宋艳艳
- 作品数：94 被引量：379H指数：11
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- 相关领域：医药卫生农业科学文化科学生物学更多>>
- 一种牛病毒性腹泻病毒样颗粒及其构建方法与应用
- 本发明涉及一种牛病毒性腹泻病毒样颗粒及其构建方法与应用。本发明将牛病毒性腹泻病毒C‑E0‑E1‑E2‑P7基因与杆状病毒表达载体连接，采用杆状病毒表达系统在昆虫细胞生物反应器中安全、高效地生产牛病毒性腹泻病毒样颗粒，所制...
- 郑文文郑学星赵丽宋艳艳薛付忠温红玲
- 文献传递
- 风疹病毒JR23株包膜糖蛋白的基因克隆、表达与功能分析
- 王志玉温红玲宋艳艳姚苹方朝凤王小凡许洪芝薛永磊
- 该课题的研究不仅扩增出了RV JR23株包膜糖蛋白E1和E2的基因，而且对它们的序列进行了分析，并与世界流行株做了比较研究，阐明它们的分子流行病学特征，构建了表达载体，建立了真核细胞瞬时表达体系。此表达体系成功地用于RV...
- 关键词：
- 关键词：风疹病毒基因克隆
- 单纯疱疹病毒I型糖蛋白D酵母表达载体的构建被引量：3
- 2003年
- 目的:构建含有单纯疱疹病毒I型包膜糖蛋白D全基因片段的克隆载体及酵母表达载体,为进一步真核表达重组gD蛋白奠定基础。方法:应用PCR方法从HSV-I基因组中扩增糖蛋白D的全长基因,产物回收后与pMD-18T载体连接,并转化,经氨苄筛选及测序,建立克隆载体pMD18T-gD;克隆载体与表达载体双酶切后,产物连接、转化大肠杆菌JM109,筛选、测序后确定构建了酵母表达载体pGAPZαA-gD。结果:重组质粒pMD18T-gD和pGAPZαA-gD经PCR和酶切均出现相应长度的片段,测序结果证实为gD基因,序列分析同源性为99.66%。结论:成功构建了含有单纯疱疹病毒I型糖蛋白D全基因的克隆载体及酵母表达质粒。
- 王战勇王志玉温红玲宋艳艳王桂亭许洪芝
- 关键词：单纯疱疹病毒糖蛋白D克隆酵母菌
- 风疹病毒JR_(23)株对中枢神经系统感染的体内和体外实验研究被引量：3
- 2001年
- 目的 研究风疹病毒 (rubellavirus ,RV )JR2 3 株感染中枢神经系统 (CNS)特性。方法 RVJR2 3 株体外感染人胚脑神经细胞、腹腔感染Balb/c小鼠 ,观察JR2 3 株在人脑神经细胞的增殖和对不同免疫状态小鼠CNS的感染及由感染导致的神经病理学特征。结果 RVJR2 3 株在人胚脑神经细胞中无明显的致细胞病变作用 ,病毒在感染后的第 72h达最高增殖滴度 10 3 TCID50 /ml。病毒抗原主要分布在人脑神经细胞胞浆。各组小鼠感染RVJR2 3 株后无明显CNS症状 ,地塞米松、环磷酰胺和药物未干预动物组CNSRV感染率分别为 6 0 %、90 %、5 0 %。受RVJR2 3 感染的小鼠脑组织出现小灶性胶质细胞增生及神经元坏死。大脑全层均有病毒抗原的分布。结论 RVJR2 3 株在人脑神经细胞和Balb/c小鼠脑组织中均能形成感染 。
- 姚苹王志玉王永康宋艳艳王桂亭杜德利许洪芝
- 关键词：风疹病毒中枢神经系统免疫学
- 风疹病毒在兔脑神经细胞中的形态与形态发生
- 1996年
