孔繁斗
- 作品数：54 被引量：129H指数：6
- 供职机构：大连医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：辽宁省教委科研基金辽宁省自然科学基金辽宁省教育厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 酵母双杂交系统筛选与RapGAP相互作用的蛋白质
- 2015年
- 目的筛选与Rap GAP相互作用的蛋白质,为进一步研究人源Rap1GAP介导的信号转导通路、揭示其与肿瘤的关系提供实验依据。方法选用与Rap1GAP同源的来自美丽线虫的Rap GAP作为饵蛋白,以来源于美丽线虫的c DNA文库作为靶蛋白,应用p PC97、p PC86组成的酵母双杂交系统筛选c DNA文库中与Rap GAP相互作用的蛋白质。结果通过营养缺陷平板（-LTH）筛选出63个拟似阳性菌落。经过Lac Z鉴定,19个菌落为阳性,其中7个为强阳性。提取来自19个酵母菌落中的重组DNA,经PCR扩增,12个菌落出现阳性结果。将该19个重组DNA分别电转化入DH5α细菌,涂板培养后,每板挑取4~10个克隆,通过Sal I和Not I双酶切鉴定进行阳性克隆筛选。将阳性克隆的重组DNA进行序列测定。测序结果与Gen Bank比较,其中4个克隆的DNA片段为Y39b6a基因片段、2个为Rap GAP、1个为苯丙氨酸-4-羟化酶、1个为细胞色素C氧化酶,还有1个DNA片段编码美丽线虫特有的小分子蛋白的基因片段,其余11个DNA片段不编码已知蛋白质。结论初步筛选出与Rap GAP相互作用的蛋白质,特别是其中有2个克隆为Rap GAP,提示Rap GAP可能以二聚体的方式存在。
- 苗小艳孔繁斗石敏Bos JL赵春艳
- 关键词：酵母双杂交
- 宫颈癌VEGF-C表达和淋巴管、血管生成关系的探讨
- 2005年
- 目的:检测宫颈癌组织中血管内皮生长因子-C(VEGF-C)、受体VEGFR-3和CD34的表达,探讨VEGF-C与癌周淋巴管、血管生成和肿瘤转移的关系。方法:采用免疫组化法检测55例宫颈癌组织中VEGF-C、VEGFR-3和CD34的表达。结果:55例宫颈癌组织VEGF-C阳性率为69.1%(38/55),VEGFR-3阳性率为61.8%(34/55),二者表达高度一致(P<0.01)。淋巴结转移组中VEGF-C与VEGFR-3阳性表达明显高于无转移组(P<0.05)。低分化组VEGF-C和VEGFR-3的表达明显高于高、中分化组(P<0.05)。随着临床分期增加,VEGFR-3表达的阳性率增高(P<0.01)。淋巴结转移组中淋巴管密度(LMVD)明显高于无转移组(P<0.01)。VEGF-C表达阳性的组织中血管密度(MVD)明显升高(P<0.05)。VEGF-C和VEGFR-3表达阳性的患者生存率有降低的趋势。结论:宫颈癌中VEGF-C通过受体VEGFR-3促进组织生长、抑制分化,促进肿瘤细胞间质淋巴管和血管生成,是促使宫颈癌发生扩散和转移的重要原因。二者阳性表达可预示预后不良。
- 王敬民孔繁斗赵丽嫣
- 关键词：血管内皮生长因子-C淋巴管生成血管生成病理性
- 残端宫颈淋巴上皮样癌1例被引量：1
- 2019年
- 患者,女,71岁,G1P1,因“不规则阴道出血20余天”于2018年4月19日入院。10天前于外院就诊,因病灶较大直接行宫颈活检术,病理结果:宫颈鳞状细胞癌。24年前因“子宫肌瘤、卵巢囊肿”行子宫次全切除术及左附件切除术。2型糖尿病病史20年,口服拜糖苹及注射胰岛素治疗控制良好。妇科查体:外阴正常,宫颈直径约3cm,前唇表面见菜花样肿物1.5cm×1.0cm×1.0cm,触血(+)。盆腔及双附件区触诊未及异常。三合诊:主骶韧带及直肠阴道隔无异常。入院诊断:(1)残端宫颈鳞状细胞癌IB1期;(2)2型糖尿病。
