝隙连接蛋白43基因定点突变细胞株的研究
- 2011年
- 目的定点突变是通过聚合酶链式反应(PCR)等方法向目的 DNA片段中引入包括碱基的添加、删除、点突变等所需变化。体外定点突变技术是研究蛋白质结构和功能之间的复杂关系的有力工具,也是实验室中改造/优化基因常用的手段。连接蛋白43(connexin43,Cx43)是心脏表达最丰富的连接蛋白,主要分布在心室,其构成的缝隙连接(gapjunction,GJ)在心肌细胞中的电偶联中起着非常重要的作用。近年来的研究表明干细胞移植治疗心肌梗死时,细胞间电偶联障碍是导致心律失常副作用的一个重要原因。己知Cx43的磷酸化状态可以调节通道的功能,磷酸化常见的是368位点的丝氨酸磷酸化。我们对缝隙连接蛋白43基因(Cx43)的特定碱基进行定点改变,从而改变对应的氨基酸序列,并对表达产物进行研究,以利于将来探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)中转染突变的Cx43对其向心肌分化能力的影响,及其磷酸化状态是否对心律失常有调控作用。方法设计引物,sense:5'-CTTCAAGCAGAGCCAGCAGTCGTGCCAGCA-3',antisense:5'TGCTGGCACGACGACTGCTGGCTCTGCTTGAAG-3'。以已构建的Pcdh-Cx43为模板,使用Stratagene基因定点突变试剂盒进行PCR扩增,用DpnI酶识别甲基化位点并将其酶切,PCR产物转化后筛选阳性克隆,提取质粒测序验证。在293FT中与其它3个穿梭质粒一起包装,再将慢病毒颗粒转染BMSCs,用嘌呤霉素筛选出阳性克隆BMSCs-mCx43,在压力培养基下传代培养。用流式细胞仪检测BMSCs-mCx43的干细胞相关表面标记表达情况,同时用western blot检测BMSCs-mCx43的蛋白表达情况。结果测序结果显示突变位点正确,荧光照片显示90%的293FT表达绿色荧光。50%的BMSCs有绿色荧光蛋白的表达。流式细胞仪检测示BMSCs-mCx43细胞CD29阳性表达94%±0.8%,CD73阳性表达92%±0.7%,几乎不表达CD34和CD105,与未转染病毒的BMSCs和转染空病毒载体的BMSCs的表面标记一致。Western blot结果显示BMS
- 李晓红朱杰宁江雪燕江雪燕符永恒单志新林秋雄邓春玉邝素娟
- 关键词：定点突变技术缝隙连接蛋白基因定点突变丝氨酸
- 同种异体心肌细胞移植对大鼠梗死心肌修复作用的研究
- 2007年
- 目的观察同种异体心肌细胞移植对心肌梗死大鼠心肌的修复作用和心功能的影响。方法选取110只雄性SD大鼠用于制作心肌梗死模型,术后2周共存活53只,死亡57只。从53只建模成功的SD大鼠中随机选取30只分为3组(每组10只):心肌细胞移植组(A组)、培养液基质注射组(B组)和单纯心肌梗死组(C组)。A组将原代培养的乳鼠心肌细胞移植到心肌梗死区和梗死边缘区;B组采用与A组同样方法在心肌梗死区和梗死边缘区注射细胞培养液基质;C组不做任何处理。2周后观察A组移植细胞存活情况。采用Langendorff装置检测各组左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、左心室内压最大上升速率(+dp/dtmax)、左心室内压最大下降速率(-dp/dtmax)和左心室做功(LVW)。结果A组与B组及C组相比,LVSP分别从(47.9±4.6)mmHg和(47.6±3.9)mmHg升高到(52.0±3.0)mmHg(P<0.05或P<0.01);LVEDP分别从(18.8±2.7)mmHg和(24.7±5.8)mmHg降低到(15.8±1.5)mmHg(P<0.05或P<0.01);+dp/dtmax分别从(1 900±198)mmHg/s和(1 737±347)mmHg/s升高到(2 260±337)mmHg/s(P<0.05)。3组间-dp/dtmax和LVW比较差异无显著性(P>0.05)。A组大鼠的心肌中均发现移入的乳鼠心肌细胞,经5-溴脱氧尿核苷(BrdU)标记的免疫组化染色和抗心肌肌钙蛋白I抗体(anti-cTn I)标记的免疫组化染色证明移入的细胞是心肌细胞。结论异体移植的乳鼠心肌细胞可在心肌梗死区存活,并能改善心功能,尤其是改善左心室收缩功能。
- 冯建启余细勇符永恒林秋雄单志新郑猛
- 关键词：细胞移植心肌细胞心肌梗死
- 巨噬细胞移动抑制因子上调miR-29b,-29c表达抑制小鼠心肌纤维化
- 肖珍朱杰宁梁景南杨真祯符永恒张梦珍单志新
- 大蒜素对大鼠微血管张力的影响
- 目的观察大蒜素(Allicin)对大鼠离体肾内动脉经血管收缩剂预收缩张力的影响,探讨其对微血管的作用机制。方法显微操作下取SD大鼠肾内动脉,制备成1.8～2.0 mm长的血管条,用两根不锈钢丝穿过血管腔,固定于微血管测定...
- 邝素娟邓春玉张光燕饶芳单志新林秋雄杨敏余细勇钱卫民吴书林
- 文献传递
- 大鼠心脏干细胞的分离培养与初步鉴定
- 目的建立分离培养成年大鼠心脏干细胞的方法并作初步鉴定。方法取成年SD大鼠脱臼处死,常规消毒,无菌环境下迅速分离大鼠心脏,用D-Hank’s液冲洗,去掉心脏血管和结缔组织,取心室肌用剪子将其剪成约1mm大小的碎块放入装有磁...
- 林秋雄单志新麦丽萍朱杰宁邓春玉邝素娟李晓红符永恒杨敏余细勇
- 文献传递
- T载体的构建及在恶性疟原虫RAP2基因克隆中的应用研究
- 2000年
- 目的 构建PCR产物高效克隆载体T载体 ,并应用于克隆恶性疟原虫RAP2基因。方法 PUC18用SmaI酶切纯化后 ,与dTTP在 70℃孵育 3h ,构建T载体。另设计一对特异引物 ,采用PCR方法从恶性疟原虫FCC1/HN株基因组DNA中特异扩增RAP2基因 ,并将其克隆入T载体 ,重组克隆经蓝白斑初筛后 ,再用双酶切及PCR法进行鉴定。结果 从恶性疟原虫基因组DNA中特异扩增出大小为 12 15bp基因片段 ,与预期长度相符。克隆入T载体后的重组克隆经双酶切及PCR鉴定均正确无误。结论 成功构建T载体 ,并获得阳性重组克隆T -RAP2 。
- 李学荣余新炳单志新马长玲
- 关键词：恶性疟原虫T载体聚合酶链反应克隆