- 利用超薄切片电子显微镜技术,对风疹病毒(RV)地方株JR23和标准株GOS—10在兔脑神经细胞中的形态与形态发生及其引起的细胞超微结构变化进行了观察研究。结果表明,病毒感染6h后,细胞浆中开始出现病毒核心样颗粒。其特点是:电子致密度高,分布广泛,并有一定的聚集性,核周围常见。颗粒呈圆形,直径20～30nm。在这些颗粒较集中的区域可见到大量电子致密度均一、细布纹样条块状或环状结构,有时可见到其与核心样颗粒组装过程。有包膜的病毒颗粒出现较晚,呈球形,直径50～70nm。神经元中未见到完整病毒颗粒。被RV感染的细胞超微结构变化不明显,但可见到胞核胞浆比例明显增大,胞浆中可见散在的空泡。
- 王志玉王桂亭许洪芝宋艳艳姚苹王芃
- 关键词：风疹病毒神经细胞形态学
- 副粘病毒F1蛋白胞外非保守区对其特异性膜融合的影响被引量：2
- 2005年
- 为了解融合蛋白F1分子的胞外非保守区在融合蛋白(F)与血凝素-神经氨酸酶(HN)的特异性膜融合中的作用,采用基因定点突变方法,在新城疫病毒(NDV)F1与人副流感病毒(hPIV)F1基因的胞外非保守区进行定点突变,创造酶切位点,得到分别含3个相同酶切位点的突变株NDV-M和hPIV-M。经检测,突变体的细胞融合功能与野毒株相同。然后用3个限制性内切酶分别从NDV-M与hPIV-M中切出两个片段NDVF-1、F-2及hPIVF-1、F-2。NDV-M和hPIV-M相互交换对应的F-1片段后进行基因重组,得到2个嵌合体(Chimera),即NDV-C1和hPIV-C1;同样方法交换F-2片段后又得到2个嵌合体NDV-C2和hPIV-C2。将各种嵌合体DNA与同源及异源HN基因共转染BHK21细胞后,在真核细胞中表达。Giemsa染色和指示基因法检测细胞融合功能,荧光强度分析(FACS)检测F蛋白的表达效率。结果表明,突变体NDV-M和hPIV-M的细胞融合功能与野毒株相同,可用于构建嵌合体。NDV-C1和NDV-C2分别与NDVHN共表达后,融合功能达到野毒株的76.34%和96.2%,与hPIVHN共表达后均无细胞融合发生;hPIV-C1和hPIV-C2分别与hPIVHN共表达后,融合功能达到野毒株的65.82%和93.78%,与NDVHN共表达后无细胞融合发生。FACS分析表明,突变体及所有嵌合体蛋白F的表达效率与野毒株相比均没有明显变化。实验结果说明在F1蛋白的胞外非保守区中,NDVF-1和hPIVF-1这两个片段对于NDV和hPIV的特异性膜融合具有重要作用;而NDVF-2和hPIVF-2这两个片段对于NDV和hPIV的膜融合来讲,则特异性较低。
- 任桂杰王志玉王桂亭宋艳艳许洪芝温红玲
- 关键词：副粘病毒融合蛋白
- 艾滋病痴呆综合症患者体内HIV-1 tat基因的克隆及原核表达被引量：3
- 2010年
- 目的探讨艾滋病痴呆综合症(AIDS dementia complex,ADC)患者体内外周和中枢不同组织部位的人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)反式激活因子(tat)第一外显子基因序列的变异并对其进行表达,用于研究HIV-1Tat变异对其神经毒性的影响。方法从ADC病例尸检标本的脾脏(spleen,SPL)、脑膜(meninges,MG)和基底核(bas-al ganglia,BG)3个部位的组织中提取基因组DNA,用PCR方法扩增出tat第一外显子基因,并将其插入到pGEM-T克隆载体中,测序证实为HIV-1tat基因,BioEdit软件对测序结果进行比对。