张玉梅 作品数:44 被引量:152 H指数:6 供职机构: 滨州医学院 更多>> 发文基金: 山东省高等学校科技计划项目 山东省自然科学基金 山东省医药卫生科技发展计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 农业科学 更多>>
与细菌抗原检测相关的虚拟仿真综合实验建设与应用 2023年 目的 设计与细菌抗原检测相关的虚拟仿真综合实验,评估其在临床医学专业本科教学中的应用效果。方法 以细菌抗原与抗体特异免疫反应为核心内容,把细菌分离培养、细菌O抗原和H抗原制备、玻片凝集与肥达试验融合为一个虚拟仿真综合实验。对照组采用传统实验教学模式,实验组采用传统实验操作与虚拟仿真综合实验相结合的教学模式,通过问卷调查和病原知识小测试比较两组教学效果。结果 两组各项指标比较存在差异,实验组高于对照组(P<0.05)。结论 虚拟仿真综合实验有利于学生系统掌握病原生物学、免疫学相关知识,加深对细菌生物学特性的理解,增强解决临床问题的能力。 张珍 乔媛媛 季晓飞 张玉梅 杜镇镇关键词:病原生物学 免疫学 细粒棘球蚴感染小鼠腹腔巨噬细胞表型及吞噬功能的变化 被引量:3 2016年 目的 研究细粒棘球蚴感染小鼠腹腔巨噬细胞(Mφ)的表型及吞噬功能变化,探索Mφ在宿主应答寄生虫感染中的作用。 方法 将24只6~8周龄雌性BALB/c小鼠随机分为对照组和感染组,每组12只。感染组每只小鼠腹腔注射2 000个原头节。对照组注射等体积PBS。于感染后5个月,收集对照组和感染组小鼠腹腔单核细胞,采用流式细胞术检测Mφ比例及其表面分子CD40、CD80、CD86、主要组织相容性复合体Ⅱ(MHCⅡ)的表达情况;采用中性红吞噬实验检测Mφ密度为1×10^6、5×10^5、1×10^5时的吸光度(A490值),评价其吞噬能力。 结果 对照组和感染组Mφ占单核细胞的比例分别为(20.75±5.91)%和(30.40±3.15)%,感染组高于对照组(P〈0.05)。感染组Mφ表面表达CD40、CD80、CD86、MHCⅡ的比例分别为(45.33±5.51)%、(61.00±10.61)%、(56.88±10.66)%和(27.00±3.82)%,较对照组的(41.43±6.19)%、(59.23±8.65)%、(10.91±1.82)%和(13.67±3.01)%均明显升高(P〈0.05)。感染组Mφ密度为1×10^6、5×10^5、1×10^5时的A490值分别为0.41±0.03、0.24±0.05和0.16±0.01,低于对照组的0.61±0.15、0.47±0.07和0.18±0.01,差异均有统计学意义(P〈0.01)。 结论 感染致小鼠腹腔Mφ吞噬能力下降,但其活化相关表面分子表达上调。 潘伟 张玉梅 孙芬芬 曹建平 沈玉娟关键词:细粒棘球绦虫 原头节 巨噬细胞 表型 分子伴侣幽门螺杆菌Hsp60与UreB的相互作用分析 被引量:2 2016年 目的检测并分析幽门螺杆菌(Hp)尿素酶β亚基(UreB)与Hsp60之间的相互作用。方法克隆Hp 26695的尿素酶β亚基基因(UreB)融合GST标签和Hsp60基因融合His标签,分别在大肠埃希菌中进行异源表达。提取两种蛋白,采用pull-down方法检测两者间的相互作用。利用Modeller 9v2软件,以E.coli的GroEL为基础模建Hp Hsp60的三维结构,再与已知的UreB结构利用AutoDock 4.2软件进行分子共模拟,分析二者的相互作用面和关键氨基酸。结果构建了Hp Hsp60和尿素酶β亚基(UreB)的大肠埃希菌异源表达体系并获得纯化蛋白;Pull-down试验显示部分未融合GST标签的Hsp60出现在GST-UreB的洗脱液中,表明Hsp60与GST-UreB之间存在相互作用;以E.coli的GroEL为基础模建了Hp Hsp60的三维结构,利用docking技术构建UreB与Hp Hsp60的相互作用模型,发现其主要的相互作用面位于Hsp60的α9与UreB的α2之间,其可能形成氢键的关键位点为UreB的α2上的T147氨基酸与Hsp60的α9上的E237、K238。