孙瑶
- 作品数：16 被引量：39H指数：4
- 供职机构：皖南医学院更多>>
- 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目安徽省高等学校省级教学质量与教学改革工程项目安徽省高等学校省级质量工程项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学理学生物学更多>>
- 敲低赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)促进人诱导性多能干细胞分化为产胰岛素细胞
- 2018年
- 目的探索一种人诱导性多能干细胞(hiPSC)体外高效分化为产胰岛素细胞(IPC)的诱导方案。方法 RNAi技术敲低hiPSC赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)基因后,利用四步法诱导其体外分化为IPC。流式细胞术分析IPC分化效率,实时定量PCR检测细胞LSD1、POU5同源盒转录因子1(OCT4)、Y染色体性别决定区因子17(SOX17)、叉头盒蛋白A2 (FOXA2)、胰腺和十二指肠同源盒蛋白1 (PDX1)、配对盒转录因子4(PAX4)、PAX6、肝细胞核因子6 (HNF6)、肝细胞核因子1同源盒蛋白A(TCF1)、NK6同源盒蛋白1(NKX6. 1)、葡萄糖转运子2(GLUT2)、葡萄糖激酶(GK)、胰岛素及MAF b ZIP转录因子A(MAFA)的mRNA水平,免疫荧光技术检测细胞PDX1、胰岛素的表达和定位;双硫腙(DTZ)染色和透射电镜分别观察细胞内胰岛素的分泌和分泌颗粒分布情况; ELISA检测诱导后细胞胰岛素和C肽分泌量。结果 LSD1敲低组的IPC分化效率较对照组有明显提高,胰岛β细胞发育相关基因SOX17、PDX1、PAX4、胰岛素的mRNA表达显著上调。LSD1敲低组的IPC共表达成熟β细胞特异性蛋白PDX1和胰岛素。另外,这些IPC能感应葡萄糖刺激并以胰岛素分泌小泡形式释放胰岛素,胰岛素或C肽释放量约为天然胰岛细胞的1/6(而对照组仅为1/8)。结论敲低LSD1基因可以促进hiPSC体外高效分化为IPC。
- 周淑艳周淑艳李富荣李阳张翠孙瑶
- 雨课堂在《病理生理学》教学中的应用与探索
- 2023年
- 病理生理学是医学教学中的主干课程之一,在医学教学体系中具有十分重要的作用和地位。为了提高病理生理学的教学质量,激发同学们的学习兴趣,让教学过程收获更大的效果,教师可在教学课堂中应用雨课堂进行教学。雨课堂是清华大学和学堂在线共同推出的新型智慧教学解决方案,可以快速免费的为一切教学过程提供信息化的智能数据。文章以雨课堂在病理生理学教学中的应用为例,充分探讨了雨课堂模式在病理生理学教学过程中的优势和不足,为雨课堂在高校中的推广和改进提供宝贵的经验。
- 葛天宇孙瑶
- 关键词：病理生理学教学改革
- 毛细管区带电泳分析五步蛇毒蛋白C激活剂和蛋白C的相互作用被引量：3
- 2013年
- 建立了毛细管区带电泳分析五步蛇毒蛋白C激活剂(protein C activator,PCA)与血浆蛋白C(protein C,PC)的相互作用。以未涂层毛细管(60.2 cm(有效长度50 cm)×75μm)为分离柱,50 mmol/L Tris-HCl(pH 7.4)为运行缓冲液,于198 nm波长下检测。对影响五步蛇毒PCA分离的因素(如缓冲液、离子浓度)及在37.5℃下孵育不同时间的五步蛇毒PCA与PC的相互作用进行考察。方法的检出限(以信噪比为3计)为3 mg/L,线性范围为10～300 mg/L。五步蛇毒PCA迁移时间和峰面积的相对标准偏差分别为0.56%和3.8%(n=6)。等体积的五步蛇毒PCA(200 mg/L)与PC(60 mg/L)孵育5 min,其结合率达到最大,且谱图中未见有PC水解的肽链。该五步蛇毒PCA可改变PC空间构象直接激活PC。该方法简单,灵敏度和分辨率高,分析结果为今后快速检测五步蛇毒PCA及其活性提供了重要的理论依据。
- 孙瑶包鹏举张根葆
- 关键词：毛细管区带电泳蛋白C相互作用五步蛇毒
- 血浆蛋白C活性特异性诊断试剂的研究
- 张根葆钱大青卢林明孙瑶李曙包鹏举吴娟
- 血浆蛋白质C（Protein C，PC）是一种维生素K依赖性的糖蛋白，在正常人体血浆中可被凝血酶-血栓调节蛋白(T-TM)复合物激活为活化蛋白C（APC）并发挥重要的抗凝作用，调节机体凝血平衡。当这种系统的功能下降或减退...
