周世豪
- 作品数：8 被引量：59H指数：4
- 供职机构：中山大学中山医学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生文化科学自动化与计算机技术生物学更多>>
- 血管抑制因子在前列腺癌及前列腺增生组织中的表达及意义被引量：3
- 2006年
- 【目的】探讨前列腺增生(BPH)和前列腺癌(PCa)组织中血管增生抑制因子,如视网膜色素上皮细胞源因子(PEDF)、血管抑素(angiostatin)、内皮抑素endostatin的表达情况及其血管依赖性生长的分子机制。【方法】收集正常前列腺、前列腺增生和前列腺癌组织标本,RT-PCR技术检测样品中PEDF、angiostatin、endostatin的mRNA表达量,Westernblot技术检测样品中PEDF蛋白的表达量。【结果】和正常前列腺组织相比,PEDF表达量在BPH中无明显变化(P>0.05),在前列腺癌中普遍显著下降(P<0.05);良性前列腺增生组织中endostatin表达量较正常前列腺组织显著升高(P<0.05),前列腺癌比正常前列腺显著升高(P<0.05),而且前列腺癌组织较良性前列腺增生进一步显著增高(P<0.05);三种组织中均未检测到angiostatin的表达。【结论】良性前列腺增生及前列腺癌组织抑制因子表达变化可能和其血管依赖性生长相关;PEDF可能是前列腺组织最主要的血管增生内源性抑制因子。
- 杨中汉李朝阳杨霞蔡卫斌王青松周世豪邓春华高国全丘少鹏
- 关键词：前列腺增生前列腺癌血管增生
- 纤溶酶原K5抗血管增生活性依赖其完整Kringle结构域被引量：6
- 2006年
- 根据K5蛋白(Pro451—Ala541)的结构特征和二硫键分布特点,设计K5的两个缺失突变体K5 mut1(Cys461—Cys540,保留K5 kringle环3个完整二硫键但去除N端和C端多余氨基酸)和K5mut2(Cys482—Cys535,打开kringle环,只保留2个二硫键).以野生型人纤溶酶原K5 cDNA为模板,用PCR方法得到编码缺失突变体的DNA片段,定向克隆入pET22b(+)质粒载体,重组体转化进大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达,产物经亲和层析和高浓度甘油透析纯化后进行鉴定和生物活性测定.K5 mut1蛋白特异性抑制人视网膜微血管内皮细胞增殖,且活性强度是完整的K5蛋白2倍;K5mut2对人视网膜微血管内皮细胞无显著抑制作用.结果提示,完整的Kringle结构(包含3个二硫键)是维持人纤溶酶原K5抗血管增生活性的必需结构域,而K5分子中Kringle结构域外的N端和C端氨基酸臂则并非其活性所必需.
- 李朝阳蔡卫斌杨中汉杨霞宋志宏周世豪李明友刘祖国高国全
- 关键词：纤溶酶原KRINGLE缺失突变体
- 凝胶迁移阻滞法分析人类端粒酶的DNA结合特性被引量：2
- 2005年
- 目的采用凝胶迁移阻滞法分析研究人类端粒酶DNA结合特性。方法以地高辛标记的人端粒序列寡核苷酸与人端粒酶提取物进行结合反应,以未参与结合反应的单纯标记寡核苷酸作为参照。实验所设的3组样品中,第一组和第二组标记寡核苷酸加端粒酶,第一组显示一条阻滞性条带,第二组显示两条条带,前方的一条与第一组条带平行,为单纯探针条带,后方的一条迁移率被阻滞,应为探针与纯化的蛋白复合体相结合的结果;第三组为标记寡核苷酸加端粒酶阴性洗涤液,只显示单一探针条带。结果只有人端粒序列寡核苷酸与人端粒酶提取物结合反应管显示特异的凝胶迁移阻滞性电泳条带。结论人端粒酶具有和端粒DNA片段结合的特性。
- 周俊宜周俊梅谢金卫周世豪杜贻鹏谢奇峰陶莎罗超权
- 关键词：端粒酶
- 生物化学动画库的构建及其应用被引量：14
- 2006年
- 针对生物化学学科特点和Flash独特的优势,结合教学实际,构建了生物化学Flash动画库,提供了一批形象直观的动画,并应用于生物化学的教学实践,充分显示了Flash在提高生物化学教学质量方面所具有的潜力。
- 宋志宏吴喜链高国全陶莎周世豪马涧泉
- 关键词：生物化学教学
- 人纤维蛋白溶酶原kringle5(K5)抑制小鼠肝癌的血管生成和肿瘤生长被引量：6
- 2005年