- 郭传家孔繁斗倪鸣飞冯璐
- 抑癌基因OVCA1体外对卵巢癌细胞A2780迁移和侵袭的抑制作用被引量：5
- 2008年
- 目的:探讨卵巢癌基因1[ovarian cancer gene 1,OVCA1;也称为DPH2L(diphthamide synthesis protein 2-like)基因]体外对卵巢癌细胞系A2780迁移和侵袭能力的抑制作用。方法:采用脂质体法将GFP标记的携带OVCA1的重组质粒 pEGFP-OVCA1或GFP空白质粒分别转染A2780细胞后,G418筛选稳定转染细胞,有限稀释法筛选稳定转染细胞的单克隆细胞株,荧光显微镜检查绿色荧光蛋白的表达及RT-PCR方法检测A2780细胞OVCA1基因mRNA的表达。A2780-OVCA1细胞为实验组,A2780-GFP细胞和A2780细胞为对照组,采用划痕实验、Transwell体外迁移实验和Matrigel体外侵袭实验检测 OVCA1对A2780细胞迁移和侵袭能力的影响。结果:重组质粒pEGFP-OVCA1转染后获得了稳定表达GFP标记OVCA1蛋白的A2780细胞株。A2780-OVCA1组划痕后的细胞迁移速度明显小于两对照组(P<0.05);A2780-OVCA1组穿过Transwell 滤膜的迁移细胞数明显少于两对照组(P<0.05);A2780-OVCA1组穿过Matrigel滤膜的侵袭细胞数明显少于两对照组(P< 0.05)。结论:OVCA1在体外具有显著抑制卵巢癌A2780细胞迁移和侵袭的作用。
- 孔繁斗刘丽魏巍赵心宇苗小艳赵春艳
- 关键词：卵巢癌
- 卵巢硬化性间质瘤1例
- 2006年
- 王敬民朱丽丽刘洋成宋辉孔繁斗
- 关键词：卵巢肿瘤硬化性间质瘤内分泌
- 年轻早期宫颈癌患者卵巢移位术后卵巢功能变化被引量：9
- 2011年
- 目的:探讨早期宫颈癌患者实施卵巢移位术后卵巢功能的变化及术后补充放疗对移位卵巢的影响。方法:对大连医科大学附属第一医院2002年1月～2006年1月期间收治的29例年龄≤40岁ⅠA～ⅡA期宫颈癌患者实施宫颈癌根治术的同时行卵巢移位术。将这29例患者作为研究组,其中术后无辅助放疗者12例为研究组1,有辅助放疗者17例为研究组2;选取同年龄段、同期入院的32例行子宫全切并保留双侧卵巢于原解剖位置的子宫良性病变患者作为对照组1,7例行传统宫颈癌根治术(不保留卵巢)的宫颈癌患者作为对照组2。术后3个月、半年、1年随访研究组及两个对照组了解有无围绝经期症状,对研究组同时还调查性生活情况。测定术后1年左右研究组、对照组的FSH、E2水平,进行比较,并作统计学分析。结果:研究组中29例患者2例分别于术后9个月、11个月死亡,17例术后补充放疗。①更年期症状调查:出现更年期症状的患者,术后3个月为10例。未补充放疗的患者占2例,其中1例于术后半年症状消失,另1例及其余8例补充放疗的患者术后1年症状仍持续存在。②性生活调查:术后3个月有性生活者5例,均为术后未补充放疗者,性生活基本满意;术后半年有性生活者16例,11例性生活满意或基本满意;术后1年29例患者除2例死亡以外均有性生活,18例满意或基本满意。③术后1年左右测定FSH、E2水平。研究组1(未放疗组)与对照组1(子宫全切组)比较,P>0.05,无统计学意义;研究组1(未放疗组)与研究组2(放疗组)比较,P<0.05,有统计学意义;研究组2(放疗组)与对照组2(切除卵巢组)比较,P<0.05,有统计学意义。结论:宫颈癌患者术中行卵巢移位术可保留卵巢的功能。术后辅助放疗对卵巢功能有影响,但对于术后需要辅助放疗的宫颈癌患者行卵巢移位术仍能部分保留卵巢功能。
- 高群孔繁斗
- 关键词：子宫颈癌卵巢移位卵巢功能
- 顺铂对雌性大鼠骨密度影响的实验研究被引量：6
- 2005年