- 关键词：
- 关键词：血浆蛋白质蛇毒制剂
- iNOS-GC-cGMP信号活化参与了内毒素血症大鼠血管低反应性的发生机制被引量：4
- 2012年
- 目的:探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)-鸟苷酸环化酶(GC)-环磷酸鸟苷(cGMP)信号活化在内毒素血症大鼠血管低反应中的作用。方法:采用腹腔注射脂多糖(LPS)诱导大鼠内毒素血症模型,24只SD大鼠随机分为假手术组(sham组)、内毒素血症组(LPS组)、内毒素血症+多黏菌素B组(LPS+PMX-B组)和多黏菌素B组(PMX-B组)。颈总动脉插管记录大鼠平均动脉血压(MABP);检测各组大鼠血清中NO、iNOS和TNF-α的水平;用离体血管灌流方法,生物信号处理系统测定大鼠胸主动脉环的张力。结果:与sham组相比,LPS组大鼠MABP显著降低(P<0.01),LPS+PMX-B组大鼠明显高于LPS组(P<0.05),而PMX-B组与sham组比无统计学意义(P>0.05);生化检测发现LPS组大鼠血浆中NO、iNOS以及TNF-α水平显著高于sham组和LPS+PMX-B组(P<0.01)。同sham组相比,LPS组大鼠离体胸主动脉环对去氧肾上腺素(Phe)刺激的收缩反应及其对乙酰胆碱(ACh)的舒张反应均明显低下(P<0.01);与LPS组相比,LPS+PMX-B组的反应明显改善(P<0.01);氨基胍(AMG)预处理后,同sham组和PMX-B组相比,LPS组与LPS+PMX-B大鼠离体胸主动脉环对Phe(10-7～10-5mol.L-1)诱导下的各组血管环的收缩反应明显改善(P<0.05或P<0.01);亚甲蓝(MB)预处理后,同sham组和PMX-B组相比,LPS组与LPS+PMX-B组大鼠离体胸主动脉环对Phe(10-7～10-5mol.L-1)诱导下的各组血管环的收缩反应均得到改善(P<0.05或P<0.01);PMX-B组与sham组比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:iNOS-GC-cGMP信号活化参与了内毒素血症大鼠血管低反应性;多黏菌素B改善内毒素血症大鼠血管低反应性,可能与中和内毒素、减少炎症因子释放、抑制iNOS-GC-cGMP信号活化有关。
- 王海华闵志雪戚仁斌张根葆包鹏举胡钱国孙瑶
- 关键词：内毒素血症脂多糖类胸主动脉多黏菌素B
- 皖南地区眼镜蛇毒活性组分镇痛效应的初步研究被引量：7
- 2013年
- 目的:从皖南地区眼镜蛇毒粗毒中分离纯化出活性组分眼镜蛇毒镇痛因子(cobra venom analgesic factor,CVAF),并研究其镇痛效应。方法:采用阳离子交换色谱(cation-exchange chromatography,CEC)和分子排阻层析(size-exclusion chromatography,SEC)从眼镜蛇粗毒中分离纯化出镇痛活性组分CVAF,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法和毛细管区带电泳法进行纯度及相对分子量的鉴定;将小鼠随机分为生理盐水正常对照组和盐酸吗啡阳性对照组、CVAF实验组,采用小鼠热板法和醋酸扭体法评估活性组分CVAF的镇痛效应。结果:纯化后得到活性产物为单一组分,相对分子量为6 500 D;热板法显示吗啡组在给药0.5 h后达高峰,6 h镇痛作用消失;活性组分CVAF的镇痛作用自用药后0.5 h开始,且持续8 h仍存在。扭体法中0.03 mg/kg、0.1 mg/kg和0.3 mg/kg的活性组分在给药后小鼠扭体抑制率分别为27%、50%和70%;0.3 mg/kg实验组与吗啡组相比无明显差异(P>0.05)。结论:从皖南地区眼镜蛇粗毒中分离纯化出的活性组分CVAF具有剂量依赖性镇痛效应。
- 闵志雪黄璐孙瑶包鹏举王海华张根葆