- 【目的】体内、体外实验观察人纤维蛋白溶酶原kringle5(K5)对肝癌血管生成和肿瘤生长的影响。【方法】大肠杆菌中表达,组氨酸结合柱亲和层析、纯化获得K5蛋白,SDS-PAGE和Westernblot方法鉴定K5蛋白的表达;MTT法分析K5对牛视网膜毛细血管内皮细胞(BRCEC)和肝癌细胞株Bel-7402、HepG2增殖的影响;建立皮下种植肝癌鼠模型,瘤内注射K5,检测抑瘤率及肝癌组织微血管密度(MVD)。【结果】SDS-PAGE及Westernblot鉴定获得K5纯化蛋白;K5特异性地抑制BRCEC的增殖,IC50=160nmol/L,而对肝癌细胞株Bel-7402、HepG2的增殖无抑制作用;K5显著抑制小鼠肝癌生长,治疗组肝癌组织MVD明显低于对照组。【结论】K5抑制移植性小鼠肝癌血管生成和肿瘤生长,特异性抑制血管内皮细胞的增殖可能是K5抑制肝癌血管生成的主要机制。K5具有治疗肝癌的潜在临床价值。
- 刘倩平杨霞李朝阳杨中汉蔡卫斌宋志宏葛啸虎周世豪高国全
- 关键词：纤维蛋白溶酶原血管生成肿瘤生长小鼠肝癌HEPG2增殖
- 人纤溶酶原K5突变体Ⅰ的构建及其在大肠杆菌中的表达与纯化被引量：3
- 2004年
- 【目的】 构建人纤溶酶原Kringle 5(K5)的突变体Cys461-Cys540(K5 mut1),在大肠杆菌中表达,亲和层析纯化,为探讨K5抗血管增生活性与Kringle结构域的关系提供基础?【方法】 以K5全长cDNA为模板用PCR的方法扩增人纤溶酶原K5 mut1基因,将其克隆进表达载体pET-22b(+)中,并用限制性核酸内切酶酶切和DNA测序鉴定其连接正确;pET-22b(+)/K5 mut1 转化大肠杆菌BL21(DE3), IPTG诱导表达,表达产物用固化Ni2+-His Bind Resin亲和层析方法纯化,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blot方法分析鉴定?【结果】 PCR扩增获得258 bp的人纤溶酶原K5 mut1基因片段,正确插入pET-22 b(+)载体,在大肠杆菌中该基因编码蛋白的表达量占菌体总蛋白13%左右;SDS-PAGE显示其相对分子质量Mr≈14.1×103,Western blot证实该表达蛋白为K5 mut1重组蛋白,经亲和层析后K5 mut1重组蛋白纯度大于90%,获得率约为10 mg/L?【结论】 成功构建人纤溶酶原K5 mut1,实现在大肠杆菌中高效表达,亲和层析纯化获得较高纯度K5 mut1重组蛋白?
- 蔡卫斌李朝阳杨中汉骆晓枫周世豪李民友刘祖国高国全
- 关键词：纤溶酶原基因突变大肠杆菌血管增生
- 银杏内酯B对谷氨酸诱导脑皮质神经元凋亡及Ca^(2+)超载的影响被引量：25
- 2005年
- 目的:观察银杏内酯B对谷氨酸诱导培养脑皮质神经元凋亡的拮抗作用,并探讨这种作用与神经细胞内游离Ca2 + 浓度改变的关系。方法:采用改良的方法原代培养胎小鼠脑皮质神经元,用噻唑兰(MTT)法检测神经元的存活情况;细胞凋亡采用形态学观察、DNA琼脂糖凝胶电泳法和Hoechst332. 5 8核染色方法进行分析;用Fura - 2 /AM荧光指示剂法测定细胞内Ca2 + 浓度。结果:谷氨酸(0 .8mmol/L)能诱导神经细胞凋亡和胞内Ca2 + 超载,银杏内酯B(10 - 2 5 0 μmol/L)能减轻谷氨酸所致的细胞损伤,表现为神经元存活率提高,细胞形态的恢复和DNA断裂减少。结论:银杏内酯B可拮抗谷氨酸所致的神经细胞毒性作用,这可能与其能竞争PAF受体并降低神经细胞内[Ca2 + ]从而抑制谷氨酸诱导的神经元凋亡有关。
- 蔡卫斌杨中汉李朝阳宋志宏周世豪骆晓枫高国全
- 关键词：银杏内酯B谷氨酸脑皮质神经元凋亡CA^2+超载
- 分子生物学网络课程的设计与构建被引量：4
- 2007年
- 分子生物学因其深奥的理论和抽象的思维,让教师觉得难教,让学生觉得难学。因此,借助网络教学支撑环境和现代教育技术建立一门形象、直观、简洁、易懂的《分子生物学》网络课程将有助于提高教师的教学质量和学生的学习效果。本研究以《现代远程教育资源建设技术规范》为指导,以分子生物学规划教材和大纲为制作依据,进行网络课程内容和形式的设计与构思。
- 蔡卫斌徐祖敏周世豪高国全
- 关键词：分子生物学网络课程网页脚本素材
