幸宇云
- 作品数：28 被引量：60H指数：4
- 供职机构：江西农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项江西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- LAMP(环状传递等温扩增)法及AML(牙釉蛋白)基因法在牛早期胚胎性别鉴定中的应用研究
- 幸宇云
- 关键词：LAMP法牛胚胎性别鉴定
- 猪精子黏合分子1(SPAM1)基因新SNPs的鉴别及其在12个中外猪中的遗传变异研究
- 2008年
- 精子黏合分子1(SPAM1)是一种在受精过程中起重要作用的精子抗原,以10个中外猪种的20个无遗传相关公猪个体的基因组DNA为模板,扩增猪SPAM1基因的部分第二外显子和第三内含子2个DNA片段,经PCR产物直接测序并作序列比较分析后在外显子2和内含子3上分别鉴别到1个新的单核苷酸多态(SNPs)位点,其中外显子2上的T>A碱基颠换(M191T-A)可导致其编码的苯丙氨酸突变为酪氨酸。SMART软件分析显示M191T-A处在SPAM1蛋白糖基水解酶保守域的编码区。建立PCR-TasI-RFLP方法检测了4个西方商业猪种以及8个中国地方猪种791个个体在M191T-A位点的遗传变异情况,结果在八眉猪、莱芜黑猪、米林藏猪、杭猪、剑河白香猪、大白猪、长白猪和杜洛克猪中检测到突变型等位基因A;而在二花脸猪、民猪、五指山猪和皮特兰猪中仅存在TT基因型,表现为极端的单态分布。
- 陈蓉蓉陈从英幸宇云郭源梅吴延博高军
- 关键词：SNPS
- 大规模白色杜洛克×二花脸资源家系中公猪睾丸发育和精液品质的分析
- 以中国白色杜洛克×二花脸构建的资源家系F2代和F3代公猪群体为实验对象，系统研究了178头F2代90日龄和138头F3代60日龄公猪睾丸性状，以及206头F2代310日龄公猪的精液品质和睾丸性状。结果表明，该公猪群体中由...
- 任冬仁郭添福蓝旅涛黄路生幸宇云林明解吴延博李凯李完波麻骏武邓政杨舒瑾
- 关键词：动物遗传育种睾丸发育精液品质
- 文献传递
- 两个增加猪肋骨数的主效标记及其在猪育种中的应用
- 本发明公开了两个位于猪7号染色体上的增加猪肋骨数的主效标记及其在种猪遗传改良中的应用。本发明采用实时定量TaqManPCR技术和PCR扩增后直接电泳的技术分别对g.103457401A>C和g.103458678_...
- 黄路生任军幸宇云张志燕艾华水
- 两个增加猪肋骨数的主效标记及其在猪育种中的应用
- 本发明公开了一个位于猪7号染色体上的增加猪肋骨数的主效标记及其在种猪遗传改良中的应用。本发明采用实时定量TaqMan PCR技术和PCR扩增后直接电泳的技术分别对g.103458678_103458679ins291主效...
- 任军黄路生幸宇云张志燕艾华水
- 文献传递
- 附睾功能及其对精子成熟的影响被引量：21
- 2007年
- 哺乳动物的附睾为精子的成熟提供了特殊的微环境,是精子成熟、保护、运输和贮存的部位,在生殖过程中起着重要作用。附睾上皮细胞的合成、分泌、转运等功能使精子发生了一系列结构、生化和功能的改变.从而使精子获得受精和运动能力。作者对附睾的形态结构、功能和对精子成熟影响研究现状等作简要综述。
- 李琳周利华任冬仁幸宇云陈从英
- 关键词：附睾精子精子成熟
- 两个增加猪肋骨数的主效标记及其在猪育种中的应用
- 本发明公开了两个位于猪7号染色体上的增加猪肋骨数的主效标记及其在种猪遗传改良中的应用。本发明采用实时定量TaqManPCR技术和PCR扩增后直接电泳的技术分别对g.103457401A>C和g.103458678_...