- 关键词：眼镜蛇毒镇痛
- 五步蛇毒PCA改善脓毒症大鼠的血管低反应性被引量：1
- 2014年
- 目的:初步探讨五步蛇毒蛋白C激活剂(PCA)对脓毒症大鼠血管张力的影响。方法:SD雄性大鼠随机分成6组(n=6):即假手术组(sham组)、模型组(LPS组)、PCA干预组(LPS+PCA组,分0.1 mg/kg、0.3mg/kg和0.6 mg/kg剂量组)和阳性对照组(LPS+多粘菌素B组,0.2 mg/kg多粘菌素B)。采用离体血管灌流法,经生物信号处理系统测定主动脉环的张力变化。结果:LPS组大鼠的平均动脉血压(MABP)、心率(HR)、左室发展压(LVDP)、心室内压最大上升/下降速率(±dp/dtmax)均显著下降;PCA干预组各指标较LPS组均有明显改善。LPS组主动脉环对去氧肾上腺素(Phe)刺激的收缩反应和对乙酰胆碱(ACh)的舒张反应较sham组均下降;而PCA干预组(尤其是0.6 mg/kg剂量组)对Phe刺激的收缩反应和对ACh的舒张反应较LPS组则明显提高。LPS组的去内皮主动脉环对Phe刺激的收缩反应量效曲线较sham组明显下移,但PCA干预组的去内皮主动脉环对Phe刺激的收缩反应与LPS组相比无显著差异。各组主动脉环对硝普钠诱导的非内皮依赖性舒张反应差异无统计学意义。N-硝基-L-精氨酸甲酯和甲烯蓝预处理可以升高主动脉环对Phe的收缩反应。结论:五步蛇毒PCA通过改善血管内皮功能而逆转脓毒症大鼠血管的低反应性,其机制可能与抑制NO-GC-cGMP通路的活化有关。
- 包鹏举孙瑶王海华张根葆胡钱国蒋佳珅
- 关键词：五步蛇脓毒症主动脉
- 病理生理学课堂教学体会被引量：4
- 2020年
- 在信息化飞速发展的当代,教师和学生都应当明确时代赋予的新的使命和任务。在病理生理学课堂教学中,教师的教育使命不仅仅是知识传道授业解惑,更应注重唤醒、激励学生自主学习、合作学习和探究学习。同时,每位教师也应常常对自己的教育教学过程中存在的主要问题和迫切需要改革的内容进行深刻的总结和反思。
- 孙瑶张翠包鹏举
- 关键词：病理生理学教学方法
- 胶束毛细管电泳法检测IL-12的含量
- 2020年
- 目的建立胶束毛细管电泳法鉴定白介素-12(IL-12)、检测其含量并分析IL-12去折叠的过程。方法以50μm i.d.×48.5 cm未涂层毛细管为色谱分离柱,分析影响IL-12分离效果的因素并建立IL-12标准曲线;将IL-12与抗IL-12抗体混匀液在38℃水浴槽中孵育,40 min后在相同条件下进行毛细管电泳,将其与IL-12、抗IL-12抗体的电泳结果比较以鉴定IL-12;将IL-12与DTT在60℃水浴槽中孵育不同时间,并研究IL-12在不同状态下的电泳结果分析IL-12去折叠的过程。结果建立了以含30 mmol/L十二烷基硫酸钠(SDS)的硼酸盐(pH=9.3,80 mmol/L)为缓冲液的胶束毛细管电泳在线扫集法;IL-12的峰面积与质量浓度具有良好的线性关系,线性相关系数为0.9991,线性范围为2~120 ng/L;随着IL-12与DTT孵育时间的延长,IL-12的二硫键逐渐被打开,图谱中可显示蛋白峰随之发生的变化。结论毛细管电泳法操作简单、灵敏度高,这为今后在肿瘤等疾病中快速检测IL-12的含量以及分析其含量变化的原因提供理论依据。
- 包鹏举包鹏举孙瑶王海华张根葆
- 关键词：胶束毛细管电泳白介素-12二硫键
- 多种教学方法在病理生理学课程中的应用探讨被引量：3
- 2022年
- 随着教育部“金课”建设的提出,医学课程教学方法改革势在必行。病理生理学是基础医学的主要课程之一,是沟通基础医学与临床医学的桥梁学科,因此,对病理生理学传统教学方法进行改革,助力金课建设尤为重要。文章通过智慧教学、课堂翻转、案例教学、课程思政等方面,对病理生理学教学方法改革进行了总结探讨,为提高病理生理学课堂教学效果提供更多的思路。
- 张翠孙瑶许敏王林胡泽波
- 关键词：病理生理学案例教学