- 目的本文通过对去势雌性大鼠的动物实验研究,观察顺铂对骨代谢、骨密度的影响,并探讨其可能机制。方法将三月龄雌性SD大鼠30只,随机分为对照组和化疗组,每组15只。各组大鼠均用1％戊巴比妥钠腹腔内麻醉,行双侧卵巢切除术。术后1W开始用药,每两周用药1次, 共6次。对照组腹腔内注射生理盐水1 ml;化疗组腹腔内注射顺铂2mg／kg溶于1ml生理盐水中。术后13w处死各组动物,处死前用代谢笼收集24h空腹尿标本,自动生化分析仪测定尿钙浓度并计算出24h排泌量。氯胺T氧化法测尿羟脯氨酸(HOP)浓度并计算出24h排泌量;麻醉动物, 开腹后下腔静脉取血离心,放免法测骨钙素(BGP)、血尿素氮(BUN);取腰椎L4-6椎体,双能X 线骨密度测量仪测腰椎骨密度。结果化疗组与对照组相比,骨密度降低,24h尿HOP及24h尿 Ca定量升高,均有显著意义,血BGP无差异。结论本实验表明顺铂对大鼠的骨代谢存在直接的不良影响,使骨吸收增加,表现为松质骨骨密度降低。
- 孔繁斗吕申吴琳
- 关键词：顺铂双侧卵巢切除术生化分析仪测定雌性SD大鼠尿羟脯氨酸静脉取血
- 宫颈癌组织中Rap1GAP蛋白表达及其与HPV感染的相关性被引量：8
- 2010年
- [目的]探讨Rap1GAP蛋白在宫颈癌组织中的表达变化以及其与HPV感染之间的关系。[方法]免疫组化方法检测20例宫颈癌与20例正常宫颈组织HPV感染和Rap1GAP蛋白表达情况。[结果]HPV检出阳性率在正常宫颈组织和宫颈癌中分别为20%与75%,宫颈癌组明显高于正常宫颈组(P<0.05)。宫颈癌组的Rap1GAP蛋白表达阳性率为15%、弱阳性率为15%,二者均明显低于正常宫颈组(阳性率,55%和弱阳性率,45%)(P均<0.05)。宫颈癌组织中,HPV阳性组Rap1GAP蛋白缺失率为80%,明显高于HPV阴性组的缺失率40%(P<0.05),且二者之间呈正相关(r=0.553,P<0.05)。[结论]宫颈癌组织Rap1GAP蛋白表达下调或缺失可能与HPV感染有关。
- 孔繁斗李超华赵春艳
- 关键词：宫颈癌HPV
- hMSH2在卵巢肿瘤中的表达及其临床意义被引量：1
- 2007年
- 目的检测hMSH2基因在人卵巢良恶性肿瘤组织中的表达及其与卵巢恶性肿瘤临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学法检测10例上皮性卵巢瘤和21例上皮性卵巢癌组织中错配修复基因hMSH2蛋白的表达。结果10例良性肿瘤中全部有hMSH2蛋白表达,阳性率为100%,21例恶性肿瘤中有13例阳性,阳性率61.9%(P<0.05)。在卵巢癌中,浆液性腺癌与粘液性腺癌表达率分别为66.7%和55.6%(P=0.673);FIGO分期Ⅰ～Ⅱ期者58.3%,Ⅲ～Ⅳ期者66.7%(P=1);高、中分化表达率72.7%,低分化者50%(P=0.387)。结论hMSH2基因的突变参与了卵巢恶性肿瘤的发生、发展过程,与预后有一定关系。hMSH2蛋白的检测有助于卵巢恶性肿瘤的早期诊断及判断预后。
- 郑杰孔繁斗
- 关键词：卵巢肿瘤免疫组织化学HMSH2基因表达
- 意外发现的阑尾杯状细胞腺癌卵巢转移一例被引量：1
- 2023年
- 病人,女,53岁。因发现下腹部包块2个月,于2021年6月21日入院。病人2个月前自觉腹部增大,偶有下腹坠胀痛,近3个月来持续阴道血性分泌物,量少,月经规律,无痛经。妇科超声检查:左卵巢大小4 cm×3 cm×3 cm,内呈液性伴细弱点状,左附件区见5 cm×5 cm×5cm囊肿,内呈无回声,右卵巢正常。13天前来我院复查妇科超声提示:盆腔左侧大小为8 cm×7 cm液性暗区,盆腔右侧大小5 cm×5 cm液性暗区,内见分隔,部分呈毛玻璃样,提示盆腔双侧占位(卵巢巧克力囊肿)(图1)。
- 马莹孔繁斗
- 关键词：阑尾肿瘤卵巢转移性肿瘤
