张曦
- 作品数:2 被引量:0H指数:0
- 供职机构:山东大学生命科学学院微生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家重点实验室开放基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程更多>>
- 瑞氏木霉内切葡聚糖酶Ⅰ及其CBD的噬菌体表面展示系统的构建
- 2006年
- 为研究纤维素酶的酶活性和吸附特性之间的关系,将瑞氏木霉内切葡聚糖酶Ⅰ(endoglucanaseⅠ,EGⅠ)和其吸附结构域(cellulose-binding domains,CBD)的基因经PCR扩增后,连接到载体pCANTAB5E上,构建成噬菌粒展示载体pCANTAB5E-egⅠ和pCANTAB5E-egⅠ-cbd。将这些噬菌体展示载体转化到大肠杆菌TGⅠ中,在辅助噬菌体M13KO7的帮助下得到重组噬菌体。用ELISA和Somogyi方法分别测定了EGⅠ及其CBD的表面展示噬菌体对纤维素的亲和性和EGⅠ的CMC活性,结果显示EGⅠ及其CBD已功能展示于噬菌体表面。该系统的成功构建为今后利用噬菌体展示的方法进行纤维素酶的酶分子改造提供了基础。
- 黄琰张曦马安周庄国强曲音波
- 关键词:噬菌体表面展示
- 瑞氏木霉纤维素酶的酶分子改造
- 酶的体外定向进化是90年代以来兴起的蛋白质工程的新策略。较之蛋白质分子的理性设计,酶的体外定向进化属于非理性设计,适合于任何酶蛋白。它最大的优点是不需了解酶的空间结构和催化机制。通过人为创造特殊条件,模拟自然进化过程,可...
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- 文献传递