古钦民
- 作品数：68 被引量：175H指数：8
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- 149例唇腭裂患儿弓形体抗体检测的研究
- 1989年
- 本文应用滤纸干血滴酶联允疫吸附试验(ELISA)对山东部分城市农村地区149例10岁以内唇腭裂患儿进行弓形体抗体检测,阳性率为30.2%;其中1岁以内患儿66人,阳性率为25.76%,而1岁内正常健康小儿阳性率为6.25%,两组间阳性率有非常显著的意义(P<0.01)。提示弓形体感染可能是辱腭裂发生的不可忽视的因素之一。
- 庄炤霞孙涌泉赵华强林志勇彭化海刘云生袁奎封姜宏敏古钦民李瑛
- 关键词：唇腭裂弓形体ELISA
- 弓形虫感染对先天颅面畸形的影响
- 1998年
- 用酶联免疫吸附试验检测53例先天颅面畸形患儿弓形虫特异性抗体IgM和IgG,阳性率分别为9.43％和11.32％,对照组为2.70％,两组间有显著性差异;患儿母亲的职业、生活习惯及有无与猫密切接触史也有显著性差异(P<0.05)。提示先天颅面畸形病因中,弓形虫感染可能是重要因素之一。
- 庄炤霞李瑛黄勇古钦民
- 关键词：弓形虫感染ELISAIGM
- 弓形虫抗原与霍乱毒素A2/B亚基复合基因在小鼠体内诱导的免疫反应被引量：3
- 2005年
- 目的 观察弓形虫主要表面抗原SAG1、SAG2 与霍乱毒素A2 /B亚基复合基因真核质粒经肌肉免疫小鼠所诱导的免疫反应。方法 将SAG1基因、SAG2 基因及CTXA2 /B基因定向连接插入真核表达质粒pcDNA3.1,经酶切及测序,获得pcDNA3.1 SAG1 SAG2 及pcDNA3.1 SAG1 SAG2 CTXA2 /B的重组子;碱裂解法大量制备经肌肉注射免疫BALB/c鼠,每只鼠经后腿肌肉注射质粒10 0 μg ,每2周免疫1次,共3次,以PcDNA3.1空质粒注射组及PBS组为对照,分别于每次免疫前断尾取血和免疫后4周取小鼠脾脏测定T淋巴细胞增殖活性及NK细胞活性,ELISA法测定IgG抗体。结果 免疫组小鼠的IgG抗体水平明显提高,NK细胞杀伤活性和T细胞增殖活性也明显增强。免疫鼠抗攻击感染的时间延长。结论 含有霍乱毒素的复合基因免疫小鼠后体液免疫和细胞免疫水平均有提高。
- 丛华古钦民江渊周怀瑜何深一杨婷婷李瑛赵群力
- 关键词：弓形虫DNA免疫
- 小鼠口服弓形虫DNA混合疫苗的免疫保护反应被引量：8
- 2005年
- 目的观察携带弓形虫表面抗原复合基因重组沙门氏菌经口免疫BALB/c小鼠所诱导的免疫反应。方法构建弓形虫主要表面抗原SAG1、SAG2复合基因真核表达质粒,将其转入减毒鼠伤寒沙门氏菌BRD509(BRD509/pSAG1/SAG2),经口服免疫BALB/c小鼠,以携带空载体质粒的减毒沙门氏菌BRD509及生理盐水(NS)组为对照,分别于每次免疫前和免疫后断尾取血,并于末次免疫后第4周取小鼠脾脏测定T淋巴细胞增殖活性、天然杀伤细胞(NK细胞)活性和T细胞亚群;ELISA法测定IgG抗体及血清中的细胞因子干扰素(IFN-γ),白介素-4(IL-4)。与末次免疫后4周,每只小鼠腹腔注射0.1ml(105)弓形虫RH株速殖子攻击,观察小鼠存活时间。结果免疫组小鼠的IgG抗体水平明显提高,滴度为1∶100;NK细胞杀伤活性和T细胞增殖活性也明显增强,其中NK细胞杀伤活性为85%±7%,T细胞增殖指数为2.83,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。免疫鼠攻击感染后平均存活时间比对照组长5d。结论弓形虫口服DNA混合疫苗可诱导小鼠产生保护性免疫。
- 丛华古钦民周怀瑜郭岚杨婷婷何深一李瑛赵群力
- 关键词：弓形虫
- 新生儿脐带血弓形体抗体检测的研究被引量：2
- 1989年
- 应用SPA-ELISA对405名新生儿脐带血进行弓形体抗体测定,结果121份脐带血呈阳性反应,阳性率为29.88%,其中199份进行血清与滤纸干血滴的测定,血清与血滴的符合率为100%。本次妊娠中,阳性组死胎发生率明显高于阴性组,P<0.05,有显著意义;在既往妊娠中,阳性组流产、早产发生率明显高于阴性组,P<0.01,有特别显著意义。但产妇三个年龄组间、初产妇与经产妇间、产妇各职业组间均无显著差异。
- 古钦民李瑛徐贞光邹玲邹玲
- 关键词：脐带血弓形体抗体婴儿
- 酶联免疫吸附试验检测人血清弓形体IgG、IgM抗体的研究被引量：8
- 1989年
