周玉娟
- 作品数：8 被引量：8H指数：2
- 供职机构：清华大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 基于珠母贝外套膜分泌物的珍珠质基质蛋白及其制备方法
- 基于珠母贝外套膜分泌物的珍珠质基质蛋白及其制备方法，该珍珠质基质蛋白有以下方法制得：将珠母贝外套膜的中心部分从贝体上分离，得到外套膜原料；将外套膜原料放入PBS溶液，低温下浸泡后，将得到的溶液离心分离，收集上清液，得到外...
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- 文献传递
- 大鼠N型钙通道ⅢP区原核表达、纯化及活性研究(英文)
- 2009年
- 高保真PCR克隆出编码大鼠海马组织N型钙通道α1B亚基ⅢP区的DNA序列,分别与表达载体pET28b和pGEX-4T-1连接,转化入能补充稀有密码子tRNAs的大肠杆菌Rosetta菌株中,通过优化表达条件,实现了高效诱导表达.再通过低温诱导,将包涵体用尿素溶解再稀释后透析法复性、酶切、亲和柱层析等方法得到较纯的可溶性目的蛋白HIS-Cav22P、GST-Cav22P和Cav22P,紫外吸收光谱检测实验证明了重组蛋白HIS-Cav22P能和钙离子可逆地结合.最后通过GST沉降实验证明了芋螺毒素SO3与Cav22P存在体外相互结合作用.上述结果为揭示芋螺毒素SO3特异性阻断大鼠海马组织N型钙流的分子机制提供了直接的依据,也为建立筛选新的非吗啡型天然镇痛药物的技术平台提供了基础.
- 周玉娟谢莉萍张荣庆
- 关键词：纯化
- 合浦珠母贝外套膜外上皮细胞的分离方法
- 本发明涉及合浦珠母贝外套膜外上皮细胞的分离方法，属于组织细胞培养分离技术领域。主要包括以下几个步骤：(1)配制Percoll梯度溶液：将9份Percoll原液与1份D－MBSS混合，得到100％Percoll溶液；将10...
- 张荣庆谢莉萍上官俊龙李琪刘晓军周玉娟
- 文献传递
- 合浦珠母贝外套膜细胞engrailed、BMP2和Smad3的mRNA表达水平的相关性(英文)被引量：3
- 2010年
- 软体动物engrailed蛋白和骨形成相关蛋白对胚胎贝壳区域边界形成可能具有重要作用,engrailed还被推测为调节基质蛋白在外套膜组织区域化表达的重要调控因子.因此,弄清调控engrailed在软体动物中特征表达的分子机制有着重要的研究意义.但是,由于贝类基因组测序尚不完整,目前也没有建立获得贝类细胞系,以致于许多预测可能参与调控的基因需要通过克隆来鉴定,而且经典的研究细胞信号通路的方法也很难得到应用.目前,在中国南海广泛养殖的合浦珠母贝中,已获知其BMP2和Smad3的cDNA全长,以该贝的基因组为模板,PCR扩增获得了一段engrailed编码区片段.经软件分析,该片段含有EH4结构域,且与其他物种engrailed蛋白具有很高的同源性.研究的贝中,特别是外套膜组织中,engrailed、BMP2和Smad3三者表达之间的相关性,将有助于我们理解贝壳形成的分子机制.贝壳缺刻后半定量PCR试验结果表明,三者均参与贝壳修复,且在贝壳缺刻后的修复过程中,engrailed和Smad3的mRNA表达变化规律非常相似,提示它们之间可能存在相互影响的联系.用地塞米松(DXM)和过氧化氢(H2O2)分别处理原代培养的贝外套膜组织迁出细胞,实时相对定量PCR检测engrailed、BMP2和Smad3的mRNA表达水平,统计分析结果表明,三者具有显著的相关性.上述所有结果为进一步研究贝类生物矿化的发育和信号转导机制提供了新的思路和基础.
- 周玉娟何作鑫李长忠向亮朱方捷张贵友谢莉萍张荣庆
- 关键词：ENGRAILED合浦珠母贝SMAD3BMP2实时PCR
- 鉴定矿化刺激因子的基质蛋白单克隆抗体及鉴定方法
- 鉴定矿化刺激因子的基质蛋白单克隆抗体及鉴定方法，该单克隆抗体专一性识别合浦珠母贝基质蛋白；其鉴定方法为：将合浦珠母贝的外套膜细胞培养得到原代培养的培养基，将需鉴定的刺激因子，分别加入该培养基中，再培养得到细胞培养基；采用...
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- 文献传递
- 合浦珠母贝抗体活体注射实验方法
- 合浦珠母贝抗体活体注射实验方法，将合浦珠母贝置于人工海水中饲养，留用健康个体；制取与矿化相关的可溶性基质蛋白抗体，并纯化该抗体；按比例，将纯化抗体注射到注射组健康个体的体内，对照组等量注射未免疫的兔血清；将注射后的健康个...
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- 文献传递
- 合浦珠母贝TGFβ信号通路相关基因的克隆及功能研究
- 合浦珠母贝(Pinctada fucata)中已被鉴定的基质蛋白多达数十种,它们参与一系列贝壳和珍珠形成的过程。因此,研究贝中信号通路对基质蛋白表达的调控作用,将为软体动物生物矿化分子机制的研究提供一个新的突破口。本研究...
- 周玉娟
- 关键词：合浦珠母贝TGFΒSMAD3基质蛋白启动子
- 一种合浦珠母贝组织培养方法
- 本发明涉及一种合浦珠母贝组织培养方法，属于是关于合浦珠母贝组织细胞培养技术。所述方法主要含有(1)组织块取材：将合浦珠母贝表面消毒，在无菌操作台内将闭壳肌割开，取目的组织；(2)消毒和清洗：用纸片将组织表面的粘液沾去，消...
- 张荣庆谢莉萍李琪上官俊龙刘晓军周玉娟
- 文献传递