结论 Hp Hsp60能直接与尿素酶β亚基(UreB)相互作用,Hsp60可能通过这种相互作用在UreB成熟过程中发挥分子伴侣功能。这为阐明Hp尿素酶的组装与成熟机制奠定了基础。 赵慧琳 季晓飞 张艳丽 柏雪莲 李娇娇 陈醒醒 张玉梅 李波清关键词:幽门螺杆菌 尿素酶 HSP60 分子伴侣 相互作用 糖尿病患者肠道定植肺炎克雷伯菌的分子流行病学特征 被引量:1 2023年 目的 了解糖尿病患者肠道肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KP)定植率、耐药性以及分子流行病学特征。方法收集烟台某医院内分泌科就诊的糖尿病患者粪便,分离培养和鉴定KP,使用拉丝试验测定其黏液表型,使用K-B纸片扩散法测定其耐药性,通过全基因组测序分析其荚膜血清型、毒力基因和多位点序列分型。结果 收集145份糖尿病患者的粪便标本,检出50株KP,检出率为34.48%,检出率在性别、糖尿病病程长短、血糖控制方面差异均无统计学意义。50株KP中高黏液表型菌株18株。检出的KP菌株对大部分常用抗生素耐药率较低。50株KP分析出26种血清型,其中K1血清型(20.00%,10/50)占比最高。K1血清型在高黏液表型KP中的比例(44.44%,8/18)明显高于非高黏液表型KP(6.25%,2/32)。高黏液表型KP在毒力基因all、arc、clb、fdr、fyu、glc、glx、hyi、iro、irp、iuc、iut、mce、rmpA、rmpA2、ybb、ybt和ylb的携带率高于非高黏液表型KP。多位点序列分型中分析出34种ST型,ST23检出率最高(14.00%,7/50),且均为K1血清型。结论 烟台地区糖尿病患者肠道中肺炎克雷伯菌当前定植率较高,耐药率较低,高黏液表型KP携带更多的毒力基因,K1-ST23菌株已初步占优势。 薛兆平 伊茂礼 徐卫皓 张玉梅关键词:糖尿病 肺炎克雷伯菌 耐药性 分子流行病学 临床腹泻患者贾第虫感染和分子特征研究 被引量:10 2015年 目的初步了解临床腹泻患者贾第虫的感染情况及分子特征。方法以2014年5-7月上海市某医院临床腹泻患者为研究对象,收集粪便样本95份,进行卢戈氏碘液染色,用光学显微镜检查贾第虫包囊。采用巢式PCR法扩增贾第虫磷酸丙糖异构酶基因(tpi),扩增产物测序后用BLAST、Clustal X 1.83和MEGA6.0软件进行同源性和系统发育分析。结果形态学观察发现1例腹泻患者感染贾第虫,阳性检出率为1.05%。其粪便样本经卢戈氏碘液染色后显微镜下可见清晰的包囊。对样本进行PCR检测,扩增片段大小约为530 bp,测序结果显示为贾第虫。经序列比对分析,并以tpi基因构建系统发育树,分析鉴定该分离株为集聚体B,与已报道的人源贾第虫分离株(KF271445)同源性为100%。结论临床腹泻患者中存在贾第虫感染,本研究结果可为了解贾第虫基因型特点及贾第虫病流行病学研究提供参考。 刘华 沈玉娟 张玉梅 王斌 刘晖 曹建平关键词:腹泻 贾第虫 形态学 分子特征 巢式PCR 系统进化树 CRM197修饰的肿瘤细胞裂解物疫苗抗肝癌作用研究 2015年 [目的]探讨CRM197能否增强H22肝癌细胞裂解物疫苗的抗肿瘤活性。[方法]反复冻融H22细胞制备裂解物,与CRM197偶联,制备H22-CRM197疫苗,以小鼠皮下移植瘤模型考察疫苗抗肿瘤活性,并对免疫学机制进行探讨。[结果]与PBS组相比,H22-CRM197免疫显著降低了荷瘤小鼠肿瘤重量(0.53±0.20 g VS 2.04±0.43 g,p<0.01);与PBS组比较,H22-CRM197组小鼠免疫血清中检测到高滴度的抗-H22抗体(p<0.01);H22-CRM197免疫能够有效地刺激脾淋巴细胞的增殖并诱导产生了明显靶向H22细胞的细胞毒性T淋巴细胞杀伤作用。[结论]CRM197可以显著增强H22肝癌细胞裂解物疫苗的抗肿瘤活性。 