张妍
- 作品数：20 被引量：36H指数：4
- 供职机构：吉林农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生文化科学环境科学与工程更多>>
- 防风花粉活力测定方法的比较及柱头可授性的研究被引量：6
- 2010年
- 研究并确定防风花粉生活力及柱头可授性的快速有效测定方法。使用I2-KI、TCC、亚甲基蓝及无机盐培养法测定花粉活力。用联苯胺-过氧化氢法测定柱头可授性。亚甲基蓝染色法最适于检测花粉活力,结果与无机盐观测法符合度高。防风刚开花时花粉活力不高,开花后第三天花粉活力最高,可达96%,第五天花粉活力开始下降,且下降幅度较大。防风开花2d后柱头分泌黏液,第3d分泌量最大,但此时柱头不具有可授性。待花药脱落后,柱头可授性逐渐增强,第6-8d达到最大值。亚甲基蓝染色法简便、快捷,适于防风花粉活力的观测。花药脱落后第6-8d柱头可授性最强。
- 杨发君张妍张建任跃英
- 关键词：防风花粉活力柱头可授性
- 牛支原体重组蛋白P48原核表达、多克隆抗体制备及间接ELISA抗体检测方法的建立
- 2023年
- 【目的】建立牛支原体抗体间接ELISA检测方法,为牛支原体灭活疫苗的效力检测提供方法。【方法】构建pET-32a-P48原核表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)Plyss感受态细胞筛选阳性质粒并进行双酶切验证,用终浓度为1 mmol/L的IPTG诱导重组蛋白表达,使用镍柱进行蛋白纯化,经SDS-PAGE验证蛋白纯度及分子质量大小,采用Western blotting检测重组P48蛋白特异性和反应原性;将重组P48蛋白免疫家兔制备多克隆抗体。建立牛支原体间接ELISA抗体检测方法并进行条件优化,确定阴阳性临界值。对建立的方法进行敏感性、稳定性、特异性及与平板凝集试验的符合率试验检测。【结果】经SDS-PAGE验证,P48蛋白分子质量大小为62.68 ku,纯度在90%以上;Western blotting检测结果显示,P48蛋白仅与相应抗体结合呈现单一条带,该蛋白特异性和反应原性良好;琼脂扩散方法测得阳性血清效价为1∶64。建立的间接ELISA检测方法条件优化结果为:抗原包被浓度为0.3μg/mL,1%BSA 37℃封闭120 min,待检血清按1∶1280稀释,37℃孵育60 min,二抗稀释度为1∶5000,37℃孵育60 min,邻苯二胺常温显色10 min。结果判定标准为:D 492 nm值>0.3196为阳性;D 492 nm值<0.3101为阴性;0.3101≤D 492 nm值≤0.3196为可疑。敏感性试验结果显示,当阳性样品稀释度为1∶218时,阳性血清判读结果仍为阳性。稳定性试验结果显示,3批次P48蛋白包被的96孔板检测结果的变异系数均<10%;与牛溶血性曼氏海姆杆菌、牛巴氏杆菌阳性血清无交叉反应。本试验建立的间接ELISA抗体检测方法与平板凝集试验阳性血清符合率为100%(18/18),阴性血清符合率为97.5%(39/40)。【结论】本研究建立的牛支原体P48间接ELISA抗体检测方法具有良好的敏感性、特异性及稳定性,为牛支原体抗体检测及牛支原体疫苗效力检测提供了方法。
- 张妍战力源姜福洁马红霞孔令聪
- 关键词：牛支原体间接ELISA
- 水貂阿留申病毒VP2蛋白Dot-ELISA检测方法的建立被引量：4
- 2015年
- 为建立一种适合于基层快速检测水貂阿留申病毒(ADV)的检测方法,本研究将ADV的VP2基因经重叠延伸PCR法进行扩增后克隆至表达载体p GEX-4T-1中进行原核表达,将纯化的重组蛋白作为包被抗原建立了ADV的Dot-ELISA检测方法,并与对流免疫电泳(CIEP)作对照试验。结果表明,抗原最适包被浓度为20μg/m L,最适血清稀释度为1∶200,酶标二抗最适工作浓度为1∶2 000,血清和酶标抗体最适反应温度为37℃,反应时间为45 min^60 min。阻断试验和交叉试验显示与常见的貂病毒性肠炎和貂犬瘟热阳性血清无交叉反应,表明其具有良好的特异性。采用建立的Dot-ELISA和CIEP对78份临床血清样品进行检测,结果显示Dot-ELISA阳性检出率为84.6%,CIEP的阳性检出率为80.8%,敏感性高于CIEP,两者符合率为96.2%。本研究建立的Dot-ELISA检测方法简便、快速、灵敏、特异、重复性好,适合基层单位用于水貂阿留申病快速诊断和疫病普查。
- 李晶时坤曾范利张妍孙凡婷刘杨杜锐
- 关键词：水貂阿留申病毒VP2基因原核表达DOT-ELISA检测
- 不同毒力结核分支杆菌感染RAW264.7巨噬细胞不同时间细胞因子转录水平标准曲线的建立及应用被引量：1
- 2014年
- 为检测不同毒力结核分枝杆菌感染巨噬细胞后细胞因子转录水平的变化,构建IL-6、IL-10、TNF-α重组标准质粒,建立了实时荧光定量PCR标准曲线。应用该方法对不同毒力结核分枝杆菌感染RAW264.7巨噬细胞6个时间点细胞因子的转录水平进行分析,结果显示H37Rv组、BCG组相比于对照组刺激后均使三种细胞因子的转录水平发生变化,其中IL-6和TNF-α发生明显变化。本试验通过对不同时间点细胞因子转录水平的分析为结核分枝杆菌对巨噬细胞凋亡机制的研究提供新思路。
- 张妍宋纪伟曾范利时坤李健明刘杨刘菲孙凡婷杜锐
- 关键词：RAW264.7细胞细胞因子
- 一种荷叶离褶伞多糖及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种荷叶离褶伞多糖及其制备方法和应用，涉及生物医药技术领域。该荷叶离褶伞多糖的制备方法包括以下步骤：(1)荷叶离褶伞子实体加入含有EDTA‑2Na的水溶液，进行超声处理后，再经水提取处理，得到提取液；(2)对...
