周志成
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 供职机构：南方医科大学生物技术学院更多>>
- 发文基金：广东省医学科学技术研究基金广州市科技计划项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 间日疟原虫乳酸脱氢酶单克隆抗体的制备及其鉴定被引量：6
- 2010年
- 目的研制间日疟原虫乳酸脱氢酶(PvLDH)单克隆抗体,并对抗体特性进行了初步鉴定。方法用纯化的重组PvLDH蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞,测定其免疫球蛋白亚类及效价,结合ELISA、Western blot试验分析其特异性。结果共获得5株稳定分泌抗PvLDH重组蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别为6D1、6D2、5A10、5C7、4A8。5株单抗培养上清的ELISA效价为1∶512～1∶1024,腹水效价为1∶12800～1∶25600,其中5C7、6D1经Western-blot鉴定能与天然的恶性疟原虫和间日疟原虫的LDH发生特异性反应。结论本研究方法成功制备并获得了针对PvLDH的单克隆抗体,为进一步研究疟疾诊断试剂奠定了基础。
- 孙莉李明吴英松周志成廖小青郝文波
- 关键词：间日疟原虫乳酸脱氢酶单克隆抗体
- 间日疟原虫乳酸脱氢酶GST融合表达载体的构建及表达
- 2010年
- 目的构建间日疟原虫乳酸脱氢酶(PvLDH)融合表达载体,并表达PvLDH的GST融合蛋白。方法将PvLDH基因片段克隆到表达载体pGEX-4T-1中,构建PvLDH/pGEX-4T-1融合表达载体,IPTG诱导表达目的基因,SDS-PAGE电泳分析表达产物,Western blot检测其抗原性。结果成功构建了PvLDH/pGEX-4T-1融合表达系统,在大肠杆菌BL21中以包涵体形式高效表达,表达产物能与恶性疟原虫和间日疟原虫感染患者血清反应,而不与正常人血清反应。结论间日疟原虫LDH蛋白在大肠杆菌中获得高效表达,表达产物具有良好的抗原性。
- 周志成孙莉吴英松廖小青郝文波
- 关键词：间日疟原虫乳酸脱氢酶
- 抗间日疟原虫乳酸脱氢酶单克隆抗体的制备与鉴定
- 疟疾ICT试剂盒为疟疾的快速诊断提供了一种新的有效方法,课题组前期已经成功建立了恶性疟的ICT检测方法,为实现恶性疟盒间日疟的同时诊断,关键是获得能特异性针对间日疟原虫的单克隆抗体。本研究以前期表达、纯化的间日疟原虫乳酸...
- 郝文波孙莉周志成吴英松李明
- 文献传递
- INHBA基因多克隆抗体的制备与鉴定
- 2010年
- 目的INHBA的表达、纯化及多克隆抗体的制备;对纯化的抗原的初步鉴定。方法利用基因重组技术获得INHBA基因,将其构建到原核表达系统,并分离纯化得到分子量为64 kD的带有组氨酸标签的重组INHBA融合蛋白,用分离纯化后的INHBA融合蛋白作为抗原免疫,获得抗INHBA的多克隆抗体。结果成功地获得INHBA基因,并且以包涵体的形式表达于大肠杆菌中,用间接酶联免疫吸附(ELISA)方法,Western blot检测结果显示,该抗体能特异性地与胎盘组织产生明显免疫亲和反应。结论建立原核高效稳定INHBA表达系统,并对其做了初步的鉴定,为进一步获得高特异性的抗体奠定基础。
- 曾玉坤李月王穗海周志成李明
- 关键词：融合蛋白克隆表达WESTERNBLOT
- 疟原虫免疫胶体金试剂盒的研制及性能评价被引量：3
- 2010年
- 疟疾是严重威胁人类生命和健康的世界性公共卫生问题。WHO将发展准确、快速诊断疟疾的技术视为防治疟疾优先考虑的对策之一。疟疾一般发生在贫困地区，方便和价廉是卫生保健工作者首先要考虑的因素。因此，利用免疫层析试条技术开发快速诊断疟疾试剂盒，能更好地满足患者需求，具有良好的应用前景。
- 周志成郝文波吴英松章平郝芬李明
- 关键词：免疫层析试条疟原虫卫生保健工作者公共卫生问题
