彭涛
- 作品数：7 被引量：28H指数：3
- 供职机构：复旦大学附属儿科医院心血管中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金上海市卫生系统百名跨世纪优秀学科带头人培养计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 连接蛋白40、45在连接蛋白43基因敲除小鼠胚胎心脏的时空表达被引量：3
- 2009年
- 目的检测连接蛋白（Cx）40、45在Cx43基因敲除小鼠胚胎心脏的时空表达。方法选取Cx43基因敲除胎鼠，通过PCR方法鉴定其基因型，以Cx43基因敲除胎鼠纯合子作为研究对象，野生型为对照组，获取胎龄10．5、11．5、12．5、13．5、14．5、15．5d纯合子及野生型各2只胎鼠，免疫组化检测Cx40、Cx45在心脏各部位的表达，SCIM显微图像分析系统对染色强度进行定量分析。结果（1）野生型小鼠心室原始小梁网在胎龄10．5d就已经有Cx40表达（A值为8．6），随后在心房、心室、小梁网、房室间隔和主、肺动脉壁表达逐日增加，胎龄14．5d在心室部位达到高峰（A值为94．8），然后逐渐减少；Cx43基因敲除小鼠胚胎心脏发育中Cx40在各部位的时空表达趋势与野生型相似，胎龄10．5d在肌小梁A值为7．9，胎龄14．5d心室部位为75．8。纯合基因敲除型胎鼠Cx40的表达量明显弱于野生型。（2）野生型小鼠肌小梁部在胎龄10．5d出现Cx45的表达（A值为20．0），随后在房室各部位相继表达，胎龄12．5d在心房部位达到高峰（A值为49．6），然后表达逐渐减少；Cx43基因敲除小鼠胚胎心脏发育中Cx45在各部位的时空表达趋势与野生型相似，胎龄10．5d在肌小梁A值为17．8，胎龄12．5d心房部位为31．5。纯合基因敲除型胎鼠Cx45的表达量明显弱于野生型。结论Cx40和Cx45在Cx43基因敲除小鼠纯合子胎龄10．5～15．5d这一心脏分隔、瓣膜发育的关键时期表达异常，可能与Cx43基因敲除小鼠心脏的异常发育有关。
- 谢利剑黄国英赵晓睛齐春华彭涛周国民
- 关键词：胎儿心脏连接蛋白43小鼠
- 转化生长因子β_2在小鼠心脏近端流出道隔心肌化过程中的作用被引量：6
- 2006年
- 目的利用Cx43基因剔除（KO）小鼠模型,观察TGFβ2在心脏流出道隔的表达,探讨Cx43基因剔除小鼠心脏流出道隔心肌化异常与TGFβ2的关系;采用胚心脏体外培养技术,研究外源性TGFβ2是否促进流出道隔心肌化过程.方法选用胚E12.5～E15.5 d的Cx43基因剔除纯合型（Cx43-/-）、杂合型（Cx43＋/-）及野生型（Cx43＋/＋）C57/BL6小鼠作为研究对象,采用PCR方法鉴定基因型,免疫组织化学法测定TGFβ2;选用野生型E12.5进行胚心脏体外培养至E15.5,同时加用TGβ2不同剂量干预处理,免疫组织化学法测定肌节肌动蛋白α-SCA的表达.结果 Cx43 KO小鼠胚期心脏近端流出道隔心肌细胞明显减少,尤其以E13.5和E14.5的Cx43-/-小鼠为著.与Cx43＋/＋小鼠对照,Cx43-/-小鼠心脏近端流出道隔TGFβ2的表达明显降低,以E14.5较为显著;E14.5的Cx43＋/-小鼠表达也有降低.然而TGFβ2不同剂量干预组均没有见到明显的促进离体心脏心肌化的作用.结论 Cx43 KO小鼠心脏近端流出道隔存在明显的心肌化延迟.TGFβ2表达减少可能参与了Cx43-/-小鼠心肌化异常的发病机制.体外应用TGFβ2可能难以模拟在体的时空表达模式,或者心肌化的进行需要精确的TGFβ2的剂量和严格的培养条件.
- 赵晓晴黄国英谢利剑彭涛周国民
- 关键词：转化生长因子Β2间隙连接蛋白基因剔除
- 小鼠心脏神经嵴细胞的体外培养及其生物学特性被引量：1
- 2006年
- 目的体外培养和鉴定心脏神经嵴细胞,探讨其生物学特性。方法取8·5d小鼠胚胎枕中部至第3体节神经管,组织块法无血清条件培养获心脏神经嵴细胞,采用转录激活因子2α(AP-2α)作为其生物学标记物,观察其迁移、分化等生物学特性。结果从胎鼠神经管中分离培养的细胞AP-2α表达阳性,具有迁移特性,传代后以含血清培养基培养后能自然分化成神经元和神经胶质细胞。结论体外培养可成功获得心脏神经嵴细胞,且具有迁移特性和多向潜能分化能力。
- 彭涛黄国英赵晓晴谢利剑齐春华周国民
- 关键词：心脏神经嵴生物学细胞分化
- 小鼠心脏神经嵴细胞的体外培养及其生物学特性研究
- 目的:体外培养和鉴定心脏神经嵴细胞,探讨其生物学特性。方法:取8．5天小鼠胚胎枕中部至第 3体节神经管,组织块法无血清条件培养获心脏神经嵴细胞,采用转录激活因子2α(AP-2α)作为其生物学标记物,观察其迁移、分化等生物...
