彭力
- 作品数：3 被引量：21H指数：2
- 供职机构：浙江大学材料与化学工程学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省科技厅基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 人防御素的研究进展被引量：15
- 2003年
- 人防御素是近年发现的人体内重要的内源性抗生素 ,已引起国内外生物和医学研究者的日益重视。这里综述了人防御素的组织分布、分子生物学特点、作用机理、医学及药用价值等方面的研究进展 ,对采用基因重组方法生产人防御素的方法进行了评述 ,并展望了防御素的应用前景和发展趋势。
- 彭力徐志南方向明吴金民岑沛霖
- 关键词：抗菌肽分子生物学
- 人β-防御素2在大肠杆菌中的高效表达和纯化被引量：7
- 2006年
- 目的:研究具有生物学活性的人防御素2(HBD 2)多肽在大肠杆菌中的原核高效表达的可行性及融合表达蛋白的分离纯化技术。方法:PCR扩增不含前导序列的HBD 2成熟肽的编码框全长的cDNA片段(smHBD 2-cDNA),利用B g lⅡ和B amHⅠ同尾酶构建多拷贝串联的nsmHBD 2-cDNA的克隆载体,利用N colⅠ和H indⅢ限制性内切酶构建融合表达载体pET 32-nsmHBD 2-cDNA,在大肠杆菌中BL 21(DE 3)中诱导表达含HBD 2的融合蛋白,SDS-PAGE分析产量。可溶蛋白经亲和层析、肠激酶酶切、离子交换层析等方法分离、纯化HBD 2多肽。采用液体培养法,测定重组人β防御素2对大肠杆菌的抑菌活性。结果:构建了n为1、2、4或8倍的多拷贝串联nsmHBD 2-cDNA表达载体,1、2和4倍smHBD 2-cDNA的可溶蛋白比例分别为52%、48%和31%;而8倍HBD 2-cDNA几乎不含可溶蛋白,目标蛋白以包含体形式表达,集中在不可溶部分。重组HBD 2对E.coli K 12 D 31有较强的抑制作用,在终浓度约为0.4至0.5μg/m l时,90%细胞的生长被抑制。结论:采用融合表达、多拷贝串联表达方式,可增加产物长度以弱化蛋白酶的降解作用,也减弱了目标蛋白产物对宿主的毒性;适当的多拷贝串联基因可以提高HBD 2的产量,但拷贝数过高会影响重组蛋白表达产量,且易形成不溶蛋白;在大肠杆菌中可达到具有生物学活性的HBD 2多肽的原核高效表达。
- 钟志霞阮红范立梅彭力方向明徐志南
- 关键词：Β-防御素抗菌肽
- 重组人β-防御素的表达策略研究
- 人β-防御素是近来年发现的具有广谱抗菌活性并在机体抵御外来微生物入侵中起防御作用的一类阳离子抗菌肽。 本论文研究了使用基因工程技术重组表达可溶性人β-防御素的方法。以人β-防御素-2(HBD-2)为示例蛋白，建立了...
- 彭力
- 关键词：基因工程可溶性蛋白分离纯化
- 文献传递