- 对ELISA检测人血清弓形体IgG、IgM抗体进行了研究。450份孕妇血清中,ELISA阳性率显著高于IHA;抗体滴度分折,ELISA一般高于IHA2～10倍。25份ELISA IgG抗体阳性血清,IFA检出19份;3份IgM抗体阳性和2份IgG、IgM抗体均阳性血清,IFA分别检出2份。2份阴性和4份含不同抗体滴度的阳性血清于第一次测定后,第7天和第21天测定的阴、阳性结果一致,OD值变异系数为2.43～16.52％。39份阳性血清抗体滴度与OD值呈直线比例关系(r=0.991,P<0.0005)。结果表明,ELISA用于弓形体感染的血清学诊断具有较好的实用性。
- 赵仲堂郝风荣古钦民潘玉珍张桂宁
- 关键词：ELISA血清学诊断弓形体IGG
- 全文增补中
- 弓形虫表面抗原P22、P30复合基因在原核细胞中表达的研究被引量：12
- 2002年
- 目的 :对含有P2 2、P30复合基因的重组菌进行IPTG诱导表达 ,进而检测复合基因的融合表达产物的免疫活性。方法 :用IPTG对工程菌进行诱导表达 ,表达产物行SDS PAGE蛋白凝胶电泳及Western Blot免疫印记检测。结果 :蛋白电泳结果显示 ,阳性重组菌比阴性菌在 6 6 .5KDa位置上明显多一条带 ,此条带可与P30抗体结合并使免疫印记显示阳性结果。结论 :含有P2 2、P30基因片段的质粒重组体经诱导表达出融合蛋白 ,其内的组分蛋白P30具有与其相应抗体结合的能力。
- 古钦民王伟卞继峰丛华胡海燕何深一李瑛
- 关键词：弓形虫基因P30基因P22
- 弓形虫主要表面抗原基因克隆及在大肠杆菌中的表达
- 1999年
- 为在大肠杆菌中表达弓形虫主要表面抗原（ＳＡＧ１），进一步研究其生物学功能。将ＳＡＧ１基因重组于ｐＧＥＭＥＸ－１融合型表达载体上，转化大肠杆菌ＪＭ１０９（ＤＥ３），得到含重组表达质粒ｐＧＥＭＥＸ－１／ＳＡＧ１的工程菌。结果表明ＩＰＴＧ诱导表达后，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ检测证实含有ＳＡＧ１蛋白。提示ｐＧＥＭＥＸ－１大肠杆菌系统可以表达具有免疫活性的ＳＡＧ１蛋白。
- 陈慧红古钦民卞继峰
- 关键词：弓形虫表面抗原基因克隆大肠杆菌PCR
- 弓形虫SAG1-SAG2复合DNA疫苗免疫小鼠诱导的免疫保护性被引量：11
- 2006年
- 目的利用已构建的弓形虫主要表面抗原SAG1DNA疫苗及SAG1-SAG2复合DNA疫苗,接种BALB/c小鼠,观察疫苗的免疫保护性。方法将两核酸疫苗分别通过肌肉注射免疫小鼠,对照组注射pcDNA3.1空质粒。ELISA法检测血清IgG抗体及细胞因子IL-2、IFN-γ和IL-4;用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定免疫鼠脾脏NK细胞杀伤率;流式细胞仪测定T细胞亚群;用弓形虫速殖子腹腔攻击感染小鼠,观察小鼠的生存时间。结果SAG1-SAG2组小鼠IgG抗体、IFN-γ、IL-2及CD4+/CD8+细胞比例均高于SAG1组(P<0.05);各组均未检测到IL-4;复合DNA疫苗组感染弓形虫后生存时间较单基因组延长(P<0.01)。结论弓形虫SAG1-SAG2复合DNA疫苗较SAG1单基因疫苗具有更好的免疫保护性。
- 孙怡何深一丛华杨婷婷周怀瑜古钦民李瑛赵群力
- 关键词：弓形虫复合基因DNA疫苗
- 含有弓形虫表面抗原P22、P30复合基因的载体构建被引量：2
- 2002年
- 目的 选择弓形虫表面抗原P2 2、P30的有效基因片段 ,共同构建在同一克隆载体pUC19和表达载体 pGE MEXTM- 1上 ,并保证其连接方向及开放读码框的正确。方法 根据已发表P30基因序列 ,用PCR技术调取所需基因片段 ,P2 2基因片段来自重组质粒pGEX - 2T -v2 2 ,将两片段定向克隆于克隆载体 pUC19及表达质粒pGEMEXTM- 1上 ,用酶切及测序的方法对重组子进行鉴定。结果 酶切产物经电泳显示条带清晰 ,P2 2、P30基因片段的泳动位置分别在 4 4 6bp和 86 0bp的位置 ,与预计结果一致 ;测序结果表明插入的复合基因片段方向及序列均正确。结论 成功构建的含有P2 2、P30基因片段的质粒重组体 ,保证了两基因连接方向、序列及开放读码框的正确 ,为今后两基因的进一步复合表达研究奠定了基础。
- 王伟古钦民刘师莲何深一胡海燕李瑛卢翌耿昭
- 关键词：弓形虫P30基因