张艳丽 司春枫 张玉梅 赵慧琳 徐茂磊 李波清关键词:肝癌 Ipr1对巨噬细胞抗结核分枝杆菌感染免疫相关基因表达的影响 被引量:2 2011年 目的应用基因芯片技术检测Ipr1的表达对巨噬细胞感染分枝杆菌H37Ra后参与免疫应答的相关基因的表达差异。方法实验组与对照组细胞分别感染分枝杆菌H37Ra,基因芯片检测实验组和对照组细胞感染H37Ra 96h后免疫相关基因表达差异。定量PCR反应检测芯片结果中上调的3个基因的表达差异用以验证芯片结果的可靠性。结果基因芯片检测结果显示Ipr1基因的表达上调了11个固有免疫机制中相关基因表达,其中与MΦ抗Mtb感染关系密切的基因有:TLR2、TLR4I、rak1、Traf6、Ifngr1、Tnfrsf1a,而参与调节适应性免疫应答的相关基因如:IL-1,IL-12无明显表达差异。结论 Ipr1增强MΦ抗Mtb感染的机制可能主要是通过上调MΦ抗感染固有免疫机制的有关基因的表达从而发挥抗菌作用。本实验为进一步研究Ipr1促进MΦ的活化及杀伤胞内吞噬的Mtb的作用机制奠定了基础。 李娜 刘鹏飞 李波清 乔媛媛 张玉梅关键词:结核分枝杆菌 巨噬细胞 红茶菌发酵液抑菌作用研究 被引量:21 2008年 目的研究不同pH值下红茶菌发酵液及其蛋白提取液的抗菌作用,为探寻新的抗菌物质奠定基础。方法采用K-B纸片扩散法检测不同pH值下红茶菌发酵液及不同量的蛋白提取液分别对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的抑菌作用。结果红茶菌发酵液在酸性条件下对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的生长具有明显的抑制作用,而在碱性条件下均未表现出抑制作用;红茶菌蛋白提取液对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌有抑菌活性,红茶菌发酵液及蛋白提取液对白色念珠菌无明显抑菌作用。结论红茶菌发酵液具有明显的抑制金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌生长的作用。红茶菌发酵产生的蛋白质类物质是红茶菌液中的抑菌活性成分之一,具有用作食品抑菌剂的潜在价值。 张玉梅 房卫刚 李波清 张珍关键词:红茶菌 抑菌作用 纸片扩散法 抑菌蛋白 中药联合应用体外抗幽门螺杆菌的实验研究 被引量:4 2008年 目的研究金银花、白果、蜂胶对幽门螺杆菌的体外联合抗菌作用。方法应用棋盘法测定两两组合的不同浓度中药提取物对幽门螺杆菌的最低抑菌浓度,计算部分抑菌浓度(fractional inhibitory concentration,FIC)指数并判定联合效应。结果金银花与蜂胶联合应用的FIC指数为0.187(P<0.5);金银花与白果联合应用后,其FIC指数为0.502(P>0.5);白果与蜂胶联合应用的FIC指数为0.188(P<0.5)。结论金银花与蜂胶联合应用及白果与蜂胶联合应用均对幽门螺杆菌表现为协同作用;金银花与白果联合应用对幽门螺杆菌表现为相加作用;3种中药之间均无拮抗作用。 李波清 孟玮 张玉梅 刘春会 孙旭红关键词:金银花 白果 蜂胶 幽门螺杆菌 微小隐孢子虫CP23基因真核表达载体pcDNA3.0-23的构建及鉴定 被引量:4 2009年 目的构建微小隐孢子虫CP23真核表达载体pcDNA3.0-23。方法提取微小隐孢子虫基因组DNA,PCR扩增CP23基因片段,然后克隆至TA载体,通过PCR、酶切及测序鉴定后,将CP23基因片段用限制性内切酶切下,克隆至真核表达载体pcDNA3.0,构建pcDNA 3.0-23重组质粒。通过PCR、酶切对重组质粒pcDNA3.0-23进行鉴定。结果扩增出约340 bp的微小隐孢子虫CP23基因片段,并成功构建微小隐孢子虫CP23真核表达载体pcDNA3.0-23。结论微小隐孢子虫CP23真核表达载体pcDNA3.0-23的构建为微小隐孢子虫的基因疫苗研制奠定了基础。 张玉梅 李波清 柏雪莲 杨海霞 张珍 耿丽关键词:微小隐孢子虫 基因疫苗