- 王琦苏玲张妍李玉高敏尚学钰王天赐
- 媒介融合背景下移动短视频推动传统文化传播策略研究——以李子柒为例被引量：9
- 2020年
- 媒介融合意味着中国传统文化有了全新的传播路径和平台,当今时代,移动短视频已成为网民获取信息、社交娱乐的重要工具,移动短视频中最具代表性的产品“抖音”凭借高质量的视听内容、碎片化的传播方式和独具特色的互动形式拥有极高的用户黏性,成为短视频用户的聚集地。本文以李子柒抖音移动短视频传播为例,探究媒介融合背景下中国传统文化的传播路径,以及李子柒短视频传播的内容叙事特点与局限性,并借助融媒体时代李子柒的短视频提出更好地传播传统文化的策略。
- 张妍秦志爽
- 关键词：媒介融合传统文化
- 一种荷叶离褶伞多糖及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种荷叶离褶伞多糖及其制备方法和应用，涉及生物医药技术领域。该荷叶离褶伞多糖的制备方法包括以下步骤：(1)荷叶离褶伞子实体加入含有EDTA‑2Na的水溶液，进行超声处理后，再经水提取处理，得到提取液；(2)对...
- 王琦苏玲张妍李玉高敏尚学钰王天赐
- 一种人参或西洋参蜜片的生产方法
- 一种人参或西洋参蜜片的生产方法，用于人参储存产品的加工，克服已有的生产方法存在的活性成分损失量大和含糖量高等不足。生产步骤是：1、将参切片、烘干。2、将蜂蜜或木糖醇溶于水中，配制成重量比浓度40-60％的糖液。3、参片放...
- 田义新徐艳玲刘志阳刘雅娟张妍石磊冯鑫
- 不同毒力结核分枝杆菌对THP-1细胞凋亡及细胞因子表达的影响被引量：2
- 2015年
- 为探讨不同毒力结核分枝杆菌(MTB)感染巨噬细胞后不同时间点细胞凋亡情况与其分泌的几种主要细胞因子转录与表达之间的关系,建立THP-1体外巨噬细胞模型,用不同毒力MTB(强毒株H37Rv、弱毒株BCG)感染细胞,应用流式细胞术检测巨噬细胞在六个时间点的凋亡情况,应用荧光定量PCR检测细胞因子TNF-α、IL-10、IL-6的转录水平,应用ELISA方法检测细胞上清液中三种细胞因子的分泌量。结果显示:BCG组和H37Rv组的早期凋亡率均显著高于对照组(P<0.05)。巨噬细胞细胞因子TNF-α、IL-6的转录水平与分泌水平相符,弱毒菌株巨噬细胞凋亡情况随时间延长成上升趋势,其分泌的细胞因子TNF-α表现为相同趋势,IL-6表现为相反趋势。强毒株巨噬细胞凋亡情况低于弱毒株,细胞因子分泌情况复杂,一般表现为一种先增强后抑制的情况。本试验通过对不同时间点细胞因子与凋亡情况关系的研究为结核分枝杆菌对巨噬细胞凋亡机制提供新思路。
- 张妍宋纪伟曾范利时坤李健明刘杨刘菲孙凡婷杜锐
- 关键词：THP-1细胞细胞因子
- 一种人参或西洋参蜜片的生产方法
- 一种人参或西洋参蜜片的生产方法，用于人参储存产品的加工，克服已有的生产方法存在的活性成分损失量大和含糖量高不足。生产步骤是：1、将参切片、烘干。2、将蜂蜜或木糖醇溶于水中，配制成重量比浓度40-60％的糖液。3、参片放入...
- 田义新徐艳玲刘志阳刘雅娟张妍石磊冯鑫
- 文献传递