- 黄路生任军幸宇云张志燕艾华水
- 文献传递
- 公猪7号染色体繁殖性状QTL的精细定位和位置候选基因MEA1的鉴别研究被引量：1
- 2014年
- 本研究旨在精细定位公猪7号染色体(SSC7)影响附睾重和血浆睾酮浓度的数量性状位点(QTL),鉴别影响公猪繁殖性状的位置候选基因。以205头白色杜洛克×二花脸资源家系F2公猪群体为研究材料,在初步定位的QTL区间内增加14个SNPs对该群体进行扫描以精细定位QTL。在精细定位QTL区间内筛选雄性增强抗原1(MEA1)为位置候选基因,采用标准关联分析和F-drop检验分析该基因的多态位点与公猪繁殖性状的关联性,通过实时定量PCR(RT-PCR)和差异表达分析其表达情况。结果表明:①影响附睾重和血浆睾酮浓度的QTL置信区间显著缩小。②MEA1基因的5个SNPs与公猪附睾重、血浆睾酮浓度和射精量极显著或显著相关(P<0.01或P<0.05);单倍型与表型关联性分析显示,G-C-C-G-C单倍型与左、右侧附睾重极显著相关(P<0.01),A-C-C-G-G单倍型与左、右侧附睾重显著相关(P<0.05);F-drop分析显示,g.-1168A>G和g.1115A>G位点可能为影响公猪血浆睾酮浓度的主效突变位点(QTN)或与QTN紧密连锁;差异表达分析表明,附睾重与MEA1在附睾中的表达量成负相关(相关系数为-0.300,P=0.1);MEA1在成年公猪的18种组织中均有表达。本研究通过精细定位缩小了7号染色体影响公猪附睾重和血浆睾酮浓度的QTL置信区间;同时发现MEA1基因与公猪附睾重、血浆睾酮浓度和射精量显著相关,其中g.-1168A>G和g.1115A>G位点可能是影响公猪血浆睾酮浓度的QTN或与QTN紧密连锁,这2个位点可作为选育性欲较强公猪的分子标记。
- 赵科伟赵雪艳张志燕洪渊范寅任军幸宇云
- 关键词：公猪繁殖性状数量性状位点
- 猪睾丸特异性磷酸甘油酸激酶2(PGK2)基因的遗传变异及其与繁殖性状相关性分析
- 定位于猪7号染色体的猪睾丸特异性磷酸甘油酸激酶2(PGK2)基因是公猪繁殖性状的一个位置候选基因.本研究采用PCR-HaeⅢ-RFLP方法分析了3个西方商业猪种和8个中国地方猪种共765个个体在PGK2基因T427C突变...
- 任冬仁幸宇云任军郭源梅麻骏武黄路生
- 关键词：繁殖性状
- 文献传递
- 慢病毒介导的CRISPR/Cas9技术编辑PFF细胞BMPR-IB基因及BMPs信号通路重要基因表达分析被引量：3
- 2018年
- 【目的】利用慢病毒介导的CRISPR/Cas9基因组编辑技术获得编辑BMPR-IB(bone morphogenetic protein receptor,type IB)基因的猪胎儿成纤维细胞(pig fetal fibroblasts,PFF),并研究该基因被编辑后对骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins,BMPs)信号通路中重要功能基因表达的影响。【方法】针对猪的BMPR-IB基因的外显子8,利用在线软件http://crispr.mit.edu获得了21条sg RNAs(single-guide RNAs)序列;得分最高的sg RNA与互补序列(包含接头)退火成双链后连接入线性化的lenti CRISPR v2质粒以获得打靶质粒,打靶质粒与包装质粒ps PAX2和p CMV-VSV-G按5﹕4﹕1质量比混合后通过293T细胞包装慢病毒。慢病毒溶液经0.45μm滤膜回收后与PFF细胞培养液按照1﹕1混合、并加入聚凝胺(polybrene)至终浓度为6μg·m L-1,在1 000 g转速、32℃下离心感染PFF细胞1 h。感染3 d后,细胞在含3.5μg·m L-1嘌呤霉素的培养液中筛选6—7 d,最终获得编辑BMPR-IB基因的PFF细胞克隆群。针对编辑(打靶)细胞,首先通过T7E1酶切检测突变体,初步判断打靶效率,再通过PCR、PCR-TA克隆分析细胞的编辑及脱靶情况。利用RT-PCR检测编辑和对照组细胞中与BMPs信号通路相关的重要基因的表达情况;Western blotting检测编辑细胞与对照组细胞中BMPR-IB基因的蛋白表达量。利用Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒检测编辑细胞及对照组细胞的增殖能力。【结果】T7E1酶切及PCR测序均证实PFF细胞成功打靶目标DNA区域;TA克隆测序表明目标区域发生了插入与缺失突变,突变率为70%。针对20个潜在的脱靶位点的TA克隆测序结果表明,仅1个位点出现了10%(2/20)的脱靶情况。RT-PCR结果显示,打靶细胞与对照组细胞相比,BMPR-IB、Cylin D2、Cdk2和Bcl2基因的表达量均极显著下降(P<0.01)。Western blotting结果显示,打靶细胞BMPR-IB基因的表达量较对照组细胞降低62%。CCK-8检测试验表明,同一代细胞中,打靶PFF的增殖能�
- 杨强徐盼蒋凯乔传民任军黄路生幸宇云
- 关键词：慢病毒BMPR-IB细胞增殖