- 彭涛黄国英赵晓晴谢利剑齐春华周国民
- 文献传递
- Cx43基因对近端流出道隔心肌化过程的调控机制被引量：6
- 2006年
- 目的:探讨connexin43(Cx43)基因在小鼠近端流出道隔心肌化的作用及其机制。方法:选用胚胎(ED)11.5 d至出生后1 d的Cx43基因剔除(KO)纯合型(Cx43-/-)、杂合型(Cx43+/-)及野生型(Cx43+/+)C57/BL6小鼠作为研究对象;采用PCR方法鉴定基因型;HE染色观察心脏结构,免疫组化法测定横纹肌肌动蛋白α-SCA、凋亡相关分子active caspase-3及神经嵴细胞的标志物AP-2的表达。结果:①Cx43-/-小鼠大多出生后24 h内即死亡。大体解剖见明显的右室流出道圆锥部异常膨隆,右心房扩张;组织切片HE染色示右室流出道壁大量异常小梁状组织增生突起,形成多个囊状结构,右室流出道腔明显狭窄,右室腔扩张。Cx43+/-和Cx43+/+心脏无明显异常。②Cx43-/-小鼠近端流出道隔中央区域α-SCA的表达明显滞后。③Active caspase-3组化显示Cx43+/+凋亡细胞主要出现在近端流出道隔,ED12.5至ED15.5均可见到;Cx43+/-凋亡减少,Cx43-/-则仅见很少凋亡细胞。④Cx43-/-流出道AP-2的表达增多,且表达位置异常。结论:Cx43 KO小鼠以右室流出道异常增生引起的梗阻性畸形为主要特征,该病变过程可能与胚胎期近端流出道隔心肌化迟滞有关,其近端流出道隔细胞凋亡减少和神经嵴细胞表达异常很可能参与了流出道心肌化异常的形成,表明Cx43在近端流出道隔心肌化过程中具有重要作用。
- 赵晓晴黄国英谢利剑彭涛陈萍周国民
- 关键词：基因CX43基因敲除神经嵴
- Cx43基因剔除小鼠心脏锥干部的异常发育被引量：19
- 2005年
- 目的探讨Cx43基因缺陷小鼠心脏锥干部发育异常。方法选用胚胎(embryon icday,E)11.5 d至出生后1 d C57/BL6小鼠作为研究对象,根据基因型分为Cx43基因剔除纯合子(Cx43-/-)、杂合子(Cx43+/-)及野生型(Cx43+/+),采用聚合酶链反应方法鉴定基因型。免疫组化法测定横纹肌肌动蛋白α-SCA、平滑肌肌动蛋白α-SMA、神经嵴细胞的标志物AP-2α的表达;原位杂交方法检测AP-2αmRNA的表达。结果Cx43-/-出生后24 h内即死亡。大体解剖见明显的右室流出道圆锥部异常膨隆。HE染色示右心室流出道壁大量异常小梁状组织增生突起,右室流出道腔明显狭窄。Cx43+/-无明显异常。Cx43-/-近端流出道隔中央区域α-SCA的表达明显滞后。Cx43+/-与Cx43-/-小鼠右室流出道与Cx43+/+比较可见比较强的α-SMA的表达,主要位于右侧锥干部的异常增生部位。Cx43-/-小鼠在E13.5流出道隔AP-2α蛋白及其mRNA水平表达均增多,且表达位置异常。结论Cx43 KO小鼠以右室流出道异常增生引起的梗阻性畸形为主要特征。Cx43 KO小鼠胚胎期近端流出道隔心肌化迟滞。Cx43 KO小鼠锥干部α-SMA的表达不能正常消退,心肌细胞发育不成熟。神经嵴细胞的发育异常可能参与了Cx43基因缺陷小鼠锥干部畸形的发病机制。
- 赵晓晴黄国英谢利剑彭涛周国民
- 关键词：室性流出道阻塞连接蛋白43基因剔除小鼠异常发育干部
- 小鼠心脏神经嵴细胞的体外培养及其生物学特性研究
- 目的体外培养和鉴定心脏神经嵴细胞,探讨其生物学特性。方法取8．5天小鼠胚胎枕中部至第3体节神经管,组织块法无血清条件培养获心脏神经嵴细胞,采用转录激活因子2α(AP-2α)作为其生物学标记物,观察其迁移、分化等生物学特性...
- 彭涛黄国英赵晓晴谢利剑齐春华周国民
- 文献传递