将克隆载体双酶切,回收目的基因,并将其连接到pGEX-KG表达载体中,将重组表达质粒pGEX-KG-tat转化BL21大肠杆菌,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,表达产物用SDS-PAGE和Western blot进行检验和鉴定。结果成功克隆了HIV-1tat第一外显子基因,序列比对发现外周和中枢部位的Tat氨基酸序列不同;构建了pGEX-KG-tat重组表达载体,并在原核细胞中高效表达了谷胱甘肽巯基转移酶(GST)融合Tat蛋白,SDS-PAGE和Western blot分析表明,所表达的蛋白为Tat蛋白。结论 ADC患者外周和中枢不同组织部位的HIV-1tat第一外显子基因所编码的Tat蛋白氨基酸序列存在变异,在原核细胞中对其进行了高效表达,为Tat蛋白的神经毒性研究奠定了基础。
- 蒲双双闫玉芬高文花温红玲宋艳艳许洪芝赵丽
- 关键词：基因表达
- 大黄乙醇提取物对小鼠疱疹性脑炎的治疗作用被引量：7
- 2003年
- 目的:研究中药大黄乙醇提取物对病毒性脑炎的治疗作用。方法:采用标准昆明鼠为动物模型,用单纯疱疹病毒I型(HSV-1)进行脑内局部接种,制成小鼠疱疹性脑炎模型,以无环鸟苷为阳性对照,用不同剂量的大黄乙醇提取物进行治疗。结果:大黄乙醇提取物可以显著提高疱疹性脑炎小鼠的存活率,延长平均存活时间,减轻脑组织的病理改变,明显消除脑内的病毒抗原,降低各个时期的病毒滴度。皮下注射给药3.3g/(kg·d)与4.9g/(kg·d)组效果优于无环鸟苷对照组。结论:中药大黄能有效地治疗由单纯疱疹病毒引起的脑炎,在体内有抗病毒作用,是一种有效的抗病毒中药,其在抗病毒领域的开发前景广阔。
- 许斌王志玉宋艳艳王桂亭王志波袁惠民
- 关键词：大黄属脑炎单纯疱疹小鼠病毒性脑炎
- 拉沙热病毒样颗粒、其制备方法与应用
- 本发明涉及一种拉沙热病毒样颗粒、其制备方法与应用。本发明将拉沙热病毒Z、N、GPC基因分别与昆虫细胞表达载体连接，利用杆状病毒/昆虫细胞表达系统来生产拉沙热病毒样颗粒。将所述拉沙热病毒样颗粒与防腐剂和佐剂混合，即制备得到...
- 郑学星于学杰薛付忠宋艳艳赵丽温红玲姚苹雷晓颖王志玉
- 汉坦病毒GM04-38株包膜糖蛋白M的基因克隆与序列分析被引量：2
- 2005年
- 目的:建立汉坦病毒(HV)包膜糖蛋白M的克隆载体;研究M基因的变异情况,并对其序列进行系统发生树分析。方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增GM04-38M片段的基因,产物纯化后克隆于PMD-18T载体,经氨苄青霉素筛选,酶切鉴定,并进行序列测定,应用DNASTAR软件将它与世界范围内分离的病毒株同一基因序列分析比较。结果:筛选出含有HVM蛋白基因的克隆。GM04-38株M片段的全基因序列共3651个核苷酸,4种核苷酸的比例分别为:A30.46%,T30.13%,G20.84%,C18.57%。序列同源分析表明,GM04-38株与Z37株核苷酸同源性最高(97.3%),属于SEO型HV。与其他SEO各株的差别均小于18.0%;绘出了核苷酸系统发生树。结论:成功地建立汉坦病毒M蛋白基因克隆载体;中国不同地区汉坦病毒流行株基因序列存在明显差异。这为研究HV遗传与变异以及制备有效的亚单位疫苗奠定了基础。
- 宋绍霞王志玉毕振强陶泽新王志强王宇露宋艳艳王桂亭
- 关键词：汉坦病毒肾综合征出血热M基因核酸序列分析基因克隆